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Ishikawa人子宫内膜癌细胞
产品简介:

Ishikawa人子宫内膜癌细胞源自人子宫内膜腺癌组织,贴壁生长呈上皮样,具激素敏感性,可用于子宫内膜癌机制研究、激素调控及抗肿瘤药物筛选。

产品型号:试剂盒

更新时间:2025-11-10

厂商性质:代理商

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产品介绍

Ishikawa人子宫内膜癌细胞

一、细胞基本生物学特性

Ishikawa人子宫内膜癌细胞源自人子宫内膜腺癌组织,是研究子宫内膜癌发病机制、激素调控及药物研发的经典体外模型,因保留子宫内膜癌细胞的激素敏感性与上皮源性恶性表型,在生殖系统肿瘤基础研究与转化医学领域应用广泛。

形态上,该细胞呈典型上皮样形态,胞体多边形或不规则形,胞质丰富且呈嗜酸性,细胞核大而圆,核仁清晰可见,部分细胞呈现双核现象,体外培养以贴壁生长为主,呈片状或铺路石样排列,无接触抑制特性,细胞融合度达 85%-90% 时仍可继续增殖。生长特性方面,其增殖活性中等,倍增时间约 48-56 小时,常规培养条件下可稳定传代 50 代以上,且能长期维持子宫内膜癌的核心功能特征 —— 具有显著的雌激素敏感性,在雌激素(如 17β- 雌二醇)作用下,细胞增殖速率可提升 30%-50%,同时可表达雌激素受体 α(ERα)与孕激素受体(PR),为研究激素调控子宫内膜癌进展的机制提供理想模型。

分子表型上,该细胞高表达子宫内膜上皮特异性标志物,如细胞角蛋白 7(CK7)、细胞角蛋白 18(CK18),同时表达子宫内膜癌相关抗原(如 CA125);细胞内存在子宫内膜癌常见的分子异常,部分样本检测到 PTEN 基因突变、PI3K/Akt 信号通路异常激活,染色体核型呈亚二倍体,存在特定染色体片段的扩增与缺失(如 1q21-23 扩增),与临床雌激素受体阳性子宫内膜癌患者的肿瘤组织分子特征高度吻合,为疾病特异性研究提供可靠实验依据。

二、体外培养关键条件

Ishikawa 人子宫内膜癌细胞的体外培养需精准调控环境与营养,以维持其贴壁特性与激素敏感性:培养基选择上,shou选含高糖(4.5g/L D - 葡萄糖)的 DMEM/F12 混合培养基,需添加 10%-12% 胎牛血清(FBS)提供生长必需的营养因子,若研究激素调控机制,需使用去激素血清( charcoal-stripped FBS)避免血清中内源性激素干扰,可补充 1% 非必需氨基酸(NEAA)提升细胞代谢活性,培养基 pH 值需控制在 7.2-7.4,渗透压维持在 290-310 mOsm/kg;培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度,CO₂浓度波动≤±0.3%,温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降,出现大量悬浮死亡,甚至丢失激素受体表达。

传代管理是培养核心:当细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代,操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次,去除残留血清与代谢废物,加入含 EDTA 的细胞消化液(0.25% 胰dan白酶 - EDTA),37℃孵育 2-3 分钟至细胞间隙增大、形态变圆,加入含血清的培养基终止消化,轻柔吹打形成单细胞悬液,按 1:3-1:5 比例接种至新培养瓶;需避免消化过度损伤细胞,传代后 24 小时内避免频繁移动培养瓶,确保细胞稳定贴壁。此外,细胞对血清质量敏感,需选用低内毒素(≤10 EU/mL)、批次间一致性高的 FBS,劣质血清会导致细胞形态异常、激素受体表达降低 40% 以上,影响实验结果准确性。

三、核心科研应用领域

依托与临床子宫内膜癌的高度相似性及激素敏感性特征,Ishikawa 人子宫内膜癌细胞在科研领域价值显著:

  1. 激素调控机制研究:可用于解析雌激素、孕激素对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的调控机制,如探索 ERα 介导的下游靶基因(如 MYC、CCND1)表达调控,研究孕激素对雌激素诱导的细胞增殖的拮抗作用,为子宫内膜癌内分泌治疗(如孕激素治疗)策略优化提供实验基础;

  1. 子宫内膜癌发病机制研究:可用于探索子宫内膜癌发生发展的分子机制,如分析 PTEN 基因突变对细胞恶性增殖、侵袭的影响,研究 PI3K/Akt、MAPK 等信号通路异常激活的作用,挖掘疾病早期诊断标志物(如 miR-200c、LINC00672)与潜在治疗靶点;

  1. 抗肿瘤药物筛选与评估:作为激素敏感性子宫内膜癌的靶细胞模型,可用于检测内分泌治疗药物(如他mo昔芬、甲地孕酮)、hua疗药物及新型靶向药物(如 PI3K 抑制剂)的抑瘤活性,通过 CCK-8 法、克隆形成实验测定药物半数抑制浓度(IC₅₀),结合流式细胞术分析药物诱导的细胞凋亡与周期阻滞,评估药物疗效;

  1. 肿瘤微环境研究:可用于构建子宫内膜癌细胞与间质细胞(如子宫内膜间质细胞、免疫细胞)的共培养模型,研究肿瘤微环境对细胞增殖、侵袭的调控作用,分析炎症因子(如 IL-6、TNF-α)对细胞激素敏感性的影响,深化对子宫内膜癌进展多因素调控机制的认知。

四、质量控制与使用注意事项

合格的 Ishikawa 人子宫内膜癌细胞需通过严格质量检测:细胞活力≥90%(台盼蓝染色法检测,死细胞呈蓝色,活细胞无色透明);无细菌、真菌、支原体污染(采用 PCR 法或培养法检测,结果均为阴性);免疫表型符合 CK7⁺CK18⁺ERα⁺PR⁺特征,CA125 表达阳性;雌激素诱导增殖率≥30%(17β- 雌二醇处理后),增殖速率稳定(倍增时间 48-56 小时);染色体核型与分子异常特征明确(提供检测报告)。

使用时需注意:传代次数控制在 50 代内,超过传代上限可能导致激素受体表达下降、细胞功能退化;若开展激素相关实验,需提前 24-48 小时更换去激素培养基,排除内源性激素干扰;细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM/F12 专用冻存液,采用梯度降温法(4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮长期保存),复苏后需快速接种至新鲜预热的培养基,静置 48 小时待细胞wan全恢复活性与激素敏感性后再开展实验;进行药物处理或激素调控实验时,需确保细胞处于对数生长期,每组设置 3 个复孔,同时设置空白对照组与溶剂对照组,减少实验误差,保证结果的可靠性。

 

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