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更新时间:2025-11-26
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B16小鼠黑色素瘤瘤株是源自C57BL/6近交系小鼠的经典恶性肿瘤模型,以稳定的黑色素合成能力、明确的侵袭转移特性及良好的实验兼容性,成为黑色素瘤基础研究与转化应用的核心工具,为解析发病机制、开发治疗策略提供了标准化体外平台。
该瘤株源自小鼠自发性皮肤黑色素瘤,经体外纯化培养建立,遗传背景均一可追溯。作为神经嵴来源肿瘤细胞,其核心特征是兼具黑色素细胞特异性功能与恶性肿瘤属性:既能持续合成黑色素,又表现为不受控增殖、强侵袭性及肺转移倾向。这种“色素合成-恶性表型"的结合特性,使其成为研究色素相关肿瘤独特发病机制的精准载体。
B16瘤株的生物学特性ji具辨识度。形态上呈多边形或梭形,贴壁生长且排列紊乱,胞质内富含棕黑色黑色素颗粒,细胞核大而圆、核仁清晰,色素颗粒使其易于观察识别。增殖方面活性旺盛,标准条件下种群倍增时间24-36小时,传代50代内仍保持稳定的色素合成能力与转移潜能。核心优势是转移能力可控,体外可模拟侵袭过程,体内接种后易形成肺转移灶,为转移机制研究提供理想模型。
体外培养的关键是维持黑色素合成活性。适宜环境为37℃、5%CO₂恒温培养箱,推荐含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基,添加2mM谷an酰胺保障代谢需求。传代需在细胞融合度70%-80%时进行,用消化液轻柔处理2分钟,避免剧烈吹打导致色素颗粒释放。冻存采用含10%二甲基亚砜的保护剂,细胞浓度1×10⁶个/ml,梯度降温后液氮保存,复苏存活率可达90%以上。
在科研应用中,B16瘤株的价值贯穿黑色素瘤研究全链条。黑色素代谢研究中,可通过检测色素含量与酪an酸酶活性,解析黑色素生成通路调控机制;转移研究中,利用其体外侵袭能力与体内肺转移特性,构建Transwell及动物模型,揭示转移分子网络。药物研发领域,是抗肿瘤药物初筛的经典工具,可同时评估药物对细胞增殖的抑制作用及对色素代谢的靶向调控效果。
免yi治疗研究中,其可作为肿瘤抗原来源制备疫苗,或用于评估免疫检查点抑制剂疗效。基因功能研究方面,高效的外源基因转染效率使其成为MITF、TYR等黑色素瘤相关基因的验证载体,同时也适用于光动li治疗等新型疗法的疗效评估。
培养中需注意:色素合成能力受环境影响大,长期高浓度血清可能导致部分细胞色素减少,需定期通过显微镜观察或酪an酸酶活性检测验证功能;建议使用30代以内细胞,避免传代过久导致转移潜能衰减;定期进行STR鉴定与支原体检测,及时更换培养基清除色素碎片,维持良好培养环境。
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