HT-3人子宫颈癌细胞源自患者肿瘤组织，贴壁生长，具宫颈癌恶性特征，可用于宫颈癌发病机制研究、抗妇科肿瘤药物筛选及肿瘤侵袭转移相关实验。

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更新时间：2025-11-11

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HT-3人子宫颈癌细胞

一、细胞基本生物学特性

HT-3人子宫颈癌细胞源自人子宫颈鳞癌患者的肿瘤组织，经体外分离培养建立细胞株，是研究宫颈癌发病机制、肿瘤细胞恶性行为及抗妇科肿瘤药物研发的重要体外模型。其保留了宫颈鳞癌的核心恶性特征，在妇科肿瘤学、转化医学及精准医疗研究领域应用广泛。

形态上，该细胞呈典型上皮源性癌细胞形态，胞体为多边形或不规则形，胞质丰富且呈嗜酸性，部分细胞可见胞质内空泡（提示鳞癌分化相关的角质形成特征）；细胞核大而畸形，核仁明显且数量增多（1-3 个），染色质分布不均呈粗颗粒状，常见多核细胞及核分裂象（反映恶性增殖活性）。体外培养以贴壁生长为主，呈单层无序排列，无接触抑制特性，细胞密度较高时可形成局部堆积或多层生长，部分细胞可脱落悬浮于培养基中（提示侵袭转移潜能）。生长特性方面，其增殖活性较强，倍增时间约 36-48 小时，常规培养条件下可稳定传代 50 代以上，且长期维持宫颈癌的关键恶性特征 —— 具备体外克隆形成能力，在软琼脂培养基中可形成紧密的克隆集落；可分泌肿瘤相关标志物（如鳞状细胞癌抗原 SCC-Ag、细胞角蛋白 19 片段 CYFRA21-1）；具备较强的侵袭与迁移能力，模拟体内宫颈癌的局部浸润与远处转移过程。

分子表型上，该细胞高表达宫颈癌相关标志物，如细胞角蛋白 14（CK14，鳞癌特异性标志物）、上皮细胞黏附分子（EpCAM）、增殖相关蛋白 Ki-67（阳性率≥70%，反映高增殖活性）；同时表达癌基因相关蛋白（如 EGFR、c-Myc）及抑癌基因失活相关表型（如 p53 突变型表达）；细胞内存在宫颈癌常见的异常信号通路激活，如 PI3K/Akt/mTOR 信号通路（调控细胞增殖与凋亡抵抗）、MAPK/ERK 信号通路（促进细胞侵袭迁移）、NF-κB 信号通路（参与炎症相关癌变），这些通路异常是导致细胞恶性转化、耐药形成的核心原因；染色体核型呈亚二倍体，存在特定染色体异常（如 3p 缺失、11q 扩增），与临床宫颈鳞癌患者肿瘤细胞的分子特征高度吻合，为宫颈癌机制研究提供可靠实验基础。

二、体外培养关键条件

HT-3 人子宫颈癌细胞的体外培养需精准调控环境与营养，维持其恶性表型与增殖活性：培养基选择上，常用 RPMI-1640 培养基，需添加 10% 胎牛血清（FBS）及 1% 非必需氨基酸（NEAA），培养基 pH 值严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若开展药物敏感性实验或侵袭迁移实验，需在实验前 1-2 天更换新鲜培养基，确保细胞处于对数生长期，减少代谢废物对实验结果的干扰。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞活力下降，增殖速率显著减缓；无需对培养器皿进行包被处理（细胞自身贴壁能力较强），但需定期更换培养瓶（每 3-5 代更换一次），避免细胞长期贴附导致的功能退化。传代管理是培养核心：当细胞融合度达 80%-90% 时需及时传代，操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，加入 0.25% 细胞消化液，37℃孵育 2-3 分钟至细胞边缘收缩、间隙增大，立即加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免用力过猛导致细胞破碎），按 1:3-1:5 比例接种至新培养瓶；需注意消化时间不宜过长，否则易导致细胞活性下降。此外，细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间一致性高的 FBS，劣质血清会导致细胞增殖活性下降 30% 以上，SCC-Ag 分泌量及侵袭能力显著降低。

三、核心科研应用领域

依托与临床宫颈鳞癌的高度相似性，HT-3 人子宫颈癌细胞在科研领域价值显著：

宫颈癌发病机制研究：可用于解析宫颈癌的分子发病机制，如探索 HPV（人乳头瘤病毒）相关癌蛋白（如 E6、E7）对 p53、Rb 抑癌基因的降解作用，研究 EGFR 过表达对细胞恶性增殖的调控机制，分析炎症因子（如 TNF-α、IL-6）在宫颈上皮内瘤变进展为癌中的促进作用，挖掘疾病诊断标志物（如 miR-21、lncRNA HOTAIR）与潜在治疗靶点（如 EGFR 抑制剂靶点、PI3K 抑制剂靶点），为理解宫颈癌的发生发展过程提供实验依据。

抗宫颈癌药物筛选与评估：作为宫颈鳞癌特异性靶细胞模型，可用于筛选靶向药物（如 EGFR 单克隆抗体、mTOR 抑制剂）、天然化合物（如姜黄素、白藜芦醇）及新型免yi治疗药物（如 PD-L1 抑制剂），通过 CCK-8 法测定药物对细胞增殖的抑制率，计算半数抑制浓度（IC₅₀）；结合流式细胞术（Annexin V/PI 双染）分析药物诱导的细胞凋亡率，通过 Western Blot 检测药物对异常信号通路相关蛋白（如 p-Akt、p-ERK）表达的影响，明确药物作用机制；同时可用于评估药物联合治疗效果（如靶向药联合放疗增敏剂），为临床用药方案优化提供数据支持。

宫颈癌侵袭与转移机制研究：可用于研究宫颈癌侵袭转移的分子机制，通过 Transwell 侵袭实验、划痕愈合实验评估细胞的侵袭与迁移能力，观察基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）对细胞外基质的降解作用，分析上皮 - 间质转化（EMT）相关蛋白（E - 钙黏蛋白、N - 钙黏蛋白、Snail）的表达变化，探索肿瘤微环境中成纤维细胞、免疫细胞对癌细胞侵袭的调控作用，为开发抗转移药物（如 MMP 抑制剂）提供实验基础。

宫颈癌耐药机制研究：可通过体外逐步加药诱导构建耐药细胞株（如shun铂耐药株、EGFR 抑制剂耐药株），对比耐药株与亲本株的分子表型差异，如 ABC 转运蛋白（ABCB1、ABCG2）表达升高、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Mcl-1）高表达、DNA 修复酶（如 ERCC1）活性增强，揭示耐药形成机制；同时可用于筛选耐药逆转剂（如 ABC 转运蛋白抑制剂、DNA 修复酶抑制剂），评估逆转剂对耐药细胞药物敏感性的恢复效果，为临床克服宫颈癌耐药提供实验支持。

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HT-3 人子宫颈癌细胞需通过严格质量检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合 CK14⁺EpCAM⁺Ki-67⁺特征（免疫荧光或 Western Blot 验证）；功能指标达标（软琼脂克隆形成率≥35%，Transwell 侵袭实验穿膜细胞数≥60 个 / 视野）；增殖速率稳定（倍增时间 36-48 小时）；染色体核型与分子异常特征明确（提供检测报告）。

使用时需注意：传代次数控制在 50 代内，超过传代上限可能导致细胞分子表型改变、侵袭能力减弱；开展侵袭迁移实验前，需将细胞同步化至对数生长期，通过饥饿处理（无血清培养基培养 12 小时）增强细胞迁移活性；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 RPMI-1640 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，离心去除冻存液后接种至新鲜培养基，静置 24 小时待细胞wan全恢复活性后再开展实验；进行药物处理或功能实验时，需设置空白对照组、溶剂对照组及阳性对照组（如shun铂阳性组），每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。

上一个：CCC-HEL-1人胚肝二倍体细胞