CHO-K1中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)

CHO-K1中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)，是从原始CHO细胞系中经克隆纯化获得的均一性细胞亚系，因具备更稳定的遗传背景与更高的外源基因表达效率，成为生物制药与基因工程研究的优选模型。其继承了CHO细胞的核心优势，同时在细胞均一性、培养稳定性上显著提升，为重组蛋白高效生产、基因功能精准验证提供了可靠载体，在生物制药工业及基础科研中应用广泛。

CHO-K1细胞的核心优势体现为“高均一性+高效表达特性"。细胞形态呈典型上皮样，多为规则多边形，胞质均匀丰富，细胞核大而居中，核仁清晰，相较于原始CHO细胞，细胞形态更均一，贴壁生长时排列紧密有序，也可适应高密度悬浮培养。遗传学上为稳定亚二倍体核型，DHFR基因功能正常，通过代谢选择标记可高效筛选高表达细胞株，其完善的蛋白翻译后修饰系统能精准完成糖基化、磷酸化等修饰，保障重组蛋白活性。该细胞内源性蛋白表达极低，无病毒污染风险，生物安全性优异。增殖能力强劲，贴壁培养倍增周期约18-22小时，悬浮培养可达12-16小时，传代50代以上仍能维持稳定的生长特性与蛋白表达能力。

标准化培养与保存是发挥CHO-K1细胞优势的关键。贴壁培养推荐使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清与1%非必需氨基酸；悬浮培养需采用专用无血清培养基，补充重组胰岛素、转铁蛋白及微量元素，满足高密度生长需求。培养环境控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度，最佳pH值7.2-7.4，需定期监测葡萄糖与乳酸浓度，避免代谢产物积累。贴壁培养细胞融合度达85%-90%时传代，PBS冲洗2次后加解离液孵育2分钟，血清终止后按1:5-1:6比例接种；悬浮培养细胞密度达6×10^6-1.2×10^7个/mL时，按1:3稀释传代。冻存用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的冻存液，细胞密度调至2.5×10^7个/mL，梯度降温后存液氮；复苏时37℃快速解冻，离心去DMSO后用新鲜培养基重悬，成活率超96%，表达特性稳定。

CHO-K1细胞的应用价值聚焦于高效蛋白生产、基因工程及药物研发。生物制药领域，其因细胞均一性高，成为单克隆抗体（如利妥xi单抗）、重组激素及疫苗的核心生产细胞，通过基因工程改造可实现蛋白产量提升3-5倍，支撑全球近60%的重组蛋白药物生产。基因工程研究中，常作为外源基因表达的模式细胞，用于蛋白结构解析、蛋白相互作用验证及信号通路研究，其稳定的遗传背景可降低实验误差。药物研发方面，可构建稳定表达GPCR、离子通道等靶点的细胞株，用于高通量药物筛选与活性验证，也可用于药物代谢与毒性评价。此外，在生物工艺优化中不ke或缺，如用于无血清培养基配方开发、生物反应器参数优化等，通过提升细胞培养密度与蛋白表达量，显著降低药物生产成本，是生物制药从研发到产业化的核心支撑细胞。