HCT-15 [HCT15]人结直肠腺癌细胞

HCT-15 [HCT15]人结直肠腺癌细胞是结直肠癌研究的特色体外模型，以典型微卫星不稳定（MSI-H）表型、固有多药耐药特性及明确遗传背景为核心，在结直肠癌耐药机制、药物敏感性及发病机制研究中作用显著，为消化道恶性肿瘤精准治疗研究提供可靠工具。

一、细胞来源与核心特征

该细胞系源自一位64岁男性结直肠腺癌患者的原发肿瘤组织，经体外分离培养建立。其MSI-H表型与遗传性非息肉病性结直肠癌（Lynch综合征）高度契合，同时具备天然耐药属性，是研究难治性结直肠癌的理想模型。

形态上，HCT-15细胞呈上皮样与梭形混合态，贴壁生长且排列松散，细胞质丰富，细胞核大而畸形，核仁明显且数量增多，核质比显著高于正常结直肠上皮细胞。染色体为非整倍体（44-50条），存在片段缺失、易位及基因扩增，其中MLH1基因缺失、KRAS基因突变明确，为机制研究提供天然材料。

功能上，其核心特征是MSI-H表型与多药耐药性，DNA错配修复功能缺陷导致基因突变积累，同时高表达P-糖蛋白等耐药相关分子。细胞增殖能力较强，倍增时间约30小时，S期细胞比例高，凋亡率低，侵袭迁移能力突出。高表达CEA、CK20等标志物，PI3K/Akt、MAPK通路异常激活，为机制研究提供明确靶点。

二、培养条件与操作

培养需控制37℃、5% CO₂环境，维持培养基pH 7.2-7.4。常用RPMI-1640培养基，添加10%-15%优质胎牛血清及广谱抗菌试剂，满足细胞代谢需求并预防污染，标准实验室条件即可稳定培养。

传代时用PBS洗涤贴壁细胞2次，加细胞消化液37℃孵育2-3分钟，待细胞边缘变圆、间隙增大后用血清培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，按1:3-1:6比例接种，避免过度吹打损伤细胞。

长期培养需每2-3天换液，细胞密度达80%-90%时及时传代。定期用台盼蓝检测活性（活细胞率≥90%），通过PCR验证MSI状态及KRAS突变，免疫印迹检测P-糖蛋白表达，确保细胞核心特征稳定。

三、核心研究应用

1. 发病机制研究：解析MLH1缺失导致的MSI-H形成机制，阐明KRAS突变与错配修复缺陷协同驱动结直肠癌进展的分子规律，为Lynch综合征研究提供依据。

2. 耐药机制研究：利用其固有耐药特性，筛选耐药相关基因及信号通路，分析P-糖蛋白介导的多药耐药机制，为开发逆转耐药的干预策略提供数据。

3. 药物研发：用于结直肠癌新型hua疗药物及靶向药物的筛选，评估药物对耐药细胞的杀伤效果，为难治性结直肠癌治疗药物研发提供参考。

四、优势与局限

优势为MSI-H表型与耐药特性稳定，适配难治性结直肠癌研究；遗传背景明确，实验针对性强；培养操作简便，适配高通量药物筛选。局限是无法模拟微卫星稳定型结直肠癌，需结合HT-29等细胞验证；缺乏体内肠道微环境，部分结果需动物模型确认；长期培养可能出现耐药性波动。

综上，HCT-15细胞凭借MSI-H表型与耐药特性的双重优势，成为结直肠癌研究的重要工具。与其他结直肠癌细胞系互补使用，其在耐药机制、精准治疗研发中价值显著，为推动消化道肿liu治疗进步提供支撑。