COC1/DDPCOC1细胞耐药亚株

COC1/DDPCOC1细胞耐药亚株，经逐步递增hua疗药物浓度诱导、反复筛选得到的稳定耐药亚株。作为临床卵巢癌hua疗耐药的理想模拟模型，它既延续了COC1细胞的卵巢腺癌核心属性，又进化出典型耐药表型，为解析耐药机制、开发逆转策略提供了精准工具，是卵巢癌耐药研究领域的核心细胞模型。

该耐药亚株的生物学特征以“耐药强化+恶性升级"为核心。形态上较亲本更具异型性，多呈梭形或不规则状，胞质空泡增多，细胞核增大、核仁密集，贴壁生长但排列松散，边缘侵袭伪足更突出。耐药性检测证实，其对靶向hua疗药物的半数抑制浓度（IC50）较COC1升高10倍以上，高表达ABCB1、ABCC2等ABC转运蛋白及谷胱gan肽S-转移酶（GST），强化药物外排与解毒能力。免疫表型上，CA125、HE4等卵巢癌标志物稳定表达，ER/PR受体下调，TP53突变、BRCA1低表达等致瘤特征持续存在。增殖速率略缓于亲本，倍增周期55-70小时，成瘤性稳定，裸鼠移植瘤对hua疗药物反应显著降低，wan美复现临床耐药场景。

特殊培养策略是维持该亚株耐药特性的关键。需以DMEM为基础培养基，添加10%胎牛血清及适宜浓度的对应hua疗药物进行“耐药维持"，每3-5代换用无药培养基避免毒性累积。培养环境为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度，pH7.2-7.4最佳。因贴壁紧密、连接牢固，传代前需用PBS冲洗3次除净残留药物，细胞解离液孵育延长至5-8分钟，反复吹打获单细胞悬液后按1:2-1:3接种。冻存前需在无药培养基传1代，冻存液同亲本，细胞密度1.5×10^7个/mL，梯度降温后存液氮；复苏时37℃快速解冻，离心洗涤2次，接种于含低浓度对应hua疗药物的培养基，24小时后换液，成活率约85%，耐药性稳定遗传。

COC1/DDP耐药亚株的科研价值集中于耐药机制解析与治疗方案研发。通过与COC1亲本对比，可深入探究ABCB1介导的药物外排、GST参与的解毒过程，及ERCC1等DNA修复基因高表达对hua疗药物疗效的影响，明确PI3K/Akt、MAPK等耐药通路的激活机制。作为耐药逆转剂筛选金标准，可评估中药单体、小分子化合物对耐药蛋白的调控作用，验证PARP抑制剂、Akt抑制剂与hua疗药物的协同效果。借助基因编辑构建耐药基因敲除模型，能验证ABCB1、GST的调控功能，为基因治疗提供靶点。此外，可分析其与肿瘤相关成纤维细胞的交互作用对耐药的强化效应，为制定“逆转耐药+靶向"联合方案提供支撑，是推动卵巢癌耐药研究从基础迈向临床的核心载体。