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JeKo-1人套细胞淋巴瘤细胞
产品简介:

JeKo-1人套细胞淋巴瘤细胞源自患者外周血,悬浮生长,携带 t (11;14) 易位,高表达 Cyclin D1,可用于淋巴瘤机制研究与药物筛选。

产品型号:试剂盒

更新时间:2025-11-10

厂商性质:代理商

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产品介绍

JeKo-1人套细胞淋巴瘤细胞

一、细胞基本生物学特性

JeKo-1人套细胞淋巴瘤细胞是从人套细胞淋巴瘤患者外周血中分离建立的恶性淋巴细胞模型,因完整保留套细胞淋巴瘤的典型病理特征与分子表型,成为该疾病机制研究、药物研发的重要体外工具,尤其在探索染色体异常相关致病机制中应用广泛。

形态上,该细胞呈圆形或不规则淋巴样形态,直径约 10-14μm,胞质少而透明,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁不明显,体外培养以悬浮生长为主,部分细胞会轻微聚集形成小团,无贴壁现象与接触抑制特性。生长特性方面,其增殖速率中等,倍增时间约 48-60 小时,常规培养条件下可稳定传代,且能在体外长期维持恶性表型;同时具有一定的迁移能力,在 Transwell 迁移实验中可通过微孔膜,模拟体内淋巴瘤细胞的扩散过程。分子特征上,JeKo-1 细胞携带套细胞淋巴瘤标志性的 t (11;14)(q13;q32) 染色体易位,导致 Cyclin D1 基因过度表达,这也是其核心分子标志物;此外,还高表达 CD5、CD19、CD20 等 B 淋巴细胞表面标志物,低表达 CD23,与临床套细胞淋巴瘤患者的免疫表型高度一致,为疾病特异性研究提供了可靠模型。

二、体外培养关键条件

JeKo-1 人套细胞淋巴瘤细胞的体外培养需精准控制环境与营养条件,以维持其悬浮生长特性与分子稳定性:培养基选择上,shou选 RPMI-1640 培养基,需添加 10%-15% 胎牛血清(FBS)以提供生长必需的营养因子,同时可补充 1% 谷an酰胺(若培养基未预添加)维持细胞代谢,培养基 pH 值需严格控制在 7.2-7.4,渗透压维持在 280-300 mOsm/kg;培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度,培养箱内 CO₂浓度波动需≤±0.5%,温度偏差超过 ±1℃会导致细胞活力下降,出现大量凋亡。

传代与密度管理是培养核心:细胞日常维持密度需控制在 5×10⁵-1×10⁶ cells/mL,当密度达到 2×10⁶ cells/mL 时需及时传代,传代比例通常为 1:4-1:6,操作时无需消化,直接取对数生长期细胞悬液,按比例加入新鲜培养基即可;需注意避免细胞密度过低(低于 3×10⁵ cells/mL),否则会导致细胞增殖停滞,甚至出现群体凋亡。此外,该细胞对血清质量极为敏感,需选用低内毒素(≤10 EU/mL)、批次间一致性高的胎牛血清,劣质血清会导致 Cyclin D1 表达水平异常,影响实验结果的可靠性。

三、核心科研应用领域

凭借与临床套细胞淋巴瘤的高度契合性,JeKo-1 细胞在血液系统肿瘤研究领域应用广泛:

  1. 套细胞淋巴瘤发病机制研究:因携带标志性 t (11;14) 易位,可用于解析 Cyclin D1 过度表达对细胞周期调控的影响,探索 Notch、NF-κB 等信号通路异常在疾病发生、发展中的作用,同时可研究微小 RNA(miRNA)对淋巴瘤细胞恶性表型的调控机制;

  1. 抗肿瘤药物筛选与评估:作为套细胞淋巴瘤的特异性靶细胞,可用于检测硼ti佐米、伊布替尼等临床常用药物的抑瘤活性,通过 CCK-8 法、Annexin V/PI 双染法评估药物对细胞增殖的抑制效果与诱导凋亡能力,测定药物半数抑制浓度(IC₅₀);

  1. 靶向药物研发:针对 Cyclin D1、CD20 等套细胞淋巴瘤特异性靶点,可用于筛选靶向抑制剂或抗体药物偶联物(ADC),评估药物对靶点的结合能力及对细胞恶性表型的抑制作用,为靶向治疗策略优化提供实验依据;

  1. 耐药机制研究:可通过体外诱导构建药物耐药细胞株,对比耐药株与亲本株的基因表达差异、信号通路变化,挖掘耐药相关基因与分子标志物,为临床克服套细胞淋巴瘤耐药提供理论支持。

四、质量控制与使用注意事项

合格的 JeKo-1 人套细胞淋巴瘤细胞需通过严格质控:细胞活力需≥92%(台盼蓝染色法检测),无细菌、真菌、支原体污染(支原体 PCR 检测为阴性);免疫表型需符合 CD5⁺CD19⁺CD20⁺CD23⁻特征,Cyclin D1 表达阳性;染色体核型需检测到 t (11;14)(q13;q32) 易位,增殖速率稳定(倍增时间 48-60 小时)。

使用时需注意:传代次数建议控制在 50 代以内,超过上限可能导致染色体易位比例下降、Cyclin D1 表达减弱;细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 RPMI-1640 冻存液,采用梯度降温法(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮保存),复苏后需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化,离心去除冻存液后接种至新鲜培养基,静置培养 24 小时待细胞恢复活性后再开展实验;进行药物筛选实验时,需确保细胞处于对数生长期,且每组设置 3 个复孔,以减少实验误差。


 

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