C3H 10T1/2小鼠胚胎成纤维细胞

C3H 10T1/2小鼠胚胎成纤维细胞是源自C3H小鼠14-17天胚胎间充质的贴壁生长细胞系，因具有典型的成纤维细胞表型、低自发转化率及多向分化潜能，成为细胞分化调控、肿瘤发生机制及组织工程研究的经典模型，为发育生物学与医学领域提供了贴近生理状态的实验支撑。

从生物学特性来看，该细胞呈典型的成纤维细胞形态，贴壁生长且排列有序，显微镜下以长梭形为主，细胞边界清晰，胞质丰富呈嗜酸性，内含少量细丝状结构；细胞核呈椭圆形，位于细胞中央，核仁不明显，染色质呈细颗粒状均匀分布。其增殖活性稳定，传代周期为3-4天，具有明显接触抑制特性，密集生长时呈“漩涡状"排列。细胞高表达成纤维细胞特异性标志物，如波形蛋白（Vimentin）、成纤维细胞生长因子受体（FGFR），核心特征为多向分化潜能，在特定诱导条件下可分化为脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞，经检测无支原体、细菌污染，遗传背景与C3H小鼠高度同源，体外培养可稳定维持胚胎成纤维细胞的核心表型。

该细胞的培养条件适配胚胎成纤维细胞代谢需求，常规采用含10%-15%胎牛血清的DMEM培养基，添加2mmol/L谷an酰胺以提升细胞活性，培养环境维持37℃恒温、5%CO₂浓度及95%相对湿度的湿润条件。胎牛血清提供的胚胎生长因子（如EGF、PDGF）及营养成分，是保障细胞增殖与分化潜能的关键；DMEM培养基的高糖配方契合胚胎细胞高能量代谢需求，谷an酰胺可补充细胞合成代谢底物。传代操作时，用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育3-5分钟，待细胞收缩变圆后用含血清培养基终止消化，轻柔吹打为单细胞悬液后按1:3-1:6比例传代，避免剧烈操作破坏细胞骨架结构。

在研究应用领域，该细胞系的价值覆盖多个核心方向。在细胞分化研究中，可用于解析成纤维细胞向多谱系分化的调控网络，例如分析BMP信号通路对成骨分化的诱导作用、PPARγ通路对脂肪分化的调控机制，明确胚胎间充质细胞命运决定的关键分子节点，为干细胞分化研究提供参考。在肿瘤发生研究中，因低自发转化率的特性，常作为体外转化模型，用于评估化学致癌物、辐射等因素的致瘤效应，探究细胞恶性转化的早期分子事件。

此外，该细胞系是组织工程与药物研发的重要工具。在组织工程中，其作为种子细胞可与生物材料复合构建人工组织，用于创面修复及器官再生研究；在药物筛选中，可通过细胞增殖实验、分化抑制实验，评估药物对胚胎发育及成纤维细胞功能的影响，为药物安全性评价提供数据支撑。使用该细胞需注意：一是传代控制在40代以内，长期传代易导致分化潜能下降，每8代需通过诱导分化实验验证功能稳定性；二是培养时避免细胞过度密集，防止接触抑制导致的增殖停滞；三是实验中建议设置成体成纤维细胞作为对照，明确胚胎源性细胞的特异性特征。作为多功能实验模型，C3H 10T1/2细胞为推动多学科研究提供了不可替代的实验基础。