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更新时间:2025-11-04
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MDA-MB-468人乳腺癌细胞
MDA-MB-468人乳腺癌细胞是三阴性乳腺癌(TNBC)研究领域ji具代表性的人源性肿瘤细胞系,源于一位 51 岁女性转移性乳腺癌患者的胸腔积液样本,因稳定呈现三阴性乳腺癌的分子特征(雌激素受体 ER、孕激素受体 PR、人表皮生长因子受体 2 HER2 均阴性)、高侵袭转移潜能及表皮生长因子受体 EGFR 高表达等特性,成为解析三阴性乳腺癌发病机制、探索靶向治疗策略及筛选抗乳腺癌药物的核心体外模型,为攻克这一预后较差的乳腺癌亚型提供了关键实验载体。
从细胞来源与核心生物学特性来看,MDA-MB-468 细胞的建立背景精准契合三阴性乳腺癌的临床病理特征,其生物学属性为研究提供了显著优势。来源上,该细胞系直接分离自转移性乳腺癌患者的胸腔积液,经体外培养驯化后,保留了原代肿瘤细胞的恶性表型 —— 三阴性乳腺癌约占所有乳腺癌的 15%-20%,因缺乏 ER、PR、HER2 等常规治疗靶点,临床治疗手段有限,而 MDA-MB-468 细胞不仅缺失这三种受体表达,还携带多种三阴性乳腺癌常见的基因异常,与临床患者肿瘤细胞的分子特征高度一致。形态层面,MDA-MB-468 细胞呈典型上皮样贴壁生长,显微镜下可见细胞排列松散、形态不规则,部分细胞呈梭形或多角形,胞质丰富,细胞核大且核仁明显,核质比高,具备恶性肿瘤细胞的显著异型性,传代 30 代后仍能稳定维持这一形态特征,无明显表型漂移。功能层面,该细胞拥有两大核心优势:一是高侵袭转移潜能,体外 Transwell 实验中,其穿透基质胶的能力显著高于其他乳腺癌细胞系,可模拟三阴性乳腺癌易早期转移的临床特点,为研究肿瘤侵袭转移机制提供理想模型;二是EGFR 高表达,作为三阴性乳腺癌重要的潜在治疗靶点,该细胞中 EGFR 蛋白表达水平显著升高,且 EGFR 信号通路持续激活,为探索 EGFR 靶向治疗策略提供了精准的研究对象。分子层面,除 ER、PR、HER2 阴性及 EGFR 高表达外,MDA-MB-468 细胞还存在 p53 基因突变、PI3K/Akt 信号通路异常激活等三阴性乳腺癌常见的分子改变,稳定表达乳腺癌相关标志物(如细胞角蛋白 19 CK19、上皮细胞黏附分子 EpCAM),遗传背景稳定,为研究三阴性乳腺癌的分子机制与靶向治疗提供了丰富的靶点研究平台。
在细胞培养与维护方面,MDA-MB-468 细胞的培养条件需重点关注其侵袭特性与分子表型的稳定维持。基础培养基推荐使用L-15 培养基(无需 CO₂环境,可在常氧条件下培养,更适配该细胞的代谢需求),添加 10% 胎牛血清(FBS,需筛选无支原体、低内毒素的优质批次 —— 血清质量直接影响细胞增殖活性与 EGFR 表达水平,劣质血清可能导致细胞生长停滞或信号通路表达异常)和 1% 抗污染试剂(抑制细菌、真菌污染,避免贴壁细胞因污染出现大面积脱落)。培养环境可在 37℃、常氧条件下进行(无需 CO₂培养箱),简化了培养操作;同时需特别注意细胞密度控制:当细胞汇合度达 70%-80% 时需及时传代,若过度汇合会导致细胞堆积生长,不仅降低增殖速率,还可能增强细胞的侵袭能力,影响实验结果的稳定性;传代时采用含 EDTA 的细胞消化液,37℃孵育 3-5 分钟,待细胞间隙增大、形态变圆后立即终止消化,传代比例建议为 1:2-1:3,避免消化过度损伤细胞表面的黏附分子(如 E - 钙粘蛋白,其表达下调与肿瘤侵袭能力增强密切相关),影响细胞的侵袭表型。细胞冻存需采用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的 L-15 冻存液,按 “4℃放置 30 分钟→-20℃静置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存" 的梯度降温流程操作,复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴中快速融化,离心去除 DMSO 后用新鲜培养基重悬接种,复苏后 24 小时更换培养基,可将细胞存活率提升至 85% 以上,最da程度保留其分子特征与侵袭潜能。
在科研应用领域,MDA-MB-468 细胞凭借 “三阴性表型 + 高侵袭性 + EGFR 高表达" 的独特优势,覆盖三阴性乳腺癌研究的多个关键方向。在发病机制研究中,它是解析三阴性乳腺癌恶性进展的核心工具:科研人员通过基因编辑技术(如 CRISPR/Cas9 敲除、慢病毒过表达)调控细胞中 EGFR、p53、PI3K 等目标基因,观察细胞增殖、凋亡、侵袭能力的变化,结合分子检测(如 Western Blot、qPCR)分析基因对三阴性乳腺癌进展的调控作用,已明确 EGFR-PI3K/Akt 信号通路在三阴性乳腺癌侵袭转移中的关键调控地位。在药物研发领域,MDA-MB-468 细胞是三阴性乳腺癌靶向药物与hua疗药物筛选的 “黄金模型":一方面可用于 EGFR 靶向药物(如 EGFR 抑制剂、单克隆抗体)的敏感性研究,通过检测药物对细胞增殖的抑制率及 EGFR 信号通路的抑制效果,评估药物的靶向治疗潜力;另一方面可用于hua疗药物(如铂类药物、紫shan醇类药物)的体外疗效评价,通过 MTT 法、克隆形成实验检测药物对细胞存活的影响,结合流式细胞术检测细胞凋亡率,筛选潜在抗三阴性乳腺癌化合物,为临床用药提供实验依据。此外,在肿瘤微环境研究中,MDA-MB-468 细胞可与成纤维细胞、免疫细胞共培养,构建体外肿瘤微环境模型,研究微环境细胞对三阴性乳腺癌侵袭转移的影响,为探索联合治疗策略(如靶向肿瘤微环境 + 抗肿瘤细胞)提供实验支撑。
使用 MDA-MB-468 细胞时需注意两点关键事项:一是长期培养需定期验证分子表型,通过免疫荧光或 Western Blot 检测 ER、PR、HER2、EGFR 的表达水平,确保细胞仍维持三阴性乳腺癌的核心分子特征,避免因传代导致表型漂移;二是开展侵袭转移相关实验时,需严格控制实验条件(如基质胶浓度、培养时间),不同批次细胞的侵袭能力可能存在差异,建议每批细胞先进行预实验确定最佳实验参数。此外,作为人源肿瘤细胞系,实验操作需在生物安全二级实验室进行,严格遵守生物安全规范。
综上,MDA-MB-468 人乳腺癌细胞以其典型的三阴性乳腺癌分子特征、高侵袭转移潜能及 EGFR 高表达等特性,成为连接三阴性乳腺癌基础研究、靶向药物研发与临床转化的重要桥梁,为深入解析三阴性乳腺癌发病机制、开发高效治疗方案提供了不可替代的实验支撑,对推动三阴性乳腺癌研究领域的发展具有重要意义。
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