BT-474人乳腺导管癌细胞特性及研究应用

BT-474人乳腺导管癌细胞是HER-2阳性乳腺癌研究的核心人源细胞系，1978年从一名60岁女性乳腺导管癌患者的胸壁转移灶中分离建立，隶属于管腔B型乳腺癌细胞系。该细胞系因稳定共表达雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及人表皮生长因子受体2（HER-2），且保留HER-2扩增特征，成为解析HER-2阳性乳腺癌发病机制、开发靶向治疗药物的重要实验模型。

生物学特性上，BT-474细胞呈现典型的上皮细胞形态，体外以贴壁生长为主，细胞呈多边形或圆形，排列紧密呈巢状或腺管样结构，核质比适中，核仁清晰可见，胞质丰富且含有少量分泌颗粒。其核心特征是“三阳性"表型变异——ER、PR表达稳定，HER-2基因扩增及蛋白过表达显著，这与临床约10%-15%的HER-2阳性乳腺癌患者特征高度契合。该细胞增殖活性稳定，倍增时间约48-60小时，高表达乳腺上皮标志物细胞角蛋白18（CK18）和黏蛋白1（MUC1），分子层面存在PI3K/Akt和MAPK通路双重激活，部分细胞可见BRCA1/2基因突变，为靶向治疗研究提供了多元靶点。

体外培养BT-474细胞需精准维持激素及HER-2信号应答表型，zui适环境为37℃、5% CO₂恒温恒湿培养箱，推荐使用含10%胎牛血清（FBS）、1%抗菌药物混合液的RPMI 1640培养基，若开展激素相关实验，应选用去激素血清以排除外源干扰。培养时需密切监测细胞状态，当融合度达70%-80%时及时传代，避免过度融合导致腺管结构紊乱。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化3-4分钟，待细胞边缘收缩、形态变圆后加入wan全培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，传代比例以1:2-1:4为宜。特别注意：该细胞贴壁能力较强，消化时间不足易形成细胞团块；长期培养需定期通过免疫印迹验证ER/PR/HER-2表达，确保表型稳定。

研究应用中，BT-474细胞的价值具有鲜明针对性。HER-2信号机制研究中，可用于解析HER-2与ER信号通路的交叉对话机制，探究PI3K/Akt通路在HER-2介导的细胞增殖中的调控作用，揭示靶向治疗耐药的分子根源；药物研发领域，是HER-2抑制剂（如曲妥zhu单抗）、CDK4/6抑制剂及PARP抑制剂的核心筛选平台，可通过细胞活性检测、克隆形成实验评估药物疗效及量效关系；耐药模型构建方面，通过长期药物诱导可建立HER-2抑制剂耐药亚系，用于筛选逆转耐药的新型药物及联合治疗方案；此外，在肿瘤微环境研究中，其与乳腺成纤维细胞、免疫细胞的共培养体系，可解析HER-2信号对肿瘤免疫微环境的调控作用及免yi治疗的协同效果。

需注意的是，BT-474细胞源于转移灶，其HER-2扩增水平可能高于原发灶细胞，实验结论需结合原发灶细胞系验证；不同批次血清的成分差异可能影响细胞激素应答，开展精准信号通路研究时需严格质控。但凭借稳定的ER/PR/HER-2共表达特征、明确的分子靶点及与临床的高度关联性，BT-474细胞已成为HER-2阳性乳腺癌研究的标gan细胞系，为揭示疾病机制、开发精准联合治疗策略提供关键实验支撑。