CT26.WT [CT26WT]小鼠结肠癌细胞

CT26.WT [CT26WT]小鼠结肠癌细胞是结直肠癌研究的核心模式细胞系，源于N-nitroso-N-methylurethane（MNU）化学诱导的BALB/c小鼠结肠癌组织，经克隆纯化后建立，隶属于小鼠上皮源性肿瘤细胞系。该细胞系因遗传背景清晰、体内成瘤稳定且易构建免疫competent模型，成为结直肠癌免yi治疗、转移机制及药物筛选研究的经典工具，在基础肿瘤学与转化医学领域应用广泛。

生物学特性上，CT26.WT细胞呈典型上皮细胞形态，体外以贴壁生长为主，细胞呈多边形或短梭形，排列紧密呈铺路石样，核质比高，核仁清晰，胞质内可见少量分泌颗粒。其核心特征是兼具稳定的恶性表型与免疫原性：体外增殖活性旺盛，倍增时间约22-28小时，高表达结肠上皮标志物细胞角蛋白20（CK20）和癌胚抗原（CEA）；体内成瘤率接近100%，皮下接种后7-10天形成均质实体瘤，尾静脉注射可构建肺转移模型，模拟临床结直肠癌转移过程。分子层面存在K-ras基因突变及β-catenin通路异常激活，与临床散发性结直肠癌分子特征高度契合。

体外培养CT26.WT细胞需维持其恶性表型与增殖稳定性，zui适环境为37℃、5% CO₂恒温恒湿培养箱，推荐使用添加10%胎牛血清（FBS）、1%抗菌药物混合液的RPMI 1640培养基，添加2mM氨基戊二酸可提升细胞活性。培养时需密切监测细胞密度，当融合度达70%-80%时及时传代，避免过度融合导致细胞形态异常。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化1-2分钟，待细胞边缘收缩、间隙增大后加入wan全培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，传代比例以1:3-1:5为宜。特别注意：该细胞贴壁能力中等，消化后需快速接种；长期培养需每10代通过动物接种验证成瘤能力，防止恶性表型衰减。

研究应用中，CT26.WT细胞的价值具有鲜明针对性。免yi治疗研究领域，其与BALB/c小鼠的同基因背景使其成为免疫检查点抑制剂（PD-1/PD-L1、CTLA-4抑制剂）的核心评价模型，可通过检测肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）比例、肿瘤生长曲线评估免yi治疗疗效；转移机制研究方面，其肺转移模型可用于解析上皮-间质转化（EMT）、肿瘤干细胞（CSC）在转移中的作用，筛选调控转移相关基因（如MMP-9、Snail）的靶向药物；药物研发领域，是结直肠癌hua疗药物、靶向药物（抗EGFR、抗VEGF）的初筛平台，通过CCK-8法、克隆形成实验评估药物体外活性，结合移植瘤模型验证体内药效；此外，在肿瘤微环境研究中，其构建的原位移植瘤模型可用于探究肿瘤相关成纤维细胞（CAF）、巨噬细胞对肿瘤进展的调控作用。

需注意的是，CT26.WT细胞为小鼠来源细胞，无法wan全模拟人类结直肠癌的遗传异质性，药物筛选结论需结合人源细胞系交叉验证；其体外培养的增殖速率受血清批次影响较大，需选用质量稳定的血清。但凭借稳定的成瘤性、明确的分子靶点及同基因模型优势，CT26.WT细胞已成为结直肠癌研究的标gan工具，为免yi治疗ji制解析、新型药物研发及转移干预策略探索提供关键实验支撑。