Mouse podocyte小鼠肾足细胞，具独特足突结构，维持滤过屏障功能，是研究肾脏生理、肾小球疾病机制及相关药物筛选的重要模型。

Mouse podocyte小鼠肾足细胞

Mouse podocyte小鼠肾足细胞是从小鼠肾脏肾小球中分离纯化，经永生化处理建立的细胞系。作为肾小球滤过屏障的核心组成部分，其保留了体内肾足细胞的独特结构与功能特性，能模拟肾脏滤过生理过程及病理损伤反应，成为研究肾脏生理机制、肾小球疾病发病原理及相关药物筛选的核心实验模型，为解析肾脏疾病分子机制、推动临床治疗方案研发提供了标准化工具。

一、核心生物学特性

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞在体外分化成熟后，呈现典型的 “星状" 形态，在倒置显微镜下可见细胞体伸出多个细长的胞质突起（即足突），足突间通过裂隙膜相互连接，形成类似体内肾小球足细胞的 “滤过裂隙" 结构，与肾小球滤过屏障的结构基础高度一致。细胞稳定表达肾足细胞特异性标志物： nephrin（裂隙膜核心蛋白，维持滤过屏障完整性的关键分子）、podocin（参与裂隙膜组装与信号传递）、synaptopodin（足突骨架蛋白，调控足突形态），同时表达肾小球上皮细胞相关抗原，不表达肾小管上皮细胞标志物（如 aquaporin-1）及内皮细胞标志物（如 CD31），明确其肾足细胞的属性。

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞最核心的功能是维持滤过屏障功能：体外培养的分化成熟细胞，其足突间形成的裂隙膜可模拟体内滤过过程，对小分子物质（如葡萄糖、小分子蛋白）具选择性通透能力，而对大分子蛋白（如白蛋白）具屏障作用，与体内肾小球滤过功能高度吻合。此外，细胞还具备信号传导与损伤应答能力 —— 当受到病理因素（如高糖、炎症因子）刺激时，会出现足突融合、裂隙膜蛋白表达下调、细胞凋亡等反应，模拟体内肾足细胞的病理损伤过程，为研究肾小球疾病的细胞损伤机制提供了可控的体外模型。

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞具 “条件性分化" 特性：在含干扰素 -γ（IFN-γ）的培养基中培养时，细胞呈未分化状态，增殖活跃，形态为梭形；当去除 IFN-γ 并延长培养时间（约 7-10 天），细胞进入分化成熟阶段，逐渐形成足突结构，表达成熟肾足细胞标志物（nephrin、podocin），同时增殖能力显著下降，这一特性使其可根据实验需求，灵活调控细胞分化状态，研究不同分化阶段的细胞功能与分子机制。

二、主要研究应用场景

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞是解析肾小球滤过生理机制的核心工具。例如，通过研究裂隙膜蛋白（nephrin、podocin）的相互作用，发现 nephrin 可通过与 podocin 结合形成蛋白复合物，维持裂隙膜结构稳定，调控滤过通透性；利用基因编辑技术敲除 nephrin 基因后，细胞足突融合、裂隙膜消失，滤过屏障功能丧失，进一步证实 nephrin 在滤过屏障构建中的关键作用。此外，细胞还用于研究肾脏水盐代谢与血压调节机制 —— 通过检测细胞对血管紧张素 Ⅱ 的应答反应，揭示肾足细胞在肾素 - 血管紧张素系统调控中的作用，为理解肾脏生理功能提供分子层面的依据。

依托病理损伤应答特性，Mouse podocyte 小鼠肾足细胞广泛用于肾小球疾病发病机制研究。在糖尿病肾病研究中，用高糖培养基培养细胞，可观察到细胞足突融合、nephrin 表达下调、炎症因子（如 TNF-α、IL-6）分泌增加，模拟体内糖尿病肾病中肾足细胞的损伤过程，进一步研究发现高糖通过激活 PI3K/Akt 信号通路诱导细胞损伤，为糖尿病肾病的靶向治疗提供靶点。在肾病综合征研究中，通过构建免疫复合物刺激模型，发现免疫复合物可通过激活补体系统，导致肾足细胞凋亡，揭示免疫损伤在肾病综合征中的作用机制。

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞也用于肾脏疾病治疗药物的筛选与评价。在药物筛选中，将候选药物（如天然提取物、小分子化合物）加入病理损伤模型（如高糖损伤模型、炎症损伤模型），通过检测细胞足突形态、裂隙膜蛋白表达、细胞凋亡率等指标，评估药物的保护作用；例如，筛选发现某黄酮类化合物可上调 nephrin 表达，抑制高糖诱导的足突融合，降低细胞凋亡率，提示其具潜在治疗糖尿病肾病的活性。同时，细胞还用于药物毒性评价，检测药物对肾足细胞的损伤作用，为药物安全性评估提供数据支持。

三、细胞培养关键要点

Mouse podocyte 小鼠肾足细胞需使用专用培养基培养：未分化阶段使用含 10% 胎牛血清（FBS，低内毒素批次）、1% 青mei素 - 链mei素、50U/mL 干扰素 -γ（IFN-γ）的 DMEM/F12 培养基，维持细胞增殖活性；分化阶段需去除 IFN-γ，更换为含 10% FBS、1% 青mei素 - 链mei素、1% 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒（ITS，促进细胞分化）的 DMEM/F12 培养基，诱导细胞分化成熟。培养基 pH 需控制在 7.2-7.4，使用前 37℃预热，避免低温刺激影响细胞状态。

细胞需置于 37℃、5% CO₂、湿度 95% 以上的恒温培养箱中培养：37℃维持细胞代谢与分化所需酶活性；5% CO₂稳定培养基 pH，避免 pH 异常导致细胞分化紊乱；95% 湿度防止培养基蒸发，避免渗透压改变影响细胞形态。培养过程中需每天观察细胞状态，未分化细胞需保持对数生长期，避免过度融合；分化细胞需定期检测标志物表达，确保分化成熟度。

未分化细胞融合度达 70%-80% 时传代：用无菌 PBS 洗涤 2 次，加入适量细胞消化液，37℃孵育 2-3 分钟，待细胞脱落，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，按 1:3 比例接种到新培养瓶，添加含 IFN-γ 的培养基。

冻存需选用未分化对数生长期细胞（活率≥90%），冻存液为 90% FBS+10% DMSO，梯度降温（4℃30 分钟→-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）。复苏时 37℃水浴融化（≤1 分钟），加入 5 倍预热培养基离心去 DMSO，重悬后接种到含 IFN-γ 的培养基，24 小时内不换液，提高存活率。

四、实验使用注意事项