Caki-1人肾透明细胞癌

Caki-1人肾透明细胞癌是源自人肾透明细胞癌患者皮肤转移灶的上皮源性恶性肿瘤细胞系，因稳定保留肾透明细胞癌的典型空泡化特征、高表达肾癌特异性标志物且体内外致瘤性明确，成为肾透明细胞癌发病机制、靶向治疗研发及耐药机制研究的经典模型，为泌尿系统恶性肿瘤领域的基础与临床转化研究提供了贴近临床病理特征的实验支撑。

从生物学特性来看，该细胞呈典型的肾透明细胞癌形态，贴壁生长且排列松散无规则，显微镜下以多边形为主，细胞边界清晰，胞质内富含大量脂质和糖原空泡，因空泡透亮而呈现“透明"表型，细胞核小而圆，多位于细胞一侧，核仁不明显但核染色质密集。其增殖活性稳定，传代周期为2-3天，无接触抑制特性，密集生长时易形成细胞堆积。细胞高表达肾透明细胞癌核心标志物，如碳酸酐酶IX（CAIX）、血管内皮生长因子（VEGF）及CD10，同时具有较强的侵袭与转移潜能，经检测无支原体、细菌、真菌污染，遗传背景稳定，在体外可稳定维持肾透明细胞癌的恶性表型。

该细胞的培养条件需适配其代谢特征，常规采用含10%-15%胎牛血清的McCoy's 5A培养基，培养环境维持37℃恒温、5%CO₂浓度及95%相对湿度的湿润条件。胎牛血清提供的营养成分与生长因子，为细胞增殖及空泡化表型维持提供保障；McCoy's 5A培养基的高营养配比契合肾癌细胞的高代谢需求，可有效维持细胞的透明表型与活性。传代操作时，用无菌PBS缓冲液轻柔清洗细胞表面2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育3-5分钟，待细胞间隙增大、形态变圆后用含血清培养基终止消化，吹打为单细胞悬液后按1:3-1:6比例传代，避免剧烈操作破坏胞质内空泡结构。

在研究应用领域，该细胞系的价值聚焦于肾透明细胞癌的核心科学问题。在发病机制研究中，可用于解析VHL-HIF-VEGF通路的异常激活机制，该通路紊乱是肾透明细胞癌的核心致病因素，通过调控该通路相关分子表达，能明确肾癌发生发展的关键节点，为挖掘早期诊断标志物提供依据。在靶向治疗研究中，因该细胞高表达VEGF和CAIX，常作为抗血管生成药物及CAIX靶向药物的筛选模型，助力精准治疗药物研发。

此外，该细胞系是肾透明细胞癌耐药机制研究的重要工具。通过构建靶向药物耐药模型，可分析ABC转运蛋白、上皮-间质转化相关分子的表达变化，明确耐药形成的分子基础。体外可通过CCK-8法、流式细胞术检测药物对细胞增殖及凋亡的影响，利用Transwell实验评估药物对细胞侵袭能力的干预作用；体内可构建裸鼠肾癌移植瘤模型，观察药物对肿瘤生长的抑制效果，为临床用药优化提供数据支撑。使用该细胞需注意：一是传代控制在50代以内，每10代通过免疫荧光验证CAIX表达及透明表型稳定性；二是培养时避免长时间饥饿，防止胞质空泡消失导致表型改变；三是实验中建议设置正常肾上皮细胞作为对照，明确肿瘤特异性特征。作为肾透明细胞癌研究的成熟模型，Caki-1细胞为推动泌尿系统恶性肿瘤研究与临床转化提供了不可替代的实验基础。