
产品型号:试剂盒
更新时间:2025-10-30
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MPC-11小鼠浆细胞瘤
MPC-11小鼠浆细胞瘤,MPC-11 是从 BALB/c 小鼠自发形成的浆细胞瘤中分离纯化并建立的永生化肿瘤细胞系,因精准复刻体内浆细胞瘤的形态特征、功能属性及分子表达谱 —— 具典型浆细胞表型、稳定分泌免疫球蛋白且保留肿瘤细胞恶性生物学行为,成为研究浆细胞分化机制、多发性骨髓瘤病理进程及抗肿瘤药物筛选的核心实验模型,为解析浆细胞相关疾病的发病机制与治疗策略提供了关键工具。
一、核心生物学特性
形态与表型特征
MPC-11 细胞具浆细胞瘤的典型形态,在倒置显微镜下观察为圆形或类圆形,细胞质丰富且呈嗜碱性(因富含粗面内质网,参与免疫球蛋白合成),细胞核呈圆形或椭圆形、偏居于细胞一侧,核仁明显(1-2 个),核质比高,与体内浆细胞瘤细胞的形态高度一致。该细胞稳定表达浆细胞特异性标志物:CD138( Syndecan-1,浆细胞表面核心标志物,参与细胞黏附与信号传递)、BCMA( B 细胞成熟抗原,浆细胞存活关键受体)、IRF4(干扰素调节因子 4,调控浆细胞分化与功能),同时表达免疫球蛋白重链与轻链(可分泌 IgG2b 型免疫球蛋白),不表达 B 细胞早期标志物 CD19 及 T 细胞标志物 CD3,确保其浆细胞瘤细胞的纯度与特异性。
功能特性与恶性特征
MPC-11 细胞的核心功能是稳定分泌免疫球蛋白—— 在标准培养条件下,细胞可持续分泌 IgG2b 型免疫球蛋白,分泌量约为 5-10μg/10⁶细胞 / 24 小时,通过 ELISA 或免疫印迹法可便捷检测,这一特性使其成为研究免疫球蛋白合成、分泌调控机制及抗体工程的理想模型。同时,细胞具明显的肿瘤细胞恶性特征:一是无限增殖能力,种群倍增时间约为 24-36 小时,传代后仍能维持稳定增殖活性;二是锚着非依赖性生长,可在软琼脂培养基中形成明显的细胞集落,体现其体外恶性转化能力;三是体内致瘤性,将细胞接种于免疫缺陷裸鼠或同源 BALB/c 小鼠腹腔或皮下,可形成实体瘤或腹水瘤,模拟体内浆细胞瘤的生长与转移过程。
生长动力学
MPC-11 细胞为wan全悬浮生长细胞系,无需贴附基质即可生长,细胞均匀分散于培养基中,少量细胞可能形成松散小聚团(不影响活性)。在标准培养条件下,细胞密度达到 2×10⁵-5×10⁵个 /mL 时进入对数生长期,此时细胞形态均一、代谢活跃、免疫球蛋白分泌稳定,是开展药物处理、基因编辑、功能实验的最佳时期;若细胞密度过高(超过 2×10⁶个 /mL),易出现营养匮乏、代谢废物堆积,导致细胞活力下降、凋亡率升高,因此需及时传代,传代比例以 1:3-1:5 为宜,每 2-3 天传代一次。
二、主要研究应用场景
浆细胞生物学机制研究
MPC-11 细胞是解析浆细胞分化、免疫球蛋白合成与分泌机制的核心模型。例如,通过 RNA 干扰技术下调细胞中 IRF4 的表达,可观察到 CD138、BCMA 等浆细胞标志物表达显著下降,免疫球蛋白分泌量减少 50% 以上,进而明确 IRF4 在浆细胞成熟与功能维持中的关键作用;此外,利用该细胞研究免疫球蛋白的加工分泌过程,发现内质网应激调节剂(如 4-PBA)可促进未正确折叠的免疫球蛋白降解,减少细胞毒性聚集,为理解浆细胞内质网功能稳态调控提供实验依据。同时,该细胞也用于研究浆细胞存活信号通路(如 BCMA/BAFF 通路),通过阻断 BCMA 受体,可观察到细胞增殖抑制、凋亡率升高,为浆细胞疾病的靶向治疗提供理论基础。
多发性骨髓瘤病理机制与药物筛选
MPC-11 细胞因与多发性骨髓瘤细胞的生物学特性高度相似,广泛应用于该疾病的病理机制研究与抗肿瘤药物筛选。在病理机制研究中,用多发性骨髓瘤相关细胞因子(如 IL-6、TNF-α)处理细胞,可模拟疾病微环境对浆细胞瘤细胞的影响,观察到细胞增殖加快、抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达上调,揭示微环境在疾病进展中的促进作用;通过高通量测序对比 MPC-11 细胞与正常浆细胞的基因表达差异,可筛选出多发性骨髓瘤相关致癌基因(如 MYC、CCND1),为疾病诊断与治疗提供潜在靶点。在药物筛选中,通过 CCK-8 法、MTT 法检测候选药物对细胞增殖的抑制效果,计算半数抑制浓度(IC50),初步评估药物活性;针对 BCMA、CD138 等靶点的抗体药物偶联物(ADC)或 CAR-T 细胞,可在 MPC-11 细胞模型中验证其杀伤效果,如检测细胞凋亡率、肿瘤体积变化,为药物临床转化提供数据支持。
免疫学实验与抗体生产
MPC-11 细胞稳定分泌 IgG2b 型免疫球蛋白的特性,使其在免疫学实验中具重要应用价值:一是作为阳性对照细胞,用于流式细胞术检测浆细胞标志物、ELISA 检测免疫球蛋白的实验体系验证;二是用于抗体纯化与应用,通过收集细胞培养上清,经蛋白 A/G 亲和层析可纯化获得 IgG2b 抗体,用于免疫印迹、免疫组化等实验的二抗或对照抗体。此外,该细胞也可用于研究免疫耐受与自身免疫疾病,通过基因改造使细胞分泌自身反应性抗体,构建自身免疫病动物模型,探索疾病发病机制。
三、细胞培养关键要点
培养基选择与配置
MPC-11 细胞常规使用 RPMI-1640 培养基进行培养,该培养基营养成分均衡,可满足细胞增殖与免疫球蛋白分泌需求;需添加 10%-15% 胎牛血清(FBS,选择低内毒素批次,避免刺激细胞过度活化)、1% 谷an酰胺(维持细胞代谢与蛋白合成)、1% 抗菌制剂(预防细菌污染)。培养基的 pH 值需严格控制在 7.2-7.4 之间,使用前需在 37℃水浴锅中预热至室温,避免低温刺激导致细胞应激,影响免疫球蛋白分泌与增殖活性。
培养环境控制
细胞需置于 37℃、5% CO₂、湿度 95% 以上的恒温培养箱中培养:37℃为细胞代谢与酶活性的最适温度,可维持免疫球蛋白合成相关酶的活性;5% CO₂通过调节培养基中碳酸氢盐的平衡,维持 pH 值稳定,避免 pH 异常影响细胞生长;95% 以上的湿度可防止培养基过度蒸发,避免渗透压改变导致细胞脱水或肿胀。培养过程中需每天观察细胞状态,轻轻摇晃培养瓶使细胞均匀分布,避免细胞沉降导致局部密度过高,同时通过台盼蓝染色法检测细胞活力(常规活率应≥85%)。
传代与冻存操作
传代时,将培养瓶中的细胞悬液轻轻吹打均匀(避免剧烈吹打损伤细胞),按 1:3-1:5 的比例转移至新的培养瓶中,加入新鲜培养基,置于培养箱中继续培养(悬浮细胞无需消化,直接分装即可)。
冻存时需选用对数生长期且活力良好的细胞(活率≥90%),采用 90% FBS+10% DMSO 的混合液作为冻存液(DMSO 可降低细胞内冰晶形成,减少冻存损伤);将细胞悬液与冻存液按 1:1 比例混合均匀,分装至冻存管中,标注细胞名称、冻存日期与代次;冻存过程需遵循梯度降温原则:4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮中长期保存(液氮温度为 - 196℃,可长期维持细胞活性与功能)。复苏时,将冻存管从液氮中取出,快速放入 37℃水浴锅中,轻轻摇晃至液体wan全融化(时间不超过 1 分钟,避免细胞长时间处于低温环境);随后将细胞悬液转移至离心管中,加入 5 倍体积的预热培养基,1000rpm 离心 5 分钟,去除 DMSO(DMSO 对细胞有一定毒性);弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞后接种到培养瓶中,复苏后 24 小时内避免换液,让细胞充分适应环境,提高存活率。
四、实验使用注意事项
MPC-11 细胞属于小鼠肿瘤细胞系,操作时需严格遵守生物安全二级(BSL-2)实验室规范,佩戴无菌手套、口罩与实验服,避免细胞接触皮肤或黏膜;实验结束后需对实验器材(如移液器、培养瓶、离心管)、台面用 75% 乙醇彻di消毒,实验废液需经灭菌处理后排放,防止细胞污染与生物安全风险。
开展药物敏感性实验或功能研究时,需使用对数生长期的细胞,确保细胞状态一致,减少实验误差;同时需设置空白对照组(仅加入培养基)、溶剂对照组(加入药物溶解所用溶剂,如 DMSO)及阳性对照组(如已知对浆细胞瘤有效的药物),排除溶剂干扰并验证实验体系的有效性。
长期培养过程中,需每传代 10-15 代通过 STR 分型检测验证细胞身份,对比细胞系标准 STR 图谱,避免细胞交叉污染(如与其他悬浮生长的肿瘤细胞系混淆);每传代 5-8 代需通过 ELISA 检测免疫球蛋白分泌量,通过流式细胞术检测 CD138、BCMA 等标志物表达,防止细胞发生遗传漂变导致功能退化(如分泌量下降、表型改变),影响实验结果的准确性。
细胞传代次数建议不超过 30 代,超过后细胞易出现增殖速率下降、免疫球蛋白分泌减少、药物敏感性改变等问题,需从液氮中复苏早期冻存的细胞(如第 5-10 代),保证实验结果的稳定性与重复性;培养过程中避免频繁更换培养基或剧烈摇晃培养瓶,防止细胞应激导致凋亡率升高。
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