PK-15猪肾细胞

PK-15猪肾细胞是兽医学与动物病毒学领域的经典细胞模型，1955年从新生仔猪肾脏皮质组织中分离建立，隶属于猪源肾小管上皮细胞系。该细胞系因对多种猪源致病性病毒高度敏感、遗传背景稳定且易体外培养，成为猪病诊断、疫苗研发及病毒机制研究的核心工具，在畜牧兽医与生物医药领域应用广泛，尤其在猪繁殖与呼吸综合征等疾病研究中具有不可替代的作用。

生物学特性上，PK-15细胞呈现典型的肾小管上皮细胞形态，体外以贴壁生长为主，细胞呈多边形或立方形，排列紧密时呈规则“铺路石"样结构，核质比适中，核呈圆形居中，核仁清晰可见，胞质内富含线粒体和内质网。其核心特征是病毒敏感性具有精准靶向性：对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）等高度易感，病毒感染后24-72小时可出现明显细胞病变效应（CPE），如细胞聚缩、空泡化及局部脱落。细胞增殖活跃，倍增时间约24-36小时，高表达肾小管上皮标志物细胞角蛋白18（CK18）和紧密连接蛋白ZO-1，核型为正常二倍体（2n=38），传代至40代后仍能保持稳定表型，无体内致瘤性。

体外培养PK-15细胞的核心是维持其病毒易感表型，zui适环境为37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱，推荐使用添加10%胎牛血清（FBS）、1%青mei素-链mei素混合液的DMEM高糖培养基，添加2mM氨基戊二酸可提升细胞代谢稳定性。细胞贴壁能力较强，普通聚苯乙烯培养皿即可满足需求，当融合度达80%-90%时及时传代，避免过度融合导致细胞活性下降。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化1-2分钟，待细胞边缘收缩后终止消化，轻柔吹打成单细胞悬液，传代比例以1:4-1:6为宜。特别注意：该细胞对血清批次敏感，需选用低内毒素血清；长期培养需每15-20代通过PRRSV感染实验验证敏感性，防止功能衰减。

研究应用中，PK-15细胞的价值聚焦于猪源病毒相关领域。猪病诊断方面，因对PRRSV等高发病毒的高敏感性，成为临床猪病样本病毒分离与鉴定的shou选模型，通过CPE观察结合免疫荧光检测，可快速确诊猪圆环病毒病、猪瘟等传染病；疫苗研发领域，是PRRSV疫苗、PCV2疫苗的主力生产与质控细胞，其高效增殖特性可保障病毒滴度稳定，同时符合兽用生物制品安全标准，降低疫苗生产成本。病毒机制研究中，可用于解析PCV2 Cap蛋白的免疫原性、PRRSV刺突蛋白与细胞受体的结合机制，为基因工程疫苗构建提供关键靶点。

此外，在抗病du药物筛选中，PK-15细胞构建的病毒感染模型可用于高通量筛选中药提取物、小分子化合物对猪源病毒的抑制活性；在人畜共患病研究中，可探究猪流感病毒等跨物种传播病毒的适应机制，为传染病防控提供理论支撑。需注意的是，该细胞对猪水疱病病毒（SVDV）敏感性较低，相关研究需结合IBRS-2细胞；培养过程中易受支原体污染，需定期检测与清除。但凭借对特定猪源病毒的高敏感性、培养简便及遗传稳定性，PK-15细胞已成为猪病研究与兽用生物制品研发的标gan模型，为畜牧养殖业健康发展提供关键技术支撑。