IAR20大鼠肝细胞源自正常大鼠肝脏，贴壁生长呈上皮样，具肝脏代谢功能，可用于肝损伤机制、药物肝代谢及肝脏疾病相关研究与药物筛选。

IAR20大鼠肝细胞

一、细胞基本生物学特性

IAR20大鼠肝细胞源自正常大鼠肝脏组织，经体外分离纯化建立，是研究肝脏生理功能、肝损伤机制及肝脏相关疾病的经典体外模型。其保留了肝细胞的核心生物学特征，在肝脏药理学、毒理学及病理学研究中应用广泛。

形态上，该细胞呈典型上皮样形态，胞体为多边形或不规则形，胞质丰富且呈嗜酸性，部分细胞可见双核或多核现象，胞质内可观察到肝糖原颗粒与脂滴（PAS 染色、油红 O 染色可验证）；细胞核圆形或椭圆形，位于细胞中央或偏位，核仁 1-2 个，染色质分布均匀。体外培养以贴壁生长为主，形成单层 “铺路石" 样排列，具有一定接触抑制特性，细胞融合度达 85% 以上时增殖速率减缓。生长特性方面，其增殖活性中等，倍增时间约 36-48 小时，常规培养条件下可稳定传代 50 代以上，且能长期维持肝细胞的关键功能 —— 具备肝脏te有的代谢与解毒能力，可表达尿素合成相关酶、药物代谢酶（如 CYP450 酶系），同时能合成白蛋白，模拟正常肝细胞的生理功能。

分子表型上，该细胞高表达肝细胞特异性标志物，如白蛋白（Albumin）、细胞角蛋白 18（CK18）、肝细胞核因子 4α（HNF4α）；同时表达肝脏代谢相关蛋白，包括葡萄糖 - 6 - 磷酸酶（G6Pase）、CYP3A4、CYP2E1 等 CYP450 酶家族成员，可参与药物、外源化合物的代谢与解毒过程。细胞内还存在肝脏te有的信号通路，如调控肝细胞增殖的 PI3K/Akt 通路、调控肝脏代谢的 AMPK 通路，这些通路共同维持肝细胞的功能稳态。其染色体核型为正常二倍体，与大鼠体内肝细胞的分子特征高度吻合，为肝脏相关研究提供可靠的体外实验基础。

二、体外培养关键条件

IAR20 大鼠肝细胞的体外培养需精准调控营养环境与培养条件，以维持其肝细胞特性与生理功能：培养基选择上，shou选 William's E 培养基，需添加 10% 胎牛血清（FBS）、10μg/mL 胰岛素及 1% 非必需氨基酸（NEAA）。培养基 pH 值需严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若开展药物代谢实验，需改用无血清培养基，避免血清成分干扰酶活性检测。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动需≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降，甚至丢失代谢功能。由于该细胞贴壁依赖性强，需使用经胶原蛋白 I 或明胶包被的培养器皿，增强细胞贴壁能力，维持上皮形态。传代管理是培养核心：当细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代，操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，加入细胞消化液，37℃孵育 2-3 分钟至细胞边缘收缩、间隙增大，立即加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免用力过猛破坏细胞结构），按 1:2-1:4 比例接种至新的包被培养瓶。需注意消化时间不宜过长，否则易导致细胞活性下降。此外，细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间一致性高的 FBS，劣质血清会使白蛋白合成量降低 30% 以上，CYP450 酶活性显著下降。

三、核心科研应用领域

依托与正常肝细胞的高度功能相似性，IAR20 大鼠肝细胞在科研领域具有显著价值：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 IAR20 大鼠肝细胞需通过严格的质量检测：细胞活力需≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测结果为阴性）；免疫表型符合 Albumin⁺CK18⁺HNF4α⁺特征（免疫荧光或 Western Blot 验证）；功能指标达标（白蛋白分泌量≥5μg/10⁶cells/24h，CYP3A4 活性≥10pmol/min/mg 蛋白）；增殖速率稳定（倍增时间 36-48 小时）；染色体核型为正常二倍体（需提供检测报告）。

使用时需注意：传代次数需控制在 40 代内，超过上限可能导致代谢酶活性下降、白蛋白合成减少；开展药物代谢或肝毒性实验前，需将细胞培养至对数生长期，确保细胞功能稳定；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 William's E 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，离心去除冻存液后接种至包被培养瓶，静置 48 小时待细胞wan全恢复贴壁与功能后再开展实验；进行药物处理或损伤实验时，需设置空白对照组与溶剂对照组，每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。