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更新时间:2025-11-25
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BRL 3A大鼠肝细胞是BRL细胞系经克隆筛选获得的稳定亚系,源自正常Wistar大鼠肝脏,因高度保留天然肝细胞的代谢功能、肝特异性标志物表达及低自发转化特性,成为肝脏生理、药物肝毒性评价及肝损伤机制研究的标准化工具细胞,为肝胆疾病研究与药物研发提供可靠实验支撑。
生物学特性上,BRL 3A细胞呈典型上皮样肝细胞形态,贴壁生长且排列具极性,显微镜下以多角形为主,细胞边界清晰,胞质丰富呈嗜酸性,部分细胞可见双核结构及少量脂滴;细胞核大而圆,居中分布,核仁明显,染色质均匀排布。其增殖活性温和,传代周期48-72小时,接触抑制显著,密集时形成类似肝小叶的团状结构,细胞均一性远优于原代BRL细胞。高表达白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK18)及尿素合成关键酶,能高效执行糖代谢、脂代谢及药物解毒功能,经STR鉴定遗传稳定,无微生物污染,体外可长期维持肝细胞核心生理表型。
培养条件需模拟肝脏微环境:采用含10%胎牛血清的DMEM/H12混合培养基,添加10μg/mL胰岛素及1%非必需氨基酸优化生长环境,培养环境为37℃、5%CO₂及95%湿度。胎牛血清提供生长必需因子,胰岛素调控糖代谢活性,DMEM/H12配比满足高代谢需求。传代时用无菌PBS清洗2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育5-8分钟,待细胞收缩后用血清终止消化,按1:2-1:4比例传代,避免破坏细胞极性。
研究应用中,BRL 3A细胞价值突出。肝脏生理研究方面,可解析糖异生、尿素合成的调控机制,探究胰岛素、胰高血糖素对代谢的影响,为理解肝脏物质代谢核心作用提供依据。肝损伤模型构建中,通过四氯化碳(CCl₄)、D-氨基半乳糖等毒物处理,可模拟化学性、免疫性肝损伤,分析凋亡、氧化应激及炎症反应的分子机制,其细胞均一性可显著降低实验误差。
药物研发领域,该细胞系是肝毒性评价的金标准工具:体外通过检测白蛋白合成、尿素生成评估细胞功能,结合CCK-8法、LDH释放实验筛选肝保护药物及评估新药肝毒性;利用其CYP450酶系表达特性,可研究药物代谢途径及代谢产物。使用注意:传代不超过50代,每10代用免疫染色验证ALB、CK18表达;避免细胞过度密集导致代谢衰退;设置成纤维细胞对照明确肝细胞特性。作为标准化模型,BRL 3A细胞为肝胆疾病研究的可重复性提供了核心支撑。
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