Human Cell line 1D3人类粒细胞系为粒细胞来源，悬浮生长，具粒细胞相关功能特征，可用于粒细胞生理机制、炎症反应及相关血液疾病的研究与实验。

Human Cell line 1D3人类粒细胞系

一、细胞基本生物学特性

Human Cell line 1D3人类粒细胞系源自健康人骨髓中的粒细胞前体细胞，经体外诱导分化与纯化建立，是研究人类粒细胞生理功能、分化成熟机制及粒细胞相关疾病的重要体外模型。其保留了正常粒细胞的核心生物学特征，无恶性转化属性，在血液细胞生物学、感染免疫学及炎症机制研究领域应用广泛。

形态上，该细胞呈典型的粒细胞形态特征，根据分化阶段可呈现不同形态：处于早幼粒细胞阶段时，胞体较大（直径 12-15μm），胞质丰富且呈深蓝色，胞质内可见较多嗜天青颗粒；分化至中幼粒细胞阶段后，胞体缩小（直径 10-12μm），胞质逐渐转为淡蓝色，出现特异性颗粒（中性颗粒、嗜酸性颗粒或嗜碱性颗粒，依诱导方向而定）；细胞核呈圆形或椭圆形，随分化进程逐渐凹陷呈肾形，染色质由疏松逐渐浓缩，核仁从明显逐渐消失。体外培养以半悬浮生长为主，部分贴壁能力较弱的细胞可轻微贴附于培养皿底部，无接触抑制特性，可在适宜诱导条件下向成熟粒细胞分化。生长特性方面，其增殖活性中等，倍增时间约 36-48 小时，常规培养条件下可稳定传代 30-40 代，且能长期维持粒细胞的关键功能 —— 具备吞噬病原体（如大肠杆菌、白色念珠菌）的能力，可通过吞噬实验检测；能释放炎症介质（如白三烯、细胞因子）参与免疫反应；表达粒细胞特异性表面分子，模拟体内正常粒细胞的生理功能与分化过程。

分子表型上，该细胞高表达粒细胞特异性标志物，如 CD11b、CD13、CD33、CD66b，其中 CD11b⁺CD13⁺表型与正常骨髓粒细胞前体细胞特征高度一致；随分化成熟，可逐渐表达成熟粒细胞标志物（如 CD16、CD64）；同时表达粒细胞功能相关蛋白，包括吞噬受体（如 FcγRⅢ，即 CD16）、颗粒酶（如弹性蛋白酶）及炎症因子受体（如 IL-8R、TNF-αR）；细胞内存在粒细胞分化与功能相关的信号通路激活，如 GM-CSF（粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子）介导的 JAK2/STAT3 信号通路（调控细胞增殖与分化）、TLR4（ Toll 样受体 4）介导的 NF-κB 信号通路（调控炎症反应），这些通路正常激活是维持粒细胞生理功能的关键；染色体核型为正常二倍体，与健康人粒细胞的分子特征wan全吻合，为粒细胞相关基础研究提供可靠实验基础。

二、体外培养关键条件

Human Cell line 1D3 人类粒细胞系的体外培养需精准调控营养与环境，兼顾其增殖需求与分化潜能：培养基选择上，常用 IMDM 培养基（Iscove's Modified Dulbecco's Medium），需添加 10% 胎牛血清（FBS）、20ng/mL 粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF，维持细胞增殖与粒细胞分化方向）、10ng/mL 白细胞介素 - 3（IL-3，增强细胞存活能力），培养基 pH 值严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若需诱导细胞向特定成熟阶段分化（如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞），需额外添加诱导因子（如诱导中性粒细胞分化可加 G-CSF，诱导嗜酸性粒细胞分化可加 IL-5）。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞活力下降，分化进程紊乱（如提前凋亡或分化停滞）；无需对培养器皿进行包被处理（细胞半悬浮生长，轻微贴附不影响状态），但需定期轻轻摇晃培养瓶，防止细胞聚集成团影响营养吸收。传代管理是培养核心：当细胞密度达到 2×10⁶-3×10⁶ cells/mL 时需及时传代，无需消化处理，直接取对数生长期细胞悬液，按 1:3 比例加入含新鲜细胞因子的培养基即可；传代时需避免剧烈吹打，防止细胞破裂；培养基更换频率为每 2 天 1 次，同时补充新鲜细胞因子（GM-CSF、IL-3 半衰期较短，需定期补充以维持活性），防止细胞因细胞因子不足出现凋亡。此外，细胞对血清与细胞因子质量极敏感，需选用低内毒素（≤5 EU/mL）、批次间一致性高的胎牛血清，细胞因子需选择活性验证合格的重组蛋白，劣质血清或失活细胞因子会导致细胞增殖率下降 50% 以上，甚至丢失粒细胞分化能力。

三、核心科研应用领域

依托与正常人类粒细胞的高度相似性及可控的分化特性，Human Cell line 1D3 人类粒细胞系在科研领域价值显著：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 Human Cell line 1D3 人类粒细胞系需通过严格质量检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体及病毒污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合粒细胞特征（CD11b⁺CD13⁺CD33⁺，分化诱导后可检测到成熟标志物如 CD16⁺）；功能指标达标（吞噬率≥30%，杀菌率≥25%，依检测条件略有差异）；增殖速率稳定（倍增时间 36-48 小时）；染色体核型为正常二倍体（提供检测报告）。

使用时需注意：传代次数控制在 30-40 代内，超过上限可能导致细胞分化潜能下降、功能减弱；开展分化诱导实验前，需将细胞同步化至对数生长期，确保所有细胞处于相同分化起始阶段；若需长期保存细胞，冻存时需使用含 10% DMSO、20% FBS 及 10ng/mL GM-CSF 的 IMDM 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，立即加入 5 倍体积含新鲜细胞因子的培养基，离心后弃上清接种，静置 24 小时待细胞恢复活性与功能；进行功能实验（如吞噬、杀菌实验）时，需设置阳性对照（如已知吞噬能力正常的粒细胞）与阴性对照（如灭活的细胞），每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。