Bend.3小鼠脑微血管内皮细胞

Bend.3小鼠脑微血管内皮细胞是源自小鼠脑微血管内皮的永生化细胞模型，以其保留的血脑屏障核心特征、稳定的生物学功能及便捷的培养特性，成为血脑屏障机制研究、中枢神经系统疾病建模及药物递送评估的关键实验材料，为神经科学与生物医药领域的研究提供了可靠支撑。

来源与细胞本质方面，Bend.3细胞源自C57BL/6小鼠的脑微血管内皮组织，通过病毒介导的永生化技术建立稳定细胞系，既保留了原代脑微血管内皮细胞的核心属性，又克服了原代细胞增殖能力弱、传代受限的缺陷。作为构成血脑屏障的核心细胞类型，该细胞系天然表达血脑屏障特异性标志物，如血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）、紧密连接蛋白（ZO-1、occludin）等，其细胞本质与体内脑微血管内皮细胞高度契合，为模拟血脑屏障生理功能提供了理想载体。

核心生物学特性上，Bend.3细胞展现出典型的脑微血管内皮细胞特征与功能优势。形态学层面，细胞呈扁平多边形或短梭形，贴壁生长时呈“铺路石"样排列，细胞边界清晰，胞质均匀，细胞核呈椭圆形位于细胞zhong央，符合内皮细胞的典型形态。生长特性方面，细胞增殖活性稳定，在标准培养条件下种群倍增时间约为24-36小时，传代过程中细胞形态与屏障功能不易退化，可连续传代多次仍保持良好状态。其zui突出的特性是血脑屏障相关功能，体外培养可形成紧密的细胞单层，产生较高的跨内皮电阻值（TEER），模拟血脑屏障的物质转运选择性，同时具备内皮细胞的基础功能，如血管生成潜能与炎症因子响应能力。

体外培养与操作的标准化为Bend.3细胞的广泛应用奠定基础。适宜的培养环境为37℃、5%CO₂的恒温培养箱，基础培养基推荐使用含10%胎牛血清、1%内皮细胞生长添加剂（ECGS）的DMEM/F12培养基，生长添加剂可促进细胞增殖并维持其内皮细胞表型。传代操作需在细胞融合度达到80%-90%时进行，采用消化液处理1-2分钟，待细胞间隙增大、形态收缩为圆形时终止消化，轻柔吹打避免细胞损伤，形成单细胞悬液后即可接种。冻存时使用含10%二甲基亚砜的胎牛血清作为保护剂，细胞浓度调整为1×10⁶-1×10⁷个/ml，经梯度降温后置于液氮中保存，复苏时37℃水浴快速解冻并离心处理，可有效维持细胞活力与屏障功能。

科研应用领域中，Bend.3细胞的价值体现在神经研究的多个维度。血脑屏障机制研究中，其体外形成的紧密单层模型可用于解析紧密连接的调控机制、物质跨屏障转运规律，以及炎症、缺血等病理状态下血脑屏障的破坏机制，为中枢神经系统疾病的病理研究提供依据。药物研发方面，该细胞系是血脑屏障穿透性评估的核心工具，通过检测药物对细胞单层的通透性，筛选具有血脑屏障穿透能力的神经药物，同时用于评估药物对血脑屏障完整性的影响，保障用药安全性。

在神经疾病建模中，Bend.3细胞可与星形胶质细胞、周细胞等共培养构建血脑屏障体外模型，模拟阿尔茨海默病、脑卒中、脑肿瘤等疾病状态下的屏障功能异常，用于探索疾病发病机制及潜在治疗靶点。此外，该细胞系还用于脑血管生成研究，其血管生成潜能可用于解析脑缺血后血管修复机制，以及脑肿瘤微血管生成的调控规律，为抗血管生成治疗提供实验支撑。在病毒学研究中，其对神经毒性病毒的易感性使其成为研究病毒突破血脑屏障机制及中枢神经系统感染路径的理想工具。

实际应用中需注意，Bend.3细胞的血脑屏障功能受培养条件影响较大，需严格控制培养基成分、接种密度及培养时间，以确保形成稳定的紧密单层。同时，需定期进行细胞身份鉴定与功能验证，如检测紧密连接蛋白表达及跨内皮电阻值，避免细胞功能退化影响实验结果的可靠性。