K-562人慢性髓原白血病细胞源自慢性髓原白血病患者骨髓，含 Ph 染色体与 BCR-ABL 融合基因，呈悬浮生长，具多向分化潜能，培养稳定，常用于白血病机制研究、靶向药物筛选。

K-562人慢性髓原白血病细胞

K-562人慢性髓原白血病细胞是从慢性髓原白血病（CML）急变期患者骨髓样本中分离、经体外纯化培养建立的肿瘤细胞系，核心特征为携带标志性 Ph 染色体（t (9;22)(q34;q11)）及 BCR-ABL 融合基因，保留多向造血分化潜能与异常增殖能力，可在体外高度模拟 CML 的发病机制、疾病进展及对靶向药物的响应特征，是研究 CML 分子致病机制、造血分化调控、靶向药物研发及耐药机制分析的关键工具，在血液肿瘤学、细胞生物学、药理学及临床医学领域具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与形态功能特征来看，K-562 细胞的建立为 CML 研究提供了经典模型 —— 科研人员选取确诊为 CML 急变期（向红系或髓系急变）的患者骨髓样本（经伦理审批），通过密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞，利用慢性髓原白血病细胞特异性标志物（如 CD34、CD117）筛选纯化，接种于白血病细胞专用培养基中培养；历经 15-20 代传代筛选，获得形态均一、增殖稳定且保留核心遗传学特征的细胞群体，确立 K-562 人慢性髓原白血病细胞系。该细胞严格保留 CML 急变期细胞的核心特征：显微镜下呈圆形或类圆形悬浮生长，部分细胞聚集成松散小团，胞体中等大小（直径 12-18μm），胞质丰富且含大量嗜天青颗粒（瑞氏染色可见胞质呈深蓝紫色），部分细胞可见空泡（红系分化相关特征）；细胞核呈圆形或椭圆形，染色质疏松呈粗网状，核仁明显（1-3 个），部分细胞出现双核或多核（符合 CML 急变期细胞的核异型性）；免疫表型检测显示，细胞高表达造血干细胞与髓系祖细胞标志物（CD34 阳性率 90% 以上、CD117 阳性率 85% 以上、CD33 阳性率 92% 以上），同时表达红系分化相关标志物（CD71 阳性率 70%-75%、GPA 阳性率 20%-25%），与临床 CML 急变期患者的骨髓细胞表型高度一致。功能上，K-562 细胞具备独特的多向分化潜能：在不同诱导剂作用下，可分别向红系、粒系或巨核系方向分化，为 CML 造血分化紊乱机制研究提供功能学基础。

在核心生物学特性方面，K-562 细胞凭借 “遗传学特征稳定、分化潜能独特、药物响应明确" 的优势，成为 CML 研究的理想模型。其一，稳定的 Ph 染色体与 BCR-ABL 融合基因表达：该细胞的核心优势在于长期稳定携带 Ph 染色体，染色体核型分析显示 Ph 染色体阳性率达 100%，且持续高表达 BCR-ABL 融合蛋白（以 p210 亚型为主，Western blot 检测呈强阳性）；BCR-ABL 融合蛋白具有持续激活的激酶活性，可通过激活 PI3K-AKT、RAS-MAPK 等下游信号通路，驱动细胞异常增殖与抗凋亡；连续传代 90 次以上，Ph 染色体与 BCR-ABL 融合基因表达仍保持稳定，无丢失或突变现象，遗传背景纯净，为研究 BCR-ABL 融合基因的致病机制提供可靠的遗传学模型。其二，独特的多向造血分化潜能：K-562 细胞的分化功能具有显著多样性 —— 常规培养下，细胞维持未成熟造血祖细胞表型；加入红系分化诱导剂（如氯化高铁血红素）后，72-96 小时内启动红系分化，GPA（红系成熟标志物）表达从 25% 升至 80% 以上，胞质中血红蛋白合成增加，部分细胞出现典型的红细胞形态；加入粒系分化诱导剂联合 G-CSF 后，CD15（粒系成熟标志物）表达从 10% 升至 65% 以上，胞质颗粒增多，出现核分叶；加入巨核系分化诱导剂（如佛波酯）后，细胞体积增大，CD41（巨核系标志物）表达升高，部分细胞出现多核与血小板生成相关特征，这种多向分化潜能可模拟 CML 患者造血系统的异常分化状态，为造血分化调控研究提供独特模型。其三，明确的靶向药物敏感性与耐药研究价值：K-562 细胞对 CML 靶向治疗药物表现出高度敏感性，药物处理后，BCR-ABL 激酶活性被抑制（p-ABL 水平下降 90% 以上），细胞增殖抑制率达 85% 以上，48 小时凋亡率升至 60%-70%，与临床 CML 慢性期患者对该类药物的响应规律一致；同时，可通过体外诱导构建该类药物耐药株（如 BCR-ABL 基因突变型耐药株），耐药细胞中 BCR-ABL 突变率（如 T315I 突变）达 70% 以上，ABCB1 多药耐药基因表达升高 5-8 倍，为 CML 靶向治疗耐药机制研究及逆转耐药药物筛选提供理想模型。

在体外培养与维护细节上，K-562 细胞的操作需注重 “维持遗传学特征与分化潜能"。培养时，推荐使用普通培养瓶（无需包被），培养基选用 RPMI 1640+10% 胎牛血清 + 1% 抗菌试剂，pH 值控制在 7.2-7.4；细胞接种密度推荐 5×10⁴-1×10⁵ cells/mL（如 T25 培养瓶接种 5-10mL 细胞悬液），密度过低易导致细胞生长缓慢，过高则出现细胞过度聚集（需每 2 天轻轻吹打 1 次，避免密集影响分化潜能与 BCR-ABL 表达）；传代时，无需消化处理，直接取对数生长期细胞悬液，按 1:2-1:3 的比例加入新鲜培养基即可，传代间隔 2-3 天（因增殖速率较快，需及时传代避免营养耗尽）；细胞冻存需选择对数生长期细胞（确保复苏后遗传学特征与分化潜能稳定），采用含 10% DMSO 的血清冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏后存活率达 90% 以上，复苏后需培养 1-2 代，待细胞活力与 BCR-ABL 表达恢复稳定后再用于实验。

在科研与应用领域，K-562 细胞的特性使其覆盖多个关键研究方向。其一，CML 分子致病机制研究：该细胞是解析 BCR-ABL 融合基因功能的核心模型 —— 研究发现，BCR-ABL 通过持续激活 PI3K-AKT 信号通路，磷酸化下游抗凋亡蛋白 BAD（磷酸化率达 80%），抑制细胞凋亡；同时，激活 STAT5 信号通路，上调 Cyclin D1 等细胞周期相关基因表达（表达量为正常细胞的 3-4 倍），加速细胞周期进程；使用 BCR-ABL 抑制剂后，上述信号通路激活被阻断，细胞凋亡率显著升高，明确 BCR-ABL 介导的信号网络对 CML 细胞恶性表型的调控作用；此外，通过蛋白质相互作用分析，鉴定出 BCR-ABL 的关键结合蛋白（如 CRKL、GRB2），为寻找 CML 治疗新靶点提供分子依据。其二，造血分化调控研究：K-562 细胞的多向分化潜能使其成为造血分化机制研究的理想工具 —— 通过分析红系分化过程，发现氯化高铁血红素可通过激活 NRF2 信号通路，上调红系分化相关基因（如 GATA1、KLF1）表达，促进血红蛋白合成；研究粒系分化时，发现粒系分化诱导剂可通过调控相关靶基因，抑制 BCR-ABL 活性（下降 40%），解除其对粒系分化的阻滞作用；这些研究为理解 CML 患者造血分化异常的机制提供了重要线索，也为开发诱导分化治疗策略奠定基础。其三，CML 靶向药物研发与耐药研究：K-562 细胞是 CML 靶向药物研发的经典平台 —— 在新型 BCR-ABL 抑制剂筛选中，发现某化合物对耐药的 T315I 突变型 BCR-ABL 仍具有抑制活性，处理耐药 K-562 细胞后，增殖抑制率达 75% 以上，凋亡率升至 50%；在联合用药研究中，发现 BCR-ABL 抑制剂与 PI3K 抑制剂联合使用时，可协同抑制 CML 细胞生长，克服单一药物治疗后的耐药倾向，为临床优化 CML 治疗方案提供数据支持；同时，通过对耐药 K-562 细胞的基因测序，鉴定出耐药相关的新突变位点（如 E255V），为预测 CML 患者耐药风险提供分子标志物。其四，肿瘤免疫与细胞治疗研究：K-562 细胞因缺乏 MHC 分子表达，常被用作自然杀伤（NK）细胞活性检测的靶细胞 —— 通过 K-562 细胞与 NK 细胞共培养，可快速评估 NK 细胞的杀伤功能（正常 NK 细胞对 K-562 细胞的 48 小时杀伤率达 60%-70%）；在 CAR-T 细胞治疗研究中，K-562 细胞被改造为表达 CD19、CD22 等靶点的细胞系，用于检测 CAR-T 细胞的靶向杀伤效率，改造后的 K-562 细胞可被特异性 CAR-T 细胞高效杀伤（杀伤率达 85% 以上），为 CAR-T 细胞治疗的临床前评估提供重要工具。

综上，K-562 人慢性髓原白血病细胞凭借 “Ph 染色体与 BCR-ABL 融合基因稳定、多向分化潜能独特、科研适用性广泛" 的特性，成为慢性髓原白血病研究领域的 “经典标gan模型"。其在 CML 分子机制、靶向药物研发、耐药研究及细胞治疗评估等领域的应用，不仅推动了血液肿瘤学对 CML 的认知与治疗进展，更在临床转化研究中发挥关键作用，为慢性髓原白血病的精准诊疗与新型疗法开发提供重要实验依据，具有不可替代的科学价值与应用前景。