MMY-S2大鼠耳蝠皮肤细胞，贴壁生长，具上皮细胞特征，是蝙蝠生理研究、病毒宿主机制及跨物种疾病传播研究的特色实验模型。

MMY-S2大鼠耳蝠皮肤细胞

MMY-S2大鼠耳蝠皮肤细胞，具夜行性、群居性等典型蝙蝠生物学特征）的皮肤组织中分离纯化并建立的永生化上皮细胞系。因保留蝙蝠皮肤上皮细胞的原始生理特性 —— 具典型上皮细胞形态、稳定贴壁生长能力，且能模拟蝙蝠作为多种病毒天然宿主的细胞应答机制，成为蝙蝠生理学研究、病毒宿主互作机制探索及跨物种疾病传播研究的特色实验模型，填bu了蝙蝠来源细胞系在相关领域研究中的空白，为解析蝙蝠独特的生理适应与病毒耐受机制提供了标准化工具。

一、核心生物学特性

MMY-S2 细胞具皮肤上皮细胞的典型形态，在倒置显微镜下观察为多边形或不规则铺路石状，细胞质饱满、呈透亮状，细胞核为圆形或椭圆形、位于细胞中央，细胞排列紧密、呈单层贴壁生长，融合后形成连续的细胞单层，无重叠生长现象，与体内大鼠耳蝠皮肤上皮细胞的形态高度一致。该细胞稳定表达上皮细胞特异性标志物：细胞角蛋白 18（CK18，上皮细胞骨架核心成分）、紧密连接蛋白 occludin（参与上皮细胞间屏障功能构建），同时表达蝙蝠皮肤细胞te有的表面糖蛋白（如某些与病毒结合相关的受体蛋白），不表达成纤维细胞标志物波形蛋白（Vimentin）及内皮细胞标志物 CD31，确保其上皮细胞的纯度与物种特异性。

MMY-S2 细胞的增殖能力稳定，在标准培养条件下，种群倍增时间约为 36-48 小时，较哺乳动物常用上皮细胞系（如人皮肤上皮细胞系）增殖速率稍慢，这与蝙蝠细胞整体代谢速率特性一致。细胞对培养环境适应性较强，在贴壁生长过程中，可自然形成上皮细胞te有的 “细胞间连接"，模拟皮肤上皮组织的屏障功能，为研究蝙蝠皮肤的生理保护机制提供体外模型。此外，作为蝙蝠来源细胞，MMY-S2 细胞具独特的病毒宿主特性 —— 对多种蝙蝠携带的病毒（如部分冠状病毒、副黏病毒）具一定的易感性，病毒感染后可出现典型的细胞病变效应（如细胞圆缩、聚集成团），且能支持病毒的初步复制，这一特性使其成为研究蝙蝠与病毒共生机制的关键工具。

MMY-S2 细胞保留大鼠耳蝠细胞的部分遗传特征，核型稳定（符合蝙蝠物种的染色体数目与形态），未出现明显的染色体畸变或缺失，确保其在长期传代过程中维持蝙蝠细胞的生物学特性。代谢方面，细胞具蝙蝠细胞te有的低代谢速率特征，对葡萄糖的消耗速率较小鼠、人源细胞低约 20%-30%，这与蝙蝠适应飞行的能量代谢调控机制相关，为研究蝙蝠独特的代谢适应策略提供了体外研究对象。

二、主要研究应用场景

MMY-S2 细胞是解析蝙蝠皮肤生理功能与适应机制的重要模型。例如，利用该细胞研究蝙蝠皮肤的屏障功能 —— 通过检测细胞单层的跨上皮电阻值（TEER），分析紧密连接蛋白 occludin 的表达与分布，可揭示蝙蝠皮肤如何在飞行过程中抵御外界环境刺激（如气流、微生物）；同时，通过对比 MMY-S2 细胞与其他哺乳动物上皮细胞的代谢差异，探索蝙蝠低代谢速率与抗氧化能力的关联，如检测细胞内谷胱gan肽（GSH）含量与超氧化物歧化酶（SOD）活性，发现其抗氧化物质含量显著高于小鼠上皮细胞，为理解蝙蝠长寿与疾病耐受机制提供线索。

因具蝙蝠细胞的病毒易感性，MMY-S2 细胞广泛应用于蝙蝠携带病毒的宿主互作机制研究。例如，在冠状病毒研究中，将蝙蝠来源的冠状病毒（如某些 β 属冠状病毒）接种 MMY-S2 细胞，通过免疫荧光法观察病毒刺突蛋白（S 蛋白）与细胞表面受体的结合过程，分析病毒入侵细胞的关键步骤；同时，检测病毒感染后细胞的先天免疫应答（如 IFN-β、ISG 基因的表达水平），发现 MMY-S2 细胞的先天免疫反应较人源细胞更温和，揭示蝙蝠可能通过调控免疫应答强度实现与病毒的共生，为理解跨物种病毒传播的分子机制提供实验依据。

MMY-S2 细胞也用于蝙蝠相关跨物种疾病传播的风险评估。通过构建 “MMY-S2 细胞 - 其他哺乳动物细胞" 的共培养模型，模拟蝙蝠与人类、家畜等物种的细胞接触场景，检测病毒在不同细胞间的传播效率；例如，研究某蝙蝠携带病毒能否通过 MMY-S2 细胞传播至人肺上皮细胞（如 A549 细胞），并分析病毒基因组是否发生突变，为预测潜在的跨物种传播风险、制定疾病防控策略提供数据支持。

三、细胞培养关键要点

MMY-S2 细胞需使用含高糖（4.5g/L）的 DMEM/F12 混合培养基（1:1 比例），该培养基营养成分均衡，可满足蝙蝠细胞低代谢速率下的营养需求；需添加 15%-20% 胎牛血清（FBS，选择低内毒素、批次稳定的产品，避免刺激细胞）、1% 非必需氨基酸（维持上皮细胞形态与功能）、1% 抗菌制剂（预防细菌污染）。培养基 pH 需严格控制在 7.2-7.4，使用前在 37℃水浴锅中预热至室温，避免低温刺激导致细胞应激，影响病毒易感性。

细胞需置于 37℃、5% CO₂、湿度 95% 以上的恒温培养箱中培养：37℃为细胞代谢与生长的最适温度，可维持上皮细胞的正常形态；5% CO₂通过调节培养基中碳酸氢盐平衡维持 pH 稳定，避免 pH 异常导致细胞脱落；95% 湿度可防止培养基蒸发导致渗透压升高，影响细胞贴壁。由于细胞贴壁依赖性较强，培养皿需提前用 0.1% 明胶溶液室温包被 30 分钟，模拟体内细胞外基质环境，促进细胞贴壁与铺展，提高细胞存活率。

传代时机选择细胞融合度达到 80%-90% 时（融合度过高易导致细胞间连接紧密，消化困难）：先用无菌 PBS 轻轻洗涤细胞 2 次，去除残留血清与代谢废物；加入适量细胞消化液，37℃孵育 2-3 分钟（蝙蝠上皮细胞对消化液敏感性较低，需延长孵育时间，观察细胞边缘收缩、间隙增大后终止）；加入含血清的培养基中和消化液，轻柔吹打细胞制成单细胞悬液（避免剧烈吹打导致细胞损伤）；按 1:2-1:3 比例接种到明胶包被的新培养皿，加入新鲜培养基后放回培养箱。

冻存需选用对数生长期且活力良好的细胞（活率≥90%），冻存液为 90% FBS+10% DMSO（DMSO 需缓慢加入，避免细胞渗透压骤变）；将细胞悬液与冻存液按 1:1 混合均匀，分装至冻存管并标注信息；遵循梯度降温程序：4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存。复苏时，冻存管从液氮取出后快速放入 37℃水浴融化（时间不超过 1.5 分钟），加入 5 倍体积预热培养基，1000rpm 离心 5 分钟去除 DMSO，用新鲜培养基重悬后接种到明胶包被的培养皿，复苏后 48 小时内不换液，让细胞充分贴壁，提高存活率。

四、实验使用注意事项