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更新时间:2025-11-25
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BSR-T7/5金黄仓鼠肾细胞是由BHK-21细胞经基因工程改造获得的永生化细胞系,核心特征为稳定整合并表达噬菌体T7 RNA聚合酶,因对狂犬病毒、水疱性口炎病毒等弹状病毒具有高度敏感性,且能高效支持病毒反向遗传操作,成为病毒学研究、疫苗研发及抗病du药物筛选的核心工具细胞,为传染病防控领域提供关键实验支撑。
生物学特性上,BSR-T7/5细胞呈典型上皮样细胞形态,贴壁生长且排列规则,显微镜下以多边形为主,细胞边界清晰,胞质均匀呈嗜碱性,内含少量细小颗粒;细胞核大而圆,居中分布,核仁明显,染色质呈细颗粒状均匀排布。其增殖活性稳定,传代周期约24-36小时,具有一定接触抑制特性,密集生长时形成连续的单层细胞。细胞高表达T7 RNA聚合酶,可通过免疫印迹或免疫荧光精准检测,同时保留仓鼠肾细胞的天然属性,对多种动物病毒无明显天然抗性,经STR鉴定遗传背景稳定,无支原体及外源病毒污染,体外可长期维持病毒易感及T7聚合酶表达双重表型。
培养条件需兼顾细胞活性与T7聚合酶表达稳定性:常规采用含10%-15%胎牛血清的DMEM高糖培养基,添加1%青mei素-链mei素混合液预防污染,培养环境维持37℃恒温、5%CO₂浓度及95%相对湿度。胎牛血清需选择低内毒素批次,避免非特异性激活细胞应激通路;DMEM高糖配方可满足细胞高能量代谢需求,保障T7聚合酶持续稳定表达。传代操作时,用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育3-5分钟,待细胞收缩变圆后用含血清培养基终止消化,吹打为单细胞悬液按1:3-1:5比例传代,避免过度消化破坏细胞贴壁能力。
研究应用中,BSR-T7/5细胞的核心价值体现在病毒学研究领域。在病毒反向遗传操作中,利用其表达的T7聚合酶可高效启动含T7启动子的病毒全长cDNA转录,实现狂犬病毒、水疱性口炎病毒等的反向拯救,为解析病毒基因组结构与功能、构建基因工程减毒疫苗株提供核心技术支撑。在病毒复制机制研究中,可用于探究病毒蛋白与宿主细胞因子的相互作用,明确T7聚合酶介导的病毒RNA合成调控机制,为开发抗病毒靶点提供依据。
在疫苗与药物研发领域,该细胞系应用广泛:作为病毒培养基质,可大规模制备狂犬病毒、口蹄疫病毒等抗原,用于灭活疫苗生产;体外可通过病毒空斑实验、TCID50检测,评估抗病du药物对病毒复制的抑制效果,为药物筛选提供标准化平台。使用时需注意:传代控制在60代以内,每10代通过免疫印迹验证T7聚合酶表达稳定性;培养过程中避免细胞过度密集,防止接触抑制导致的增殖停滞;操作需在生物安全二级及以上实验室进行,避免病毒扩散风险。作为病毒学研究的标gan细胞系,BSR-T7/5细胞为传染病防控研究与疫苗研发提供了不可替代的实验基础。
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