CHO中国仓鼠卵巢细胞

CHO中国仓鼠卵巢细胞源于1957年从成年中国仓鼠卵巢组织中分离的原代细胞，经体外培养驯化建立为永生性细胞系。作为生物制药与分子生物学研究的“明星细胞"，其具备高效外源蛋白表达能力、稳定的遗传背景及良好的培养适应性，为重组蛋白药物生产、基因功能验证提供了高效实验载体，在生物制药工业与基础科研领域应用极为广泛。

CHO细胞的核心生物学特性集中体现为“高蛋白表达潜能+优良培养特性"。细胞形态呈上皮样，多为多边形或短梭形，胞质丰富，细胞核大而圆，核仁明显，体外培养可适应贴壁或悬浮生长模式，工业生产中多采用悬浮培养以提高细胞密度。遗传学上，其为亚二倍体核型，部分基因缺陷（如DHFR基因）可用于筛选高表达细胞株，同时具备完善的蛋白翻译后修饰系统，能对重组蛋白进行正确的糖基化、磷酸化等修饰，确保蛋白活性与天然蛋白一致。免疫表型鉴定显示，该细胞低表达内源性抗体，减少外源蛋白纯化干扰，且不表达病毒相关致病因子，生物安全性高。增殖性能优异，贴壁培养倍增周期约18-24小时，悬浮培养倍增周期可缩短至12-18小时，传代稳定性强，长期培养仍能维持外源蛋白表达能力。

标准化的培养与保存流程是保障CHO细胞蛋白表达能力的关键。贴壁培养推荐使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清；悬浮培养则采用无血清培养基，补充重组胰岛素、转铁蛋白等营养因子，培养环境控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度。该细胞对pH值敏感，最佳生长pH为7.2-7.4，贴壁培养时细胞融合度达80%-90%传代，用PBS冲洗后加解离液孵育2-3分钟，血清终止后按1:4-1:6接种；悬浮培养当细胞密度达5×10^6-1×10^7个/mL时，按1:3比例稀释传代。冻存用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的冻存液，细胞密度调至2×10^7个/mL，梯度降温后存液氮；复苏时37℃快速解冻，离心去DMSO后重悬接种，成活率超95%，蛋白表达能力稳定。

CHO细胞的科研应用价值聚焦于生物制药、基因工程及蛋白研究三大方向。在生物制药领域，其是全球重组蛋白药物生产的shou选细胞系，用于生产单克隆抗体（如赫赛汀）、细胞因子（如EPO）、疫苗等，凭借高效表达与正确修饰能力，支撑了全球70%以上的重组蛋白药物生产。在基因工程研究中，可通过基因编辑技术构建稳定表达外源基因的细胞株，用于蛋白结构解析、蛋白相互作用研究及信号通路分析。在蛋白功能研究中，其可高效表达重组蛋白，为酶活性测定、抗体开发提供足量蛋白原料。此外，CHO细胞还用于药物筛选模型构建，如基于其构建GPCR稳定表达细胞株，筛选靶向药物；同时在生物反应器优化、无血清培养基开发等生物工艺研究中不ke或缺，例如通过优化培养条件提高重组抗体产量，降低药物生产成本，是连接基础科研与工业生产的核心桥梁。