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更新时间:2025-11-25
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BT-20人乳腺癌细胞是源自54岁女性乳腺导管癌患者的上皮源性恶性肿瘤细胞系,因稳定呈现三阴性乳腺癌(TNBC)基底样亚型特征、高侵袭性及对hua疗药物的敏感性差异,成为研究TNBC发病机制、侵袭转移及药物筛选的重要模型,为改善这类预后较差乳腺癌的治疗效果提供关键实验支撑。
生物学特性上,BT-20细胞呈典型基底样乳腺癌形态,贴壁生长且排列紊乱无极性,显微镜下以多角形为主,部分呈梭形,细胞边界清晰,胞质丰富呈嗜酸性,可见明显的角化倾向及细胞间桥;细胞核大而畸形,核仁明显且数量增多,核质比显著增高,多核、病理性核分裂象等恶性标志突出。其增殖活性旺盛,传代周期约36-48小时,无接触抑制特性,密集生长时形成不规则细胞集落,易出现堆积生长。细胞核心表型为雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人表皮生长因子受体2(HER2)均阴性,高表达基底样标志物细胞角蛋白5/6(CK5/6)、波形蛋白(Vimentin)及癌胚抗原(CEA),经STR鉴定遗传背景稳定,无微生物污染,体外可稳定维持TNBC的高度恶性表型。
培养条件需适配基底样乳腺癌细胞代谢特性:常规采用含10%-15%胎牛血清的MEM培养基,添加1%非必需氨基酸及1mmol/L丙酮酸钠优化生长环境,培养环境控制在37℃、5%CO₂及95%相对湿度。胎牛血清中的成纤维细胞生长因子(FGF)、胰岛素样生长因子(IGF)可激活细胞增殖信号通路,MEM培养基的营养配比能满足肿瘤细胞高代谢需求,非必需氨基酸可提升细胞代谢稳定性。传代操作时,用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育5-7分钟,待细胞间隙增大后用含血清培养基终止消化,吹打为单细胞悬液按1:3-1:5比例传代,避免剧烈操作破坏细胞侵袭相关的伪足结构。
研究应用中,BT-20细胞是解析TNBC核心科学问题的理想工具。在侵袭机制研究方面,可用于探究基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)对乳腺基底膜的降解作用,分析PI3K/Akt、MAPK等信号通路在肿瘤侵袭转移中的调控机制,明确基底样亚型TNBC高侵袭性的分子根源,为挖掘侵袭相关治疗靶点提供依据。在hua疗敏感性研究领域,因该细胞对shun铂、紫shan醇等临床hua疗药的敏感性存在差异,常被用于构建药物敏感性模型,筛选hua疗增敏相关基因及分子机制。
在药物研发领域,该细胞系应用价值突出:体外可通过CCK-8法检测药物IC50值,结合Transwell侵袭实验评估药物对细胞侵袭能力的抑制效果,利用Western blot分析药物对侵袭及凋亡相关蛋白的调控作用;体内构建裸鼠乳腺癌移植瘤模型时,其成瘤率达95%以上,可直观评估药物的体内抑瘤活性及抗转移效果。使用时需注意:传代控制在50代以内,每10代通过免疫染色验证CK5/6、Vimentin表达稳定性;培养时避免细胞过度饥饿,防止表型异常;实验中建议设置luminal型乳腺癌细胞(如MCF-7)作为对照,明确TNBC基底样亚型的特异性特征。作为TNBC研究的经典模型,BT-20细胞为推动乳腺癌精准治疗研究提供了不可替代的实验基础。
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