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J82膀胱癌细胞
产品简介:

J82膀胱癌细胞源自人膀胱癌组织,贴壁生长呈上皮样,具侵袭性,高表达膀胱癌相关标志物,可用于膀胱癌机制研究、药物筛选及耐药性分析。

产品型号:试剂盒

更新时间:2025-11-10

厂商性质:代理商

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产品介绍

J82膀胱癌细胞

一、细胞基本生物学特性

J82膀胱癌细胞源自人类膀胱癌组织,是研究膀胱癌发病机制、药物研发的重要体外模型,因保留膀胱癌典型的恶性生物学特征与分子表型,在泌尿系统肿瘤研究领域应用广泛。

形态上,该细胞呈典型上皮样形态,胞体多边形或不规则形,胞质丰富且呈嗜碱性,细胞核大而圆,核仁明显,部分细胞出现核质比增高、核畸形现象,体外培养以贴壁生长为主,呈片状或巢状排列,无接触抑制特性,细胞融合度达 85%-90% 时仍可继续增殖。生长特性方面,其增殖活性较强,倍增时间约 38-48 小时,常规培养条件下可稳定传代 50 代以上,且能长期维持膀胱癌的恶性表型,具备显著的侵袭与迁移能力,在 Transwell 实验中可高效穿透基质胶,模拟体内膀胱癌侵袭膀胱壁的过程。

分子表型上,该细胞高表达膀胱癌相关标志物,如细胞角蛋白 20(CK20)、尿ji酶型纤溶酶原激活剂(uPA),同时表达与膀胱癌进展相关的蛋白(如基质金属蛋白酶 - 9,MMP-9),低表达上皮钙黏蛋白(E-cadherin)(与肿瘤上皮 - 间质转化相关);染色体核型呈亚二倍体,存在特定染色体片段异常(如 9 号染色体缺失),与临床肌层浸润性膀胱癌患者肿瘤组织的分子特征高度相似,为膀胱癌特异性研究提供可靠依据。

二、体外培养关键条件

J82 膀胱癌细胞的体外培养需精准调控环境与营养,以维持其贴壁特性与恶性表型:培养基选择上,shou选含高糖(4.5g/L D - 葡萄糖)的 RPMI-1640 培养基,需添加 10%-12% 胎牛血清(FBS)提供生长必需的营养因子,可补充 1% 谷an酰胺(若培养基未预添加)维持细胞代谢,培养基 pH 值需控制在 7.2-7.4,渗透压维持在 280-300 mOsm/kg;培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度,CO₂浓度波动≤±0.3%,温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降,出现大量悬浮死亡。

传代管理是培养核心:当细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代,操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次,去除残留血清与代谢废物,加入含 EDTA 的细胞消化液(0.25% 胰dan白酶 - EDTA),37℃孵育 2-3 分钟至细胞间隙增大、形态变圆,加入含血清的培养基终止消化,轻柔吹打形成单细胞悬液,按 1:4-1:6 比例接种至新培养瓶;需避免消化过度损伤细胞,传代后 24 小时内不移动培养瓶,确保细胞稳定贴壁。此外,细胞对血清质量敏感,需选用低内毒素(≤10 EU/mL)、批次间一致性高的 FBS,劣质血清会导致细胞形态异常、增殖速率下降 35% 以上,甚至诱发凋亡。

三、核心科研应用领域

依托与临床膀胱癌的高度相似性,J82 膀胱癌细胞在科研领域价值显著:

  1. 膀胱癌发病机制研究:可用于解析膀胱癌发生发展机制,如探索 9 号染色体缺失相关基因(如 CDKN2A)失活、PI3K/Akt 信号通路异常激活对细胞恶性增殖的影响,研究肿瘤微环境(如膀胱间质细胞、炎症因子)对细胞侵袭转移的调控作用,挖掘疾病诊断标志物与治疗靶点;

  1. 抗肿瘤药物筛选与评估:作为膀胱癌靶细胞模型,可用于检测临床常用抗肿瘤药物的抑瘤活性,通过 CCK-8 法、克隆形成实验测定药物半数抑制浓度(IC₅₀),结合流式细胞术分析药物诱导的细胞凋亡与周期阻滞,评估药物疗效;

  1. 靶向药物研发:针对膀胱癌高表达的 uPA、MMP-9 等靶点,可用于筛选靶向抑制剂或抗体药物偶联物(ADC),评估药物对靶点的结合能力及对细胞增殖、侵袭的抑制效果,为靶向治疗策略优化提供实验依据;

  1. 耐药机制研究:可通过体外逐步加药诱导构建药物耐药细胞株(如shun铂耐药株),对比耐药株与亲本株的基因、蛋白表达差异,分析耐药相关分子(如 ABC 转运蛋白、DNA 修复蛋白)的作用,为临床克服膀胱癌耐药提供理论支持。

四、质量控制与使用注意事项

合格的 J82 膀胱癌细胞需通过严格质控:细胞活力≥90%(台盼蓝染色),无细菌、真菌、支原体污染(支原体 PCR 阴性);免疫表型符合 CK20⁺uPA⁺MMP-9⁺特征;染色体核型与标准亚二倍体一致,增殖速率稳定(倍增时间 38-48 小时)。

使用时需注意:传代次数控制在 50 代内,超代次可能导致细胞分子表型改变、侵袭能力减弱;冻存用含 10% DMSO、20% FBS 的 RPMI-1640 冻存液,梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存),复苏后快速接种预热培养基,静置 48 小时贴壁后再换液;开展药物实验需确保细胞处于对数生长期,每组设 3 个复孔,减少误差,保证结果可靠性。


 

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