HuTu-80人十二脂肠腺癌源自患者肿瘤组织，贴壁生长，具腺癌特征与恶性增殖性，可用于十二指肠腺癌机制研究、药物敏感性检测及肿瘤微环境相关实验。

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更新时间：2025-11-10

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HuTu-80人十二脂肠腺癌

一、细胞基本生物学特性

HuTu-80人十二脂肠腺癌源自人十二指肠腺癌患者的肿瘤组织，经体外分离培养建立细胞株，是研究十二指肠腺癌发病机制、肿瘤细胞生物学行为及抗消化道肿瘤药物研发的重要体外模型。其保留了十二指肠腺癌的核心恶性特征，在消化道肿瘤学基础研究与转化医学领域应用广泛。

形态上，该细胞呈典型上皮样癌细胞形态，胞体为多边形或不规则形，胞质丰富且呈嗜酸性，部分细胞可见胞质内空泡（提示黏液分泌特征，符合腺癌病理属性）；细胞核大而畸形，核仁明显且数量增多（1-3 个），染色质分布不均呈粗颗粒状，部分细胞可见多核或核分裂象。体外培养以贴壁生长为主，呈单层无序排列，无接触抑制特性，细胞密度较高时可形成局部堆积，甚至出现多层生长现象。生长特性方面，其增殖活性较强，倍增时间约 36-48 小时，常规培养条件下可稳定传代 50 代以上，且能长期维持十二指肠腺癌的关键恶性特征 —— 具备体外克隆形成能力，在软琼脂培养基中可形成紧密的克隆集落；可分泌肿瘤相关因子（如 CEA、CA19-9 等肿瘤标志物）；具备一定侵袭与迁移能力，模拟体内肿瘤细胞的浸润行为。

分子表型上，该细胞高表达腺癌相关标志物，如癌胚抗原（CEA）、糖类抗原 19-9（CA19-9）、细胞角蛋白 19（CK19），同时表达上皮细胞黏附分子（EpCAM）及肿瘤增殖相关蛋白（Ki-67）；细胞内存在十二指肠腺癌常见的异常信号通路激活，如 PI3K/Akt/mTOR 信号通路、Wnt/β-catenin 信号通路、NF-κB 信号通路，这些通路异常激活是导致细胞恶性增殖、凋亡抵抗及侵袭转移的关键原因；染色体核型呈亚二倍体，存在特定染色体异常（如染色体缺失、易位），与临床十二指肠腺癌患者肿瘤细胞的分子特征高度吻合，为消化道肿瘤机制研究提供可靠实验基础。

二、体外培养关键条件

HuTu-80 人十二指肠腺癌细胞的体外培养需精准调控环境与营养，以维持其恶性特征与增殖活性：培养基选择上，shou选 RPMI-1640 培养基，需添加 10% 胎牛血清（FBS）及 1% 非必需氨基酸（NEAA），培养基 pH 值需严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若开展药物敏感性实验或侵袭迁移实验，需在实验前 1-2 天更换新鲜培养基，确保细胞处于对数生长期，减少实验误差。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞活力下降，增殖速率显著减缓；无需对培养器皿进行包被处理（细胞自身贴壁能力较强），但需定期更换培养瓶，避免细胞代谢废物（如乳酸、氨）积累对细胞状态的影响。传代管理是培养核心：当细胞融合度达 80%-90% 时需及时传代，操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，加入 0.25% 细胞消化液，37℃孵育 2-3 分钟至细胞边缘收缩、间隙增大，立即加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免用力过猛导致细胞破碎），按 1:3-1:5 比例接种至新培养瓶；需注意消化时间不宜过长，否则易导致细胞活性下降。此外，细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间一致性高的 FBS，劣质血清会导致细胞增殖活性下降 30% 以上，甚至丢失肿瘤标志物表达与侵袭能力。

三、核心科研应用领域

依托与临床十二指肠腺癌的高度相似性，HuTu-80 人十二指肠腺癌细胞在科研领域具有显著价值：

十二指肠腺癌发病机制研究：可用于解析十二指肠腺癌的分子发病机制，如探索 Wnt/β-catenin 信号通路异常激活对细胞恶性转化的调控作用，研究 PI3K/Akt/mTOR 通路与细胞凋亡抵抗的关联，分析肿瘤标志物（CEA、CA19-9）的合成与分泌机制，挖掘疾病诊断标志物（如 miR-21、lncRNA HOTAIR）与潜在治疗靶点（如 PI3K 抑制剂靶点、Wnt 通路抑制剂靶点），为理解十二指肠腺癌的发生发展过程提供实验依据。

抗消化道肿瘤药物筛选与评估：作为十二指肠腺癌特异性靶细胞模型，可用于筛选hua疗药物（如 5 - 氟尿mi啶、奥沙li铂）、靶向药物（如 mTOR 抑制剂、抗 EGFR 单克隆抗体）及新型候选药物（如天然化合物、中药提取物），通过 CCK-8 法测定药物对细胞增殖的抑制率，计算半数抑制浓度（IC₅₀），结合流式细胞术（Annexin V/PI 双染）分析药物诱导的细胞凋亡率，评估药物疗效；同时可通过 Western Blot 检测药物对异常信号通路相关蛋白（如 p-Akt、β-catenin）表达的影响，明确药物作用机制。

肿瘤侵袭与转移机制研究：可用于研究十二指肠腺癌侵袭转移的分子机制，通过 Transwell 侵袭实验、划痕愈合实验评估细胞的侵袭与迁移能力，观察基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）对细胞外基质的降解作用，分析上皮 - 间质转化（EMT）相关蛋白（E - 钙黏蛋白、N - 钙黏蛋白、Snail）的表达变化，为理解肿瘤细胞的浸润转移过程提供实验基础；同时可用于筛选抗转移药物，评估药物对细胞侵袭迁移能力的抑制效果。

肿瘤微环境与耐药机制研究：可构建肿瘤细胞与基质细胞（如成纤维细胞、免疫细胞）的共培养模型，研究肿瘤微环境对癌细胞存活、增殖及耐药性的调控作用，分析炎症因子（TNF-α、IL-6）对药物敏感性的影响；同时可通过体外逐步加药诱导构建耐药细胞株（如 5 - 氟尿mi啶耐药株），对比耐药株与亲本株的分子表型差异，分析 ABC 转运蛋白（ABCB1、ABCG2）表达变化、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax）比例改变，揭示耐药形成机制，为临床克服十二指肠腺癌耐药提供实验支持。

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HuTu-80 人十二指肠腺癌细胞需通过严格质量检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合 CEA⁺CA19-9⁺CK19⁺EpCAM⁺特征（免疫荧光或 Western Blot 验证）；增殖速率稳定（倍增时间 36-48 小时）；功能指标达标（软琼脂克隆形成率≥30%，Transwell 侵袭实验穿膜细胞数≥50 个 / 视野）；染色体核型与分子异常特征明确（提供检测报告）。

使用时需注意：传代次数控制在 50 代内，超过传代上限可能导致细胞分子表型改变、侵袭能力减弱；开展侵袭迁移实验前，需将细胞同步化至对数生长期，确保细胞状态一致；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 RPMI-1640 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，离心去除冻存液后接种至新鲜培养基，静置 24 小时待细胞wan全恢复活性后再开展实验；进行药物处理或功能实验时，需设置空白对照组、溶剂对照组及阳性对照组（如已知有效hua疗药物组），每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。

上一个：骆驼转化生长因子β2试剂盒