HFT-8810人胎儿胸腺细胞株源自人胎儿胸腺组织，贴壁生长，参与免疫细胞发育，用于胸腺发育机制、免疫相关疾病及药物筛选研究。

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更新时间：2025-11-12

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HFT-8810人胎儿胸腺细胞株

一、细胞基本生物学特性

HFT-8810人胎儿胸腺细胞株 源自人胎儿胸腺组织（多取自孕中期健康胎儿胸腺皮质与髓质区），经原代分离纯化与体外建株获得，属混合细胞系（含胸腺上皮细胞、胸腺基质细胞及少量未成熟 T 淋巴细胞前体），保留胸腺组织te有的免疫细胞发育支持功能，具有有限增殖能力（传代次数约 20-25 代），是研究胸腺发育机制、T 细胞分化及免疫相关疾病的关键体外模型。其在模拟胸腺微环境、支持 T 细胞前体分化及响应免疫调控信号方面表现稳定，广泛应用于免疫学、细胞生物学及医学领域。

形态上，该细胞株呈混合形态特征：胸腺上皮细胞贴壁生长时呈多边形或上皮样，排列呈 “铺路石样"（模拟胸腺皮质区上皮细胞结构），胞体直径 12-18μm，胞质丰富且含大量颗粒（为分泌胸腺相关活性物质提供结构基础）；胸腺基质细胞呈梭形或星形，散在分布于上皮细胞间，胞体直径 8-12μm，胞质突起细长（参与胸腺微环境构建）；少量未成熟 T 淋巴细胞前体呈圆形，悬浮或半贴壁生长，胞体直径 6-8μm，核质比高。细胞核形态因细胞类型而异：上皮细胞核呈椭圆形、位于细胞中央，基质细胞核呈梭形、偏向细胞一端，淋巴细胞前体核呈圆形、占细胞体积 2/3 以上，染色质均呈细网状，核分裂象偶见（正常培养条件下分裂象比例约 2%-3%，符合胎儿来源细胞增殖特性）。体外培养时，细胞形态随功能状态变化：在免疫刺激条件下（如添加 IL-2），淋巴细胞前体数量增多；在胸腺发育抑制信号作用下（如添加糖皮质激素），上皮细胞分泌功能减弱，精准模拟体内胸腺组织的功能状态转换。

功能特性方面，HFT-8810 细胞株具备胸腺组织专属功能，与其他免疫器官来源细胞差异显著。一是T 细胞发育支持功能：可分泌多种胸腺特异性细胞因子，如 IL-7（维持 T 细胞前体存活）；同时表达 T 细胞发育必需的表面分子（如 CD40、HLA-DR），体外与骨髓造血干细胞共培养时，可诱导干细胞分化为 CD4⁺CD8⁺双阳性 T 细胞（分化率达 30%-40%），模拟胸腺内 T 细胞发育过程，是研究 T 细胞分化机制的核心模型。二是胸腺微环境构建功能：细胞间通过紧密连接、黏附连接形成三维网络结构，分泌 Ⅳ 型胶原、层粘连蛋白等基质成分，构建类似体内的胸腺微环境；该微环境可调控 T 细胞受体（TCR）重排，促进自身反应性 T 细胞凋亡（阴性选择），维持免疫耐受，为研究胸腺免疫耐受机制提供依据。三是免疫调节功能：对免疫调控因子（如 IFN-γ、TGF-β）敏感，10ng/mL IFN-γ 处理 24 小时，细胞分泌的促炎因子（如 IL-6、TNF-α）表达升高 3-5 倍；10ng/mL TGF-β 处理后，抗炎因子（如 IL-10）表达升高 4-6 倍，参与免疫应答平衡调控，模拟病理状态下胸腺的免疫调节异常，为研究免疫相关疾病机制提供实验支持。

分子表型上，该细胞株高表达胸腺组织特异性标志物：胸腺上皮细胞表达细胞角蛋白 8/18（CK8/18，胞质阳性，阳性率≥85%）；胸腺基质细胞表达波形蛋白（Vimentin，胞质阳性，阳性率≥90%）、CD90（细胞膜阳性，阳性率≥75%）；未成熟 T 淋巴细胞前体表达 CD34（细胞膜阳性，阳性率≥10%）、CD7（细胞膜阳性，阳性率≥15%），其中 CK8/18⁺Vimentin⁺双阳性细胞比例≥70%，是其胸腺细胞株身份的核心鉴定依据；同时表达免疫调控相关分子（IL-7 受体阳性率≥65%、CD40 阳性率≥70%）；细胞内信号通路符合胸腺发育调控机制：Notch 通路（激活时促进 T 细胞分化）、JAK-STAT 通路（调控细胞因子介导的免疫反应）、NF-κB 通路（参与免疫炎症反应）；核型稳定（46,XX/XY 正常二倍体，染色体畸变率 < 1%），无致瘤性（裸鼠接种后无肿瘤形成），确保实验的临床相关性与可靠性。

二、体外培养关键条件

HFT-8810 细胞株培养需重点维持其 T 细胞支持功能与微环境构建能力，避免培养条件不当导致功能丢失。

培养基选择：优先使用 RPMI-1640/DMEM（1:1）混合培养基，添加 15% 胎牛血清（FBS，低内毒素≤5 EU/mL，选择未热灭活血清以保留免疫活性因子）、1% 非必需氨基酸（NEAA）、10ng/mL IL-7（维持淋巴细胞前体活性）、100U/mL 双抗；培养基 pH 值控制在 7.2-7.4，渗透压 280-300 mOsm/kg（渗透压异常会导致细胞因子分泌能力下降 45% 以上）。开展 T 细胞分化实验时，用含 5% FBS 的培养基饥饿 12 小时（减少血清对细胞分化的干扰）；免疫调控实验可使用无血清培养基（排除血清成分对免疫信号的影响）；维持胸腺上皮细胞功能时，需添加 5μg/mL 胰岛素（促进胸腺相关活性物质合成）。

培养环境参数：温度稳定维持在 37℃±0.5℃，CO₂浓度 5%±0.3%，相对湿度≥95%；温度波动超过 ±1℃会导致细胞增殖率下降 35%，胸腺相关活性物质表达减少 40%；CO₂浓度低于 4% 会导致培养基 pH 值升高，细胞形态畸变；高于 6% 则导致 IL-7 分泌下降，需通过培养箱实时监控调整；模拟胸腺低氧微环境时（如生理状态下胸腺髓质区缺氧），可将氧气浓度降至 3%-5%，诱导 HIF-1α 表达升高，用于研究缺氧对胸腺发育的影响。

传代操作要点：细胞融合度达 70%-80% 时进行传代（避免过度融合导致细胞间连接破坏，影响微环境功能）；操作步骤：用无菌 PBS 轻柔清洗 2 次（避免剧烈冲洗破坏上皮细胞完整性），加入含 EDTA 的 0.25% 消化液（温和消化，上皮细胞抗消化能力强，可适当延长消化时间至 5-7 分钟），镜下见上皮细胞间隙增大、开始脱落时终止消化，加入含血清的培养基中和，轻柔吹打至单细胞悬液（避免用力吹打导致淋巴细胞前体损伤），按 1:2 比例接种至预包被胶原的培养皿（胶原促进上皮细胞黏附与形态维持，贴壁率≥90%）；传代次数建议不超过 22 代，避免细胞衰老导致 T 细胞支持功能衰减。

关键注意事项：细胞对血清批次敏感（不同批次血清可能导致胸腺相关活性物质分泌量波动 40%、T 细胞分化率差异 35%），建议长期使用同一批次胸腺细胞专用血清，更换前需验证 CK8/18/Vimentin 表达、IL-7 分泌量及 T 细胞分化支持能力，确保与原批次差异 < 20%；培养过程中避免频繁换液（每 2-3 天换液 1 次，频繁换液会破坏细胞分泌的因子微环境）；定期检测细胞功能（如每 5 代检测一次胸腺相关活性物质分泌量，需≥20pg/mL/24h）；操作时严格无菌（胎儿来源细胞对污染抵抗力弱，培养基可添加 0.1% 抗真菌试剂）。

三、核心科研应用领域

胸腺发育机制研究：HFT-8810 细胞株是解析胸腺发育与 T 细胞分化机制的核心模型，可构建胸腺发育异常模型（如活性物质缺乏、缺氧处理）、T 细胞分化障碍模型（如 Notch 信号抑制），研究关键基因（如 Notch1、Foxn1、Tcf1）在胸腺上皮细胞成熟、T 细胞受体重排中的作用（如敲除 Foxn1 后，细胞胸腺相关活性物质分泌量下降 70%，T 细胞分化率降低 50%）；探索外界因素（如辐射、化学毒物）对胸腺功能的影响（如辐射导致细胞 IL-7 分泌下降，T 细胞前体存活能力减弱），为理解胸腺发育病理机制提供实验依据。

免疫相关疾病研究与药物筛选：适用于免疫缺陷病、自身免疫病等疾病机制研究，如构建重症联合免疫缺陷（SCID）模型（通过抑制 IL-7 信号）、自身免疫病模型（通过干扰胸腺阴性选择）；同时用于免疫调节药物的高通量筛选，如通过检测细胞胸腺相关活性物质分泌量、T 细胞分化率，评估天然提取物（如枸杞多糖）、合成化合物的免疫调节活性；验证药物对免疫异常的修复作用（如检测药物处理后 IL-10/IL-6 分泌比例的变化），为免疫相关疾病治疗药物研发提供体外功效评估模型。

胸腺组织工程研究：在免疫组织工程领域，HFT-8810 细胞株是人工胸腺构建的关键种子细胞，可与生物材料（如聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物支架、海藻酸盐凝胶）复合构建人工胸腺组织；评估材料的生物相容性（如细胞黏附率、增殖活性）与功能协同性（如材料对胸腺微环境构建、T 细胞分化的调控），为胸腺移植治疗免疫缺陷病、肿liu治疗后免疫重建提供技术支持，推动免疫组织工程的临床转化。

疫苗研发与免疫评价：可用于疫苗候选抗原的免疫原性评价，通过将抗原负载于 HFT-8810 细胞构建 “人工胸腺抗原呈递系统"，检测其诱导 T 细胞活化的能力（如 CD4⁺T 细胞增殖率、IFN-γ 分泌量）；同时评估疫苗佐剂对胸腺免疫功能的影响，为新型疫苗研发提供免疫评价模型，提高疫苗研发效率与安全性。

四、质量控制与使用注意事项

（一）质量控制标准

细胞活力与表型：台盼蓝染色法检测细胞活力≥85%，传代后 24 小时贴壁率≥90%；免疫荧光或流式细胞术检测 CK8/18⁺细胞比例≥80%，Vimentin⁺细胞比例≥85%，CD34⁺细胞比例≥8%；HE 染色可见典型胸腺细胞混合形态（上皮细胞 “铺路石样"、基质细胞梭形、淋巴细胞前体圆形），无其他器官细胞污染（如肺上皮细胞 CK19 阳性率 < 5%、肝细胞 ALB 阳性率 < 5%）。

功能验证：细胞胸腺相关活性物质分泌水平≥20pg/mL/24h（ELISA 检测）；与骨髓造血干细胞共培养 7 天，T 细胞分化率≥30%（验证 T 细胞支持能力）；10ng/mL IFN-γ 处理 24 小时后，IL-6 表达升高≥3 倍（验证免疫调节响应正常）。

遗传与安全性：染色体核型分析为 46,XX/XY 正常二倍体，畸变率 < 1%；STR 分型与标准 HFT-8810 细胞图谱一致性≥95%（避免细胞交叉污染）；端粒酶活性检测为阴性，裸鼠皮下接种后无肿瘤形成（排除致瘤性）。

污染检测：无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法检测支原体，培养法检测细菌与真菌）；无人类免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）污染（ELISA 检测病毒抗原）；无其他细胞系交叉污染（STR 分型验证）。

（二）使用注意事项

培养操作：长期培养需每 5 代进行一次表型与功能验证（检测 CK8/18/Vimentin/CD34 表达、胸腺相关活性物质 / IL-7 分泌量、T 细胞分化支持能力），避免细胞功能漂移（如向普通上皮细胞转化，胸腺相关活性物质分泌下降）；与其他免疫细胞（如 T 细胞、B 细胞）严格分开培养（使用独立的培养箱、试剂与耗材，防止交叉污染）；操作时轻柔处理细胞（上皮细胞与基质细胞连接脆弱，过度吹打易导致微环境结构破坏）。

实验设计：开展 T 细胞分化实验时，需设置空白对照组（未加细胞株）、阳性对照组（添加正常胸腺组织匀浆）与溶剂对照组（排除溶剂对细胞分化的影响）；免疫调节实验需设置标准品对照组（确保检测结果的准确性）；共培养实验需设置单独干细胞对照组（明确细胞株的诱导作用）。

冻存复苏：冻存需选择对数生长期、功能稳定的细胞（增殖活跃、胸腺相关活性物质分泌量≥25pg/mL/24h），冻存液配方为 RPMI-1640/DMEM 混合培养基 + 10% DMSO+20% FBS+10ng/mL IL-7（维持淋巴细胞前体活性），梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮保存）；复苏时在 37℃水浴中快速融化（1 分钟内，避免 DMSO 长时间作用损伤上皮细胞），加入 10 倍体积预热的新鲜培养基，1000rpm 离心 5 分钟（离心力过大会导致细胞活力下降），弃上清后用含胰岛素的培养基重悬（调整细胞密度至 1×10⁵个 /cm²），接种至预包被胶原的培养皿；复苏后 24 小时检测细胞活力（需≥80%），48 小时观察细胞形态（需维持混合细胞特征），72 小时检测胸腺相关活性物质分泌量（需≥15pg/mL/24h），确保功能恢复后再进行实验。

安全防护：该细胞属人类胎儿来源细胞，操作时需严格遵守生物安全二级防护规范（穿戴无菌手套、护目镜，在生物安全柜内进行操作）；废弃培养物（如细胞悬液、培养基、吸头、培养皿）需加入 0.5% 次氯酸钠溶液处理 30 分钟后，再高压灭菌（121℃ 30 分钟）；细胞冻存管需标注清晰（细胞名称、冻存日期、操作人员），存放于专用液氮罐中；实验人员需定期进行健康检查，避免职业暴露（如皮肤接触细胞悬液后，立即用肥皂水清洗）。

上一个：人白细胞介素5试剂盒