HT-22小鼠海马神经元细胞源自小鼠海马组织，贴壁生长，具神经元特征与神经功能，可用于神经退行性疾病、神经损伤机制研究及神经保护药物筛选。

HT-22小鼠海马神经元细胞

一、细胞基本生物学特性

HT-22小鼠海马神经元细胞源自小鼠胚胎海马组织的神经元前体细胞，经体外纯化与培养建立细胞株，是研究海马神经元生理功能、神经退行性疾病机制及神经保护药物研发的核心体外模型。其保留了海马神经元的关键生物学特征，尤其在模拟神经信号传递、氧化应激损伤响应方面表现突出，在神经科学、神经药理学及分子神经生物学研究领域应用广泛。

形态上，该细胞呈典型神经元形态，未wan全分化时胞体为圆形或椭圆形（直径 8-12μm），胞质透亮呈淡蓝色；随培养时间延长逐渐分化，延伸出细长的轴突与树突（长度可达胞体直径的 5-10 倍），部分细胞形成突触样连接（模拟体内神经元网络）；细胞核大而圆，位于胞体中央，核仁明显（1-2 个），染色质分布均匀（反映正常神经细胞的核形态特征）。体外培养以贴壁生长为主，初期需依赖细胞外基质辅助贴附，分化成熟后细胞间通过突起形成网络状分布，无恶性增殖特性，常规培养条件下可维持 2-3 周的活性（符合神经元有限增殖的生理特征）。功能特性方面，该细胞具备海马神经元的核心功能 —— 可表达神经递质受体（如谷an酸受体 GluN1、GluA1），响应兴奋性神经递质刺激；能产生动作电位相关的离子通道电流（如钠钾离子通道）；可释放神经营养因子（如 BDNF、NGF）调控自身存活与突触形成，模拟体内海马区神经元参与学习记忆、情绪调节的生理过程。

分子表型上，该细胞高表达神经元特异性标志物，如神经元特异性烯醇化酶（NSE）、微管相关蛋白 2（MAP2，树突特异性标志物）、神经丝蛋白（NF-H，轴突特异性标志物），其中 MAP2⁺NF-H⁺表型与正常海马神经元特征高度一致；同时表达神经功能相关蛋白，包括突触相关蛋白（如 Synapsin I、PSD-95）、离子通道蛋白（如 Nav1.6、Kv4.2）及神经保护相关蛋白（如 Bcl-2）；细胞内存在神经元功能调控的关键信号通路，如 BDNF 介导的 TrkB/Akt 通路（促进神经元存活与突触发生）、谷an酸介导的 Ca²⁺/CaMKII 通路（调控神经信号传递）、氧化应激激活的 JNK 通路（参与神经损伤与凋亡），这些通路正常激活是维持神经元生理功能的基础；染色体核型为正常小鼠二倍体（40 条染色体），与小鼠海马神经元的分子特征wan全吻合，为神经科学基础研究提供可靠实验模型。

二、体外培养关键条件

HT-22 小鼠海马神经元细胞的体外培养需精准调控环境与营养，兼顾其贴壁需求与神经分化维持：培养基选择上，常用 Neurobasal 培养基（或 DMEM/F12 培养基），需添加 2% B27 神经细胞专用添加剂（维持神经元存活与分化），培养基 pH 值严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若需诱导神经损伤模型（如模拟阿尔茨海默病氧化应激），可添加 H₂O₂；开展药物干预实验时，需在实验前 12 小时更换无血清培养基，避免血清成分干扰药物作用。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致神经元突起回缩、突触连接断裂，甚至引发细胞凋亡；因细胞贴壁依赖性强，需使用多聚赖氨酸（PLL）或层粘连蛋白（Laminin）包被的培养器皿（促进细胞贴附与突起延伸），包被浓度通常为 10μg/mL（PLL）或 5μg/mL（Laminin），37℃孵育 2 小时后使用。传代管理是培养核心：该细胞增殖能力有限，常规培养以原代维持为主，如需传代需在细胞融合度达 50%-60% 时进行（避免过度融合影响分化），操作前用无菌 PBS 轻柔清洗细胞 1 次（避免破坏突起），加入细胞消化液，37℃孵育 1-2 分钟至细胞间隙增大，立即加入含 B27 添加剂的培养基终止消化，用移液器轻轻吹打（力度需轻，防止突起断裂）形成单细胞悬液，按 1:2 比例接种至新包被培养皿；需注意消化时间不宜过长，否则易导致细胞活性下降。此外，细胞对营养成分极敏感，B27 添加剂需避光保存且开封后 1 个月内使用，劣质或过期添加剂会导致神经元存活率下降 60% 以上，突起生长受阻。

三、核心科研应用领域

依托与正常海马神经元的高度相似性及功能可控性，HT-22 小鼠海马神经元细胞在科研领域价值显著：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HT-22 小鼠海马神经元细胞需通过严格质量检测：细胞活力≥80%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体及病毒污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合 NSE⁺MAP2⁺NF-H⁺特征（免疫荧光验证）；功能指标达标（培养 7 天后突起平均长度≥50μm，突触相关蛋白 Synapsin I 阳性率≥60%）；染色体核型为正常小鼠二倍体（提供检测报告）。

使用时需注意：培养过程中避免频繁移动培养皿，防止震动导致神经元突起断裂；开展荧光染色实验（如突触蛋白检测）时，需用 4% 多聚甲醛固定细胞 15 分钟（固定时间不宜过长，避免抗原性丢失），透化后使用封闭液（5% BSA）孵育 30 分钟（减少非特异性结合）；若需长期保存细胞，冻存时需使用含 10% DMSO、20% FBS 及 2% B27 的 Neurobasal 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，立即加入 5 倍体积含 B27 的培养基，离心后弃上清接种至包被培养皿，静置 48 小时待细胞恢复形态与功能；进行药物处理或功能实验时，需设置空白对照组、损伤模型组及阳性对照组（如已知神经保护作用的姜黄素组），每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。