K562/ADR人慢性髓原白血病细胞特性及研究应用

K562/ADR人慢性髓原白血病细胞是白血病耐药研究的核心细胞模型，通过对亲本K562慢性髓原白血病细胞进行蒽环类药物梯度浓度诱导及持续筛选建立，隶属于髓系造血系统耐药肿瘤细胞系。该细胞系因稳定保留慢性髓原白血病（CML）的恶性特征及蒽环类药物耐药表型，且与亲本细胞形成“敏感-耐药"配对体系，成为解析CML药物耐药机制、开发逆转耐药策略的关键实验工具。

生物学特性上，K562/ADR细胞呈圆形或类圆形，体外以悬浮生长为主，部分细胞呈轻微聚团状，胞质丰富呈嗜碱性，核呈圆形或椭圆形，核仁清晰可见。其核心特征是高效蒽环类药物耐药性，耐药指数（RI）可达30-45倍，耐药机制呈多维度协同：高表达ABC转运蛋白家族的P-糖蛋白（P-gp）和多药耐药相关蛋白（MRP），加速药物外排；细胞内巯基化合物含量及谷胱gan肽S-转移酶（GST）活性显著升高，增强药物解毒能力；拓扑异构酶IIα（Topo IIα）表达下调，降低蒽环类药物作用靶点敏感性。该细胞增殖活性稳定，倍增时间约28-36小时，保留CML细胞特征性的BCR-ABL融合基因表达，同时伴随PI3K/Akt通路异常激活，与耐药表型形成调控网络。

体外培养K562/ADR细胞的核心是维持耐药表型，zui适环境为37℃、5% CO₂恒温恒湿培养箱，推荐使用含10%胎牛血清（FBS）、1%抗菌药物混合液的RPMI 1640培养基，关键需添加0.3-0.8μg/mL蒽环类药物进行耐药性维持（每传代5-7次可停药1-2代，平衡药物毒性与耐药稳定性）。培养时需密切监测细胞密度，当密度达到1×10⁶-2×10⁶个/mL时及时传代，传代时直接用wan全培养基按1:3-1:5比例稀释接种。特别注意：该细胞悬浮生长特性决定换液时需采用离心收集方式，避免细胞丢失；长期培养需每月通过MTT法检测耐药指数，同时通过流式细胞术验证P-gp表达，确保耐药表型稳定，防止耐药性丢失。

研究应用中，K562/ADR细胞的价值具有鲜明针对性。耐药机制研究中，借助与K562的配对优势，可通过转录组学、蛋白质组学筛选耐药关键差异分子，解析BCR-ABL融合基因与P-gp的调控关联，以及PI3K/Akt通路在耐药形成中的驱动作用；逆转耐药药物筛选领域，可通过细胞活性检测、药物蓄积实验，评估中药单体（如苦sen碱）、小分子抑制剂（如P-gp抑制剂 tariquidar）的逆转耐药效果及量效关系；联合治疗研究中，可用于验证蒽环类药物与BCR-ABL靶向抑制剂的协同抗瘤活性，优化耐药CML患者的联合用药方案；此外，在分子靶向研究中，其PI3K/Akt通路激活特征，为开发PI3K抑制剂联合药物治疗的精准治疗策略提供直接实验依据。

需注意的是，K562/ADR为诱导耐药细胞系，其耐药机制较临床多药耐药CML细胞相对集中，实验结论需结合临床耐药标本交叉验证；蒽环类药物维持浓度需精准调控，过高易引发细胞凋亡，过低则导致耐药相关基因表达下调。但凭借稳定的耐药表型、明确的BCR-ABL分子标志及与亲本细胞的配对优势，K562/ADR细胞已成为CML蒽环类药物耐药研究的标gan模型，为揭示耐药规律、开发逆转耐药疗法提供关键实验支撑。