C-33A 人宫颈癌细胞

C-33A 人宫颈癌细胞是1954年从一位65岁宫颈鳞癌患者组织中分离建立的上皮源性恶性肿瘤细胞系，其zui显著特征是不携带人乳头瘤病毒（HPV）基因组，这与临床约5%-10%的HPV阴性宫颈癌高度契合。该细胞wen定保留宫颈鳞癌的核心病理表型，体内接种裸鼠可形成典型鳞癌组织，因独特的HPV阴性属性，成为研究非HPV相关宫颈癌发病机制、hua疗耐药及靶向药物研发的稀缺模型，为填补HPV阴性宫颈癌研究空白提供了关键实验支撑。

生物学特性上，C-33A细胞呈典型鳞状上皮癌细胞形态，贴壁生长且排列紊乱无极性，显微镜下以多角形为主，细胞边界清晰，胞质丰富呈嗜酸性，约30%细胞可见角化颗粒，提示部分分化特征；细胞核大而畸形，核仁明显且多为2-3个，核质比高达0.6，常出现多核、病理性核分裂象等恶性标志。其增殖活性wen定，群体倍增时间约28小时，传代周期2-3天，无接触抑制，密集时形成多层细胞集落。细胞高表达CK17、SCC-Ag等宫颈鳞癌标志物，HPV阴性背景下伴随p53基因273位密码子点突变，导致抑癌功能丧失，经STR鉴定遗传背景一致，无微生物污染，体外可长期维持恶性表型。

培养条件需适配其上皮源性特征，常规采用含10%热灭活胎牛血清的DMEM高糖培养基，添加1%非必需氨基酸提升代谢wen定性，培养环境为37℃、5%CO₂及95%湿度。胎牛血清中的EGF、IGF等因子可激活增殖信号通路，DMEM高糖配方满足肿瘤细胞高糖酵解需求。传代时用无菌PBS清洗2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育4分钟，待细胞间隙增大后用血清终止消化，吹打为单细胞悬液按1:4比例传代，避免剧烈操作破坏细胞间连接。

研究应用中，该细胞是HPV阴性宫颈癌机制研究的核心工具。在发病机制方面，可通过基因编辑技术修复p53突变，明确其在细胞恶性转化中的作用；还可用于探究吸烟、长期炎症等危险因素诱导的DNA损伤机制，为筛选非HPV相关诊断标志物提供依据。耐药研究中，其对shun铂的耐药率可达42%，常被用于构建耐药模型，分析ABC转运蛋白、DNA修复基因ERCC1的表达变化，揭示耐药分子机制。

药物筛选领域，体外可通过CCK-8法检测药物IC50值，克隆形成实验评估长期抑制效果，Transwell实验观察药物对侵袭能力的影响；体内构建裸鼠皮下移植瘤模型，成瘤率达100%，可用于评估药物体内抑瘤活性。使用时需注意：传代不超过50代，每10代通过免疫印迹验证p53突变及CK17表达；培养中保持血清批次一致，避免表型波动；实验需设置HeLa细胞（HPV阳性）作为对照，凸显HPV阴性特征。作为HPV阴性宫颈癌研究的标准化模型，C-33A细胞为妇科肿瘤精准医学发展提供了不可替代的支撑。