HTR-8/Svneo人胚胎滋养细胞源自人胚胎滋养层，贴壁生长，具侵袭、分泌功能，可用于胎盘形成机制、妊娠并发症（如子痫前期）及相关药物筛选研究。

HTR-8/Svneo人胚胎滋养细胞

一、细胞基本生物学特性

HTR-8/Svneo人胚胎滋养细胞源自人早期妊娠胎盘的绒毛外滋养细胞，经体外分离培养并通过永生化处理建立细胞株，是研究人类胎盘形成机制、滋养细胞功能调控及妊娠相关疾病的核心体外模型。其保留了正常滋养细胞的关键生物学特征，在生殖医学、产科病理学及围产医学研究领域应用广泛。

形态上，该细胞呈典型上皮样形态，胞体为多边形或梭形，胞质丰富且呈淡嗜酸性，部分细胞可见胞质突起（参与细胞侵袭与细胞间连接形成）；细胞核圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁 1-2 个且清晰，染色质分布均匀。体外培养以贴壁生长为主，形成单层排列时呈现 “铺路石" 样外观，具备一定接触抑制特性，但在模拟侵袭实验中可突破接触限制发生迁移。生长特性方面，其增殖活性稳定，倍增时间约 24-36 小时，因永生化处理可稳定传代 50 代以上，且长期维持滋养细胞的核心功能 —— 具备体外侵袭能力，可穿透人工基质膜（如 Matrigel）模拟胎盘植入过程；能分泌胎盘特异性激素（如人绒毛膜cu性腺激素 hCG、人胎盘生乳素 hPL）及细胞因子（如 VEGF、IL-6），调控胎盘血管生成与母体免疫耐受；表达滋养细胞特异性表面分子，模拟体内绒毛外滋养细胞的生理行为。

分子表型上，该细胞高表达滋养细胞特异性标志物，如细胞角蛋白 7（CK7）、上皮细胞黏附分子（EpCAM）、绒毛膜cu性腺激素 β 亚基（β-hCG），其中 CK7⁺EpCAM⁺表型与正常绒毛外滋养细胞特征高度一致；同时表达侵袭相关蛋白（如基质金属蛋白酶 MMP-2、MMP-9）及血管生成调控因子（如 VEGFR2、PlGF）；细胞内存在滋养细胞功能相关的信号通路激活，如 EGF（表皮生长因子）介导的 PI3K/Akt 通路（调控细胞侵袭与增殖）、TGF-β（转化生长因子 β）介导的 Smad 通路（调控细胞分化与免疫耐受），这些通路正常激活是维持胎盘植入与妊娠维持的关键；染色体核型经永生化处理后仍保持近二倍体特征，与人体滋养细胞的分子特征高度吻合，为妊娠相关研究提供可靠实验基础。

二、体外培养关键条件

HTR-8/Svneo 人胚胎滋养细胞的体外培养需精准调控营养与环境，兼顾其贴壁生长需求与功能维持：培养基选择上，常用 DMEM/F12 混合培养基（1:1 比例），需添加 10% 胎牛血清（FBS）、5μg/mL 胰岛素（维持细胞代谢活性）及 1% 非必需氨基酸（NEAA），培养基 pH 值严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若开展侵袭或激素分泌实验，需使用无血清或 2% 低血清培养基，避免血清成分干扰实验结果（如掩盖细胞自身分泌的 hCG 检测信号）。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降，甚至丢失激素分泌与侵袭功能。因细胞贴壁依赖性较强，需使用未经包被的普通培养器皿（自身可分泌细胞外基质成分辅助贴附），但需确保培养皿表面洁净无划痕，避免影响细胞铺展。传代管理是培养核心：当细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代，操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，加入细胞消化液，37℃孵育 1-2 分钟至细胞边缘收缩、间隙增大，立即加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免用力过猛破坏细胞表面突起），按 1:2-1:3 比例接种至新培养瓶；需注意消化时间不宜过长，否则易导致细胞活性下降。此外，细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间一致性高的胎牛血清，劣质血清会使 hCG 分泌量降低 40% 以上，MMP-2/9 活性显著下降。

三、核心科研应用领域

依托与正常滋养细胞的高度相似性及功能可控性，HTR-8/Svneo 人胚胎滋养细胞在科研领域价值显著：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HTR-8/Svneo 人胚胎滋养细胞需通过严格质量检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合 CK7⁺EpCAM⁺β-hCG⁺特征（免疫荧光或 Western Blot 验证）；功能指标达标（Matrigel 侵袭实验穿膜细胞数≥60 个 / 视野，hCG 分泌量≥50mIU/10⁶cells/24h）；增殖速率稳定（倍增时间 24-36 小时）；染色体核型近二倍体（提供检测报告）。

使用时需注意：虽为永生化细胞，传代超 50 代仍需监测激素分泌与侵袭能力，避免功能退化；开展侵袭实验前，需将细胞接种至 Matrigel 包被的 Transwell 小室，确保基质膜厚度均匀；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM/F12 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，离心后接种至新鲜培养基，静置 48 小时待细胞恢复贴壁与功能；进行药物处理或功能实验时，需设置空白对照组与溶剂对照组，每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。