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更新时间:2025-11-24
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Calu-3人肺腺癌细胞是源自人肺腺癌患者胸膜渗出液的上皮源性恶性肿瘤细胞系,因稳定保留肺腺癌的腺上皮分化特征、高表达肺上皮特异性标志物且体内外致瘤性明确,成为肺腺癌发病机制、药物敏感性研究及靶向治疗研发的经典模型,为肺癌领域基础与临床转化研究提供了贴近临床病理特征的实验支撑。
从生物学特性来看,该细胞呈典型的肺腺癌细胞形态,贴壁生长且排列紧密呈巢状或“铺路石"样,显微镜下以柱状或多边形为主,细胞边界清晰,胞质丰富呈嗜酸性,部分细胞可见分泌型颗粒,细胞核大而圆形,核仁明显且核质比适中,染色质分布均匀。其增殖活性稳定,传代周期为2-3天,接触抑制现象较弱,密集生长时可形成多层细胞结构。细胞高表达肺腺癌核心标志物,如细胞角蛋白18(CK18)、癌胚抗原(CEA)及黏蛋白1(MUC1),同时具有一定的黏液分泌功能和侵袭潜能,经检测无支原体、细菌、真菌污染,遗传背景稳定,在体外可稳定维持肺腺癌的腺上皮恶性表型。
该细胞的培养条件需适配其腺上皮细胞代谢特征,常规采用含10%-15%胎牛血清的MEM培养基(添加非必需氨基酸),培养环境维持37℃恒温、5%CO₂浓度及95%相对湿度的湿润条件。胎牛血清提供的上皮生长因子(EGF)、胰岛素等成分,为细胞增殖与腺上皮分化提供信号支持;MEM培养基的营养配比契合其蛋白质合成需求,非必需氨基酸可提升细胞分泌功能稳定性。传代操作时,用无菌PBS缓冲液轻柔清洗细胞表面2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育3-5分钟,待细胞间隙增大后用含血清培养基终止消化,吹打为单细胞悬液后按1:3-1:6比例传代,避免剧烈操作破坏细胞间连接结构。
在研究应用领域,该细胞系的价值聚焦于肺腺癌的核心科学问题。在发病机制研究中,可用于解析肺腺癌细胞分化与增殖的调控网络,例如分析EGFR/PI3K/Akt信号通路的激活机制,探究MUC1高表达与肿瘤免疫逃逸的关联,明确腺上皮细胞恶性转化的关键分子事件,为挖掘肺腺癌特异性诊断靶点提供依据。在药物敏感性研究中,因部分细胞株存在EGFR基因突变,可用于评估靶向药物的疗效差异,为个体化治疗方案制定提供参考。
此外,该细胞系是抗肺腺癌药物筛选的核心工具。体外可通过CCK-8法、克隆形成实验检测hua疗药物及靶向药物对细胞增殖的抑制效果,利用Transwell实验和划痕实验评估药物对细胞侵袭、迁移能力的干预作用;体内可构建裸鼠肺腺癌移植瘤模型,观察药物对肿瘤生长的抑制作用及毒副作用,为临床用药优化提供数据支撑。使用该细胞需注意:一是传代控制在50代以内,每10代通过免疫荧光验证CK18、MUC1表达及腺上皮表型稳定性;二是培养时避免频繁更换培养基,防止细胞分泌的黏液成分丢失;三是实验中建议设置正常支气管上皮细胞(如BEAS-2B)作为对照,明确肿瘤特异性生物学特征。作为肺腺癌研究的成熟模型,Calu-3细胞为推动肺癌基础研究与临床转化提供了不可替代的实验基础。
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