Calu-6人肺退行性癌细胞

Calu-6人肺退行性癌细胞是源自人肺腺癌患者胸腔积液的上皮源性恶性肿瘤细胞系，因稳定呈现肺癌细胞的退行性分化特征、增殖活性独特且对肺癌治疗研究适配性强，成为肺退行性癌发病机制、分化调控及抗肺癌药物研发的特色模型，为肺癌领域研究提供了贴近特殊病理类型的实验支撑。

从生物学特性来看，该细胞呈典型的肺退行性癌细胞形态，贴壁生长且排列松散无规则，显微镜下以圆形或短梭形为主，细胞边界模糊，胞质丰富呈嗜碱性，可见大量大小不一的退行性空泡，细胞核小而固缩，核仁不明显，核质比降低，部分细胞出现核碎裂等退行性特征。其增殖活性较普通肺癌细胞缓慢，传代周期为3-4天，接触抑制现象不明显，密集生长时易出现细胞脱落。细胞表达肺癌相关标志物，如细胞角蛋白8/18（CK8/18）、癌胚抗原（CEA），同时高表达退行性相关分子如自噬标志物LC3B，具有一定的侵袭能力，经检测无支原体、细菌、真菌污染，遗传背景稳定，在体外可稳定维持肺退行性癌的核心病理表型。

该细胞的培养条件需适配其退行性代谢特征，常规采用含10%-15%胎牛血清的RPMI-1640培养基，添加2mmol/L谷an酰胺以改善细胞代谢状态，培养环境维持37℃恒温、5%CO₂浓度及95%相对湿度的湿润条件。胎牛血清提供的营养成分与生长因子，可缓解细胞退行性凋亡，维持基本增殖活性；RPMI-1640培养基的缓冲体系适配其低代谢需求，谷an酰胺能补充细胞能量代谢底物。传代操作时，用无菌PBS缓冲液轻柔清洗细胞表面2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育4-6分钟，待细胞缓慢脱壁后用含血清培养基终止消化，轻柔吹打为单细胞悬液后按1:2-1:4比例传代，避免过度消化加重细胞退行性损伤。

在研究应用领域，该细胞系的价值聚焦于肺退行性癌的特殊科学问题。在分化机制研究中，可用于解析肺癌细胞退行性分化的调控网络，例如分析PI3K/Akt/mTOR信号通路对细胞自噬活性的调控作用，探究LC3B与细胞退行性空泡形成的关联，明确退行性分化与肿瘤恶性程度的内在联系，为挖掘肺退行性癌诊断标志物提供依据。在治疗抵抗研究中，通过构建药物处理模型，分析细胞退行性表型与药物敏感性的关系，揭示退行性癌细胞的治疗抵抗机制。

此外，该细胞系是抗肺退行性癌药物筛选的特色工具。体外可通过CCK-8法、流式细胞术检测药物对细胞增殖及凋亡的影响，利用Transwell实验评估药物对细胞侵袭能力的干预效果；体内可构建裸鼠肺癌移植瘤模型，观察药物对退行性肿瘤生长的抑制作用，为临床制定针对性治疗方案提供数据支撑。使用该细胞需注意：一是传代控制在40代以内，每8代通过免疫印迹验证LC3B表达及退行性表型稳定性；二是培养时避免频繁更换培养基，减少外界刺激对细胞退行性状态的干扰；三是实验中建议设置普通肺腺癌细胞（如A549）作为对照，明确退行性癌的特异性特征。作为肺退行性癌研究的专属模型，Calu-6细胞为推动肺癌特殊病理类型研究与临床转化提供了不可替代的实验基础。