C2C12小鼠成肌细胞

C2C12小鼠成肌细胞是源自C3H小鼠骨骼肌卫星细胞的成肌细胞系，因具有典型的成肌细胞表型及高效的肌分化潜能，在体外特定条件下可快速融合形成多核肌管，成为研究肌细胞增殖分化、肌肉疾病机制及肌相关药物研发的经典模型，为运动医学、发育生物学及再生医学领域提供了高度可靠的实验支撑。

生物学特征上，C2C12细胞在增殖期呈长梭形或纺锤形，贴壁生长且排列具有一定方向性，细胞边界清晰，胞质均匀呈嗜碱性，内含少量肌丝前体结构；细胞核呈椭圆形，位于细胞中央，核仁清晰可见。进入分化期后，细胞逐渐停止增殖并相互融合，形成多核长管状的成熟肌管，此时胞质内出现大量平行排列的肌原纤维。细胞增殖活性旺盛，传代周期约24-36小时，具有接触抑制特性，高汇合度时自然启动分化程序。它高表达成肌细胞特异性标志物，如肌分化因子MyoD、肌细胞生成素MyoG及肌动蛋白α-actin，经STR鉴定遗传背景稳定，无微生物污染，体外可稳定维持“增殖-分化"的成肌细胞核心表型。

培养条件需区分增殖与分化需求：增殖期采用含10%-15%胎牛血清的DMEM高糖培养基，添加1%青mei素-链mei素混合液预防污染，培养环境为37℃、5%CO₂及95%相对湿度；诱导分化时，需将培养基更换为含2%马血清的DMEM高糖培养基，通过降低血清浓度触发分化信号。胎牛血清中的成纤维细胞生长因子（FGF）可促进细胞增殖，马血清则能激活肌分化相关信号通路。传代操作时，用无菌PBS清洗细胞2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育3分钟，待细胞收缩变圆后用含血清培养基终止消化，吹打为单细胞悬液按1:5比例传代，避免过度消化影响细胞分化潜能。

研究应用中，C2C12细胞是肌相关机制研究的核心工具。在肌分化机制方面，可用于解析MyoD-MyoG调控网络对肌细胞命运决定的作用，探究MAPK、PI3K/Akt等信号通路在分化过程中的调控机制，为理解骨骼肌发育规律提供依据。在肌肉疾病模型构建中，通过基因编辑技术敲除或突变肌营养不良相关基因（如 dystrophin），可模拟杜氏肌营养不良等疾病的细胞病理变化，分析肌细胞凋亡、肌纤维变性的分子机制。

在药物研发与再生医学领域，该细胞应用广泛：体外可通过肌管形成率、肌原纤维染色等指标，评估药物对肌分化的促进作用及对病变肌细胞的修复效果；在组织工程中，其可作为种子细胞与生物支架复合，构建人工肌肉组织用于创面修复研究。使用时需注意：传代控制在40代以内，每8代通过MyoD免疫染色验证分化潜能；增殖期避免细胞过度汇合，防止提前分化；分化实验需设置血清浓度梯度对照组，明确分化信号的作用强度。作为成肌细胞研究的标准化模型，C2C12细胞为肌相关领域的基础研究与临床转化提供了不可替代的实验支撑。