Walker 256 大鼠乳腺癌细胞

Walker 256 大鼠乳腺癌细胞是乳腺癌研究的经典移植性肿瘤细胞系，源于20世纪20年代从Wistar大鼠自发乳腺癌中分离的肿瘤组织，经多次体内传代纯化后建立，隶属于大鼠上皮源性肿瘤细胞系。该细胞系因具有ji强的体内成瘤能力、稳定的转移特性及对治疗的典型应答性，成为乳腺癌增殖机制、转移干预及抗肿瘤药物筛选的核心工具，在肿瘤学基础研究与药理学领域应用广泛。

生物学特性上，Walker 256细胞呈现典型的腺癌细胞形态，体外以贴壁生长为主，细胞呈多边形或短梭形，排列紧密呈铺路石样，核质比高，核仁大而明显，胞质内可见少量分泌颗粒。其核心特征是恶性程度高，兼具高效增殖与强转移能力——体外倍增时间约18-24小时，接种至大鼠皮下或乳腺脂肪垫后，成瘤率接近100%，且易发生肺、骨及淋巴结转移，wan美模拟临床乳腺癌的转移进程。该细胞高表达乳腺癌相关标志物细胞角蛋白18（CK18）、黏附分子CD44，分子层面存在Ras基因激活突变及PI3K/Akt信号通路持续活化，与临床三阴性乳腺癌的部分分子特征高度契合。

体外培养Walker 256细胞需精准维持其恶性表型，zui适培养环境为37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱，推荐使用添加10%胎牛血清（FBS）、1%抗菌药物混合液的RPMI 1640培养基，添加2mM氨基戊二酸可提升细胞增殖稳定性及转移潜能。培养过程中需密切监测细胞密度，当融合度达到70%-80%时及时传代，避免过度融合导致细胞活性下降。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化1-2分钟，待细胞边缘收缩、间隙增大后加入wan全培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，传代比例以1:3-1:5为宜。特别注意：该细胞贴壁能力中等，消化后需快速接种；长期培养需每8-10代通过Transwell实验验证转移能力，防止恶性表型衰减。

研究应用中，Walker 256细胞的价值具有鲜明针对性。乳腺癌转移机制研究中，其肺转移模型可用于解析上皮-间质转化（EMT）、基质金属蛋白酶（MMPs）家族在肿瘤侵袭转移中的作用，筛选调控转移相关基因（如Snail、MMP-9）的靶向分子；药物研发领域，是乳腺癌hua疗药物（如阿mei素、zi杉醇）、靶向药物（PI3K抑制剂）的核心筛选平台，通过CCK-8法、克隆形成实验评估药物体外活性，结合皮下移植瘤及肺转移模型验证体内药效与抗转移效果；肿瘤微环境研究方面，其与大鼠乳腺成纤维细胞、免疫细胞的共培养体系，可探究肿瘤相关巨噬细胞（TAM）、成纤维细胞对乳腺癌增殖及转移的调控作用；此外，在肿瘤恶液质研究中，Walker 256细胞构建的移植瘤模型可模拟乳腺癌相关恶液质的发生过程，用于开发改善恶液质的治疗策略。

需注意的是，Walker 256细胞为大鼠来源细胞，无法wan全模拟人类乳腺癌的遗传异质性，实验结论需结合人源乳腺癌细胞系交叉验证；其体外培养的转移能力受血清批次及培养环境影响较大，需严格控制实验条件。但凭借稳定的成瘤性、明确的转移特性及与临床乳腺癌的病理进程相似性，Walker 256细胞已成为乳腺癌研究的标gan模型，为乳腺癌转移机制解析、抗转移药物研发提供关键实验支撑。