CRFK猫肾细胞

CRFK猫肾细胞源于新生小猫的肾脏皮质组织，是1964年由Crandell和Flea分别建立的永生性上皮细胞系。作为猫源细胞研究的标gan模型，其兼具高增殖活性、良好的病毒敏感性及遗传稳定性等优势，不仅是猫科动物疾病研究的核心工具，还在病毒学、药理学及生物制品研发领域发挥着重要作用，为跨物种生物医学研究提供了独特载体。

CRFK细胞的生物学特性集中体现为典型的肾上皮细胞属性与优异的实验适配性。细胞形态呈规则的多边形或梭形，胞质均匀丰富，细胞核呈圆形或椭圆形，核仁清晰，体外培养以贴壁生长为主，融合后形成排列紧密的单层细胞，边界清晰可辨。免疫表型鉴定显示，该细胞表达肾上皮特异性标志物细胞角蛋白19（CK19）、波形蛋白（Vimentin），同时保留肾脏细胞te有的转运体蛋白表达，明确其肾小管上皮细胞起源。遗传学方面，CRFK细胞为二倍体细胞系，长期传代后仍能维持稳定的染色体核型，无明显恶性转化特征。最为突出的特性是其广谱病毒敏感性，对猫泛白细胞减少症病毒（FPV）、猫冠状病毒（FCoV）、猫疱疹病毒1型（FHV-1）等多种猫源病毒均高度易感，且能支持病毒高效复制，这一特性使其成为猫病毒研究的shou选模型。

标准化的培养与保存流程是维持CRFK细胞活性及病毒敏感性的关键。体外培养推荐使用MEM或DMEM培养基，添加10%-15%胎牛血清提供营养支持，培养环境需严格控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱中。该细胞对培养条件适应性较强，在pH值7.2-7.4的环境中生长状态最佳，当细胞融合度达到80%-90%时进行传代。传代前先用PBS缓冲液轻柔冲洗细胞2次，加入细胞解离液孵育3-5分钟至细胞脱落，加入含血清的培养基终止解离，吹打均匀后按1:4-1:6比例接种至新培养瓶。冻存时采用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的专用冻存液，将细胞密度调整为5×10^6个/mL，经4℃（30分钟）、-20℃（2小时）、-80℃（过夜）梯度降温后转入液氮长期保存；复苏时需在37℃水浴中快速解冻，离心去除DMSO后用新鲜培养基重悬接种，复苏成活率可达90%以上，且复苏后细胞仍能保持良好的病毒敏感性。

CRFK细胞的科研应用价值覆盖猫科动物疾病研究、病毒学研究及生物制品研发等多个领域。在猫病研究中，其对猫源病毒的高敏感性使其成为病毒分离鉴定、致病机制探究的核心工具，例如通过该细胞系解析猫冠状病毒的侵袭机制及免疫逃逸策略，为猫传染性腹膜炎的防治提供理论依据。在病毒学研究中，CRFK细胞可用于跨物种病毒感染研究，探究人兽共患病毒（如流感病毒）在猫源细胞中的复制特性，为疫病防控提供跨物种研究数据。在生物制品研发领域，该细胞系是猫用疫苗生产与质量控制的关键模型，可用于疫苗病毒株的增殖、疫苗效力检测及安全性评价，保障猫用生物制品的质量与安全。此外，CRFK细胞还广泛应用于猫科动物药物筛选、肾脏生理功能研究及毒理学评估等方向，例如评估药物对猫肾脏细胞的毒性作用，为宠物临床用药提供实验依据，是兽医医学与生物医学交叉研究中不ke或缺的重要实验材料。