
产品型号:试剂盒
更新时间:2025-11-10
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JH-2人纤维肉瘤细胞
一、细胞基本生物学特性
JH-2人纤维肉瘤细胞是从人类纤维肉瘤组织中分离建立的恶性肿瘤细胞模型,主要源自成人四肢深部软组织纤维肉瘤样本,因完整保留纤维肉瘤的典型病理特征与恶性生物学行为,成为软组织肉瘤机制研究、药物研发的核心体外工具。
形态上,该细胞呈典型梭形或纺锤形,胞体细长,胞质丰富,细胞核呈椭圆形且居中,体外培养以贴壁生长为主,常呈放射状或漩涡状排列,具备恶性肿瘤细胞的典型形态(核仁明显、核质比增高)。生长特性方面,其增殖活性较强,倍增时间约 36-48 小时,无接触抑制现象,细胞融合度达 80%-90% 时仍可增殖并形成堆积;同时具有一定侵袭能力,在 Transwell 实验中可穿透基质胶,模拟体内肿瘤细胞侵袭转移过程。分子特征上,高表达纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)等间叶组织标志物,低表达 CK18 等上皮标志物,染色体核型为亚二倍体,存在多个片段缺失与易位,与临床纤维肉瘤患者染色体异常高度吻合。
二、体外培养关键条件
JH-2 人纤维肉瘤细胞的体外培养需精准调控环境与营养,以维持其贴壁特性与恶性表型:培养基shou选含 4.5g/L D - 葡萄糖的高糖 DMEM,添加 10%-12% 胎牛血清(FBS)提供营养因子,可补充 1% 非必需氨基酸(NEAA)提升活性,培养基 pH 需控制在 7.2-7.4,渗透压维持 290-310 mOsm/kg;培养环境需稳定在 37℃、5% CO₂及饱和湿度,CO₂浓度波动≤±0.3%,温度偏差超 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降、大量悬浮死亡。
传代管理是培养核心:细胞融合度达 70%-80% 时需传代,操作前用无菌 PBS 清洗 2 次去残留血清,加入含 EDTA 的细胞消化液,37℃孵育 2-3 分钟至细胞变圆脱落,加血清培养基终止消化,吹打为单细胞悬液后按 1:3-1:5 比例接种;需避免消化过度,传代密度不低于 2×10⁴ cells/cm²,低密度会延长贴壁时间。此外,细胞对血清质量敏感,需选低内毒素(≤10 EU/mL)、批次稳定的 FBS,劣质血清会导致细胞形态异常、增殖速率下降 50% 以上。
三、核心科研应用领域
依托与临床纤维肉瘤的高度相似性,JH-2 人纤维肉瘤细胞在软组织肉瘤研究中应用广泛:
发病机制研究:可解析间叶组织恶性转化机制,如探索 TP53 基因突变、Rb 信号通路异常对纤维肉瘤发生的影响,还能研究肿瘤微环境(成纤维细胞、细胞因子)对细胞增殖、侵袭的调控作用;
药物筛选与评估:作为靶细胞模型,可检测临床常用抗肿瘤药物的抑瘤活性,通过 CCK-8 法、克隆形成实验测药物半数抑制浓度(IC₅₀),结合流式细胞术分析药物诱导的细胞凋亡与周期阻滞;
靶向药物研发:针对纤维肉瘤高表达的 PDGFRβ、FGFR1 等靶点,筛选靶向抑制剂,评估药物对细胞增殖、侵袭的抑制效果,为靶向治疗提供实验依据;
侵袭转移研究:利用体外侵袭能力,通过 Transwell、划痕愈合实验研究基质金属蛋白酶(MMPs)、整合素在肿瘤侵袭转移中的作用,还可构建裸鼠皮下移植瘤模型,模拟体内肿瘤生长转移。
四、质量控制与使用注意事项
合格的 JH-2 人纤维肉瘤细胞需通过严格质控:细胞活力≥90%(台盼蓝染色),无细菌、真菌、支原体污染(支原体 PCR 阴性);免疫表型符合 Vimentin⁺、FN⁺、CK18⁻;染色体核型与标准亚二倍体一致,增殖速率稳定(倍增时间 36-48 小时)。
使用时需注意:传代次数控制在 40 代内,超代次可能导致细胞侵袭能力减弱、标志物表达异常;冻存用含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM 冻存液,梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存),复苏后快速接种预热培养基,静置 48 小时贴壁后再换液;开展侵袭实验需确保细胞处于对数生长期,保证结果重复性。
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