Cl.Ly1+2-/9小鼠T淋巴细胞

Cl.Ly1+2-/9小鼠T淋巴细胞是从BALB/c小鼠脾脏中分离，经克隆化培养获得的特异性T细胞亚系，其表型特征为Ly1（CD5）阳性、Ly2（CD8）阴性，属于CD4+辅助性T细胞（Th细胞）范畴。作为研究T细胞免疫功能的经典模型，该细胞系保留了CD4+T细胞的核心免疫属性，兼具稳定的增殖活性与明确的细胞因子分泌特征，为解析T细胞活化机制、免疫应答调控及相关疾病病理过程提供了精准实验载体，在基础免疫学与临床免疫研究中应用广泛。

Cl.Ly1+2-/9细胞的生物学特性以“明确T细胞亚群表型+完整免疫功能"为核心。细胞形态呈典型淋巴细胞样，多为圆形或类圆形，胞质少而透明，细胞核大且呈圆形，核仁清晰可见，体外培养以悬浮生长为主，部分细胞在活化状态下可呈现轻微贴壁现象，常形成直径30-80μm的松散细胞团。免疫表型鉴定显示，除核心标志物Ly1+Ly2-外，该细胞高表达T细胞受体（TCRαβ）、CD3分子及CD4辅助受体，同时表达共刺激分子CD28，符合成熟CD4+T细胞的表型特征。功能学研究证实，该细胞经抗原或丝裂原刺激后，可高效分泌IL-2、IFN-γ等Th1型细胞因子，具备辅助B细胞增殖分化及激活细胞毒性T细胞的能力。遗传学上，细胞保留小鼠正常核型，无恶性转化特征，传代至30代以内仍能维持稳定的免疫表型与功能，倍增周期约为48-60小时。

规范化的培养与保存流程是维持Cl.Ly1+2-/9细胞免疫功能的关键。体外培养推荐使用RPMI1640wan全培养基，添加10%热灭活胎牛血清、50μmol/L β-巯基乙醇、2mmol/L谷an酰胺及100U/mL双抗，为维持细胞活性可额外补充10U/mL重组小鼠IL-2，培养环境严格控制为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度。细胞对营养供应敏感，当密度达到5×10^5-2×10^6个/mL时需及时传代，传代时无需消化处理，直接将细胞悬液按1:2-1:3比例接种至新鲜培养基即可。冻存前需收集对数生长期细胞，采用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的专用冻存液，将细胞密度调整为5×10^6个/mL，经4℃静置30分钟、-20℃冷冻2小时、-80℃过夜梯度降温后，转入液氮长期保存；复苏时快速置于37℃水浴解冻，离心去除DMSO后用含高浓度IL-2的培养基重悬，复苏成活率可达85%以上，免疫功能保留完整。

Cl.Ly1+2-/9细胞的科研应用价值贯穿免疫机制研究、疾病模型构建及免疫疗法开发多个领域。在免疫机制研究中，可用于解析CD4+T细胞活化的信号通路（如TCR-CD3介导的NF-κB通路），探究共刺激分子CD28与CTLA-4的调控平衡，及细胞因子网络对T细胞分化的影响，为自身免疫病、免疫缺陷病的发病机理研究提供直接实验依据。在疾病模型构建中，该细胞系可用于建立自身免疫性脑脊髓炎（EAE）、过敏性哮喘等小鼠模型，通过过继转移实验验证CD4+T细胞在疾病发生发展中的核心作用。在免疫疗法开发领域，其可用于筛选免疫调节剂，评估中药单体、小分子化合物对T细胞增殖及细胞因子分泌的调控作用，同时为肿瘤免yi治疗研究提供工具，如探究其与CAR-T细胞的协同作用及对肿瘤微环境的改善效果。此外，还可用于免疫相关基因功能验证，通过基因编辑技术调控IL-2受体表达，观察其对T细胞活化增殖的影响，为开发新型免yi治疗靶点提供实验基础，是免疫学研究中兼具特异性与稳定性的核心材料。