PK136小鼠X小鼠杂交瘤细胞

PK136小鼠X小鼠杂交瘤细胞是免疫细胞生物学研究的特色工具细胞，通过将分泌特定抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合构建而成，隶属于小鼠B细胞源性杂交瘤细胞系。该细胞系因稳定分泌抗小鼠NK细胞表面NK1.1分子的单克隆抗体，成为NK细胞分离纯化、功能调控及体内示踪的核心工具，在天然免疫研究领域应用广泛。

生物学特性上，PK136细胞呈现典型的杂交瘤细胞形态，体外以半贴壁半悬浮方式生长，部分细胞贴壁生长呈梭形或多角形，部分悬浮细胞呈圆形，核质比高，核仁明显，胞质丰富呈嗜碱性。其核心功能特征是高效且稳定分泌IgG2a亚型单克隆抗体，该抗体特异性识别并结合小鼠NK细胞及NKT细胞表面的NK1.1分子（CD161），不与T细胞、B细胞等其他免疫细胞发生交叉反应。细胞增殖活性稳定，倍增时间约36-48小时，保留骨髓瘤细胞无限增殖特性与B细胞抗体分泌功能，经克隆纯化后抗体分泌量可达10-30μg/mL，通过ELISA或Western Blot可精准检测抗体表达。

体外培养PK136细胞的核心是维持其抗体分泌能力，zui适培养环境为37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱，推荐使用添加10%胎牛血清（FBS）、1%抗菌药物混合液的DMEM高糖培养基，添加2mM氨基戊二酸可提升细胞增殖稳定性与抗体分泌量。培养时需密切监测细胞状态，当悬浮细胞密度达到2×10⁶-3×10⁶个/mL或贴壁细胞融合度达70%时及时传代，避免密度过高导致细胞活性下降。传代时无需严格消化，贴壁细胞用无菌PBS轻柔吹打即可脱落，随后与悬浮细胞一同收集，按1:3-1:5比例用新鲜培养基稀释接种。特别注意：该细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素血清；长期培养需定期通过抗体效价检测验证分泌功能，避免抗体分泌能力衰减。

研究应用中，PK136细胞的价值集中体现于NK细胞相关研究。免疫细胞分离领域，其分泌的抗NK1.1抗体可通过免疫磁珠分选法或流式细胞术分选纯化小鼠外周血、脾脏及骨髓中的NK细胞，纯度可达90%以上，为NK细胞体外功能研究提供高活性细胞样本；NK细胞功能调控研究方面，该抗体可特异性激活或封闭NK1.1分子，探究其在NK细胞活化、细胞毒性（如杀伤肿瘤细胞）及细胞因子分泌（IFN-γ、TNF-α）中的信号传导作用；体内实验中，将PK136抗体腹腔注射小鼠，可实现体内NK细胞的特异性清除或功能调控，用于验证NK细胞在肿瘤免疫、抗感染免疫及自身免疫病中的作用。

此外，在肿瘤免yi治疗研究中，PK136抗体可作为NK细胞激活剂，联合免疫检查点抑制剂增强抗肿瘤效果，或用于构建NK细胞过继免yi治疗的体外评估模型；单克隆抗体制备技术研究中，PK136细胞可作为杂交瘤细胞培养与抗体纯化的模式细胞，优化抗体制备工艺。需注意的是，该细胞分泌的抗体仅识别小鼠NK1.1分子，无法用于人源NK细胞研究；长期体外培养可能出现抗体分泌不均一性，需定期克隆纯化。但凭借稳定的抗体分泌特性、高特异性的抗原结合能力，PK136细胞已成为小鼠NK细胞研究不ke或缺的工具，为天然免疫机制解析与免yi治疗研发提供关键支撑。