LS 174T人结肠腺癌细胞特性及研究应用

LS 174T人结肠腺癌细胞是结直肠癌研究领域的重要人源细胞系，1974年从一名68岁女性结肠腺癌患者的腹水转移灶中分离建立，隶属于分化程度较高的结肠腺癌细胞系。该细胞系因稳定保留结肠腺癌的分泌特性及肠道上皮细胞表型，尤其在黏液分泌和肿瘤标志物表达方面的鲜明特征，成为解析结直肠癌发病机制、肠道分化调控及药物研发的核心实验模型。

生物学特性上，LS 174T细胞呈现典型的柱状上皮细胞形态，体外培养以贴壁生长为主，细胞排列紧密呈铺路石样或腺管样结构，核质比适中，核仁清晰，胞质丰富且含有大量黏液颗粒，具有较强的黏液分泌功能。其核心特征是高表达肠道上皮特异性标志物，如黏蛋白2（MUC2）、细胞角蛋白20（CK20）及绒毛蛋白（Villin），同时过量表达癌胚抗原（CEA），部分细胞还表达CD44⁺/CD133⁺肿瘤干细胞表型。该细胞增殖活性旺盛，倍增时间约30-40小时，虽侵袭能力弱于LoVo细胞，但具备一定的体外克隆形成能力，分子层面存在KRAS基因激活突变，与临床约40%的结直肠癌患者分子特征相符。

体外培养LS 174T细胞需精准调控环境与营养条件，zui适培养环境为37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱，推荐使用添加10%胎牛血清（FBS）、1%抗菌药物混合液的MEM培养基，添加2mM氨基戊二酸可维持细胞的黏液分泌功能与表型稳定。培养过程中需密切监测细胞状态，当融合度达到80%-90%时及时传代，避免过度融合导致腺管样结构紊乱。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化2-3分钟，待细胞间隙增大后加入wan全培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，传代比例以1:3-1:5为宜。需特别注意，该细胞胞质内黏液颗粒易在消化过度时破裂，影响细胞活性，且培养基需每1-2天更换一次，避免黏液堆积影响营养吸收。

在研究应用中，LS 174T细胞的价值具有明确针对性。肠道分化机制研究中，其高表达MUC2及腺管样结构特征，可用于探究结肠上皮细胞黏液分泌调控通路及Wnt/β-catenin信号通路在肠道分化中的作用；结直肠癌标志物研究领域，利用其CEA高表达特性，可开发CEA靶向诊断试剂及治疗药物，同时用于评估标志物检测的敏感性与特异性；药物研发方面，该细胞系是KRAS突变型结直肠癌靶向药物的核心筛选平台，可通过细胞活性检测、黏液分泌量测定评估抗KRAS药物及联合用药疗效；此外，在肿瘤微环境研究中，LS 174T细胞与肠道成纤维细胞、免疫细胞的共培养体系，可用于分析黏液屏障对肿瘤免疫逃逸的影响及免yi治疗药物的作用效果。

需注意的是，LS 174T细胞源于腹水转移灶，其黏液分泌能力可能高于原发灶细胞，实验结论需结合原发灶细胞系验证，且长期传代后部分细胞可能出现CEA表达下调，需定期通过免疫检测确认表型。但凭借明确的肠道分化特征、稳定的KRAS突变表型及高表达肿瘤标志物的特性，LS 174T细胞已成为结直肠癌分化机制及KRAS靶向治疗研究的重要工具，持续为相关领域的基础理论突破与临床转化提供关键支撑。