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更新时间:2025-12-04
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LS 174T [LS174T]人结直肠腺癌细胞是结直肠癌亚型研究的重要模型,以典型黏液分泌特性、微卫星不稳定(MSI-H)表型及明确免疫特征为核心,在黏液腺癌机制、免yi治疗及药物筛选研究中作用显著,为消化道肿瘤异质性研究提供可靠工具。
该细胞系源自一位58岁女性结直肠黏液腺癌患者的原发肿瘤组织,MSI-H表型与Lynch综合征高度契合,黏液分泌特性突出,是研究结直肠黏液腺癌的理想模型,填bu了普通腺癌细胞模型的不足。
形态上,细胞呈圆形或多角形,贴壁生长且部分悬浮,细胞质内充满黏液空泡,细胞核被挤压呈偏心状,核质比异常,符合黏液腺癌典型形态。染色体为非整倍体(45-53条),存在MLH1、PMS2基因缺失等畸变,为机制研究提供天然材料。
功能上,其核心是黏液分泌与MSI-H表型:高表达MUC2、MUC5AC等黏液蛋白,DNA错配修复缺陷致突变积累,肿瘤突变负荷高。细胞增殖能力中等(倍增时间约40小时),G1期比例高、凋亡率低,侵袭迁移能力较强,高表达CEA、CK20,Wnt/β-catenin、NF-κB通路异常激活。
培养需37℃、5% CO₂环境,pH维持7.2-7.4。常用RPMI-1640培养基,添加10%-15%优质胎牛血清及抗菌试剂,满足黏液合成需求,标准实验室条件即可稳定培养。
传代时用PBS轻柔洗涤贴壁细胞2次,加消化液37℃孵育4-5分钟,细胞变圆后用血清培养基终止消化,轻柔吹打制成单细胞悬液,按1:2-1:4接种,避免过度吹打破坏黏液结构。
长期培养每2天换液,密度达70%-80%时传代。定期用台盼蓝检测活性(≥90%),通过PCR验证MSI状态,免疫组化检测MUC2表达,确保细胞核心特征稳定。
1. 发病机制研究:解析MLH1缺失致MSI-H的机制,阐明黏液蛋白异常分泌与Wnt通路激活的关联,为黏液腺癌发病规律提供依据。
2. 免yi治疗研究:利用高肿瘤突变负荷特征,评估PD-1/PD-L1抑制剂的疗效,筛选免yi治疗敏感标志物,为免yi治疗策略提供数据。
3. 药物研发:筛选抑制黏液分泌及肿瘤增殖的药物,评估药物对细胞黏液合成、侵袭能力的影响,为难治性黏液腺癌治疗提供参考。
优势为黏液分泌与MSI-H表型稳定,适配黏液腺癌专项研究;肿瘤突变负荷高,是免yi治疗研究的优质模型;培养简便,适配高通量实验。局限是无法模拟微卫星稳定型肿瘤,需结合HT-29等细胞验证;缺乏体内肠道微环境,部分结果需动物模型确认。
综上,LS 174T细胞凭借黏液分泌与MSI-H的双重特性,成为结直肠癌亚型研究的重要工具。与普通腺癌细胞互补使用,其在黏液腺癌机制、免yi治疗研发中价值显著,为消化道肿瘤精准治疗提供支撑。
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