CTLL-2小鼠T淋巴细胞

CTLL-2小鼠T淋巴细胞是从C57BL/6小鼠的脾脏T淋巴细胞中诱导建立的细胞系，因对白细胞介素-2（IL-2）具有严格依赖性，成为免疫研究领域的经典工具细胞。自20世纪70年代建株以来，其稳定的IL-2应答特性与纯粹的T细胞属性，使其在免疫功能调控、细胞因子活性检测及抗肿瘤免疫研究中占据重要地位，为解析T细胞生物学功能提供了可靠实验载体。

CTLL-2细胞的生物学特性集中体现为典型的T细胞属性与严格的IL-2依赖性。细胞形态呈均一的圆形或类圆形，细胞核大而致密，核仁清晰可见，胞质呈弱嗜碱性，在体外培养中以纯悬浮方式生长，不发生贴壁，常形成松散的细胞团。免疫表型鉴定显示，该细胞高表达T细胞特异性标志物CD3、CD4，同时表达IL-2受体（IL-2R）的α链（CD25）与β链（CD122），而不表达B细胞标志物CD19及单核细胞标志物CD14，明确其辅助性T细胞来源。最为核心的特性是其IL-2依赖性——缺乏IL-2时细胞会停止增殖并逐渐凋亡，增殖速率与IL-2浓度在一定范围内呈正相关，这一特性使其成为IL-2活性定量检测的金标准细胞系。增殖性能上，其倍增周期约为24-36小时，传代稳定性ji强，长期培养仍能保持对IL-2的敏感性。

规范化的培养与保存流程是维持CTLL-2细胞活性及IL-2应答特性的关键。体外培养需以RPMI1640培养基为基础，添加10%胎牛血清提供营养，核心是补充50-100U/mL的重组小鼠IL-2，培养环境需严格控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱中。当细胞密度达到2×10^6-5×10^6个/mL时传代最佳，传代时无需消化处理，直接将细胞悬液按1:5比例接种至含新鲜IL-2的培养基即可。冻存时采用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的冻存液，将细胞密度调整为1×10^7个/mL，经4℃、-20℃、-80℃梯度降温后转入液氮保存；复苏时需在37℃水浴快速解冻，离心去除DMSO后接种至含足量IL-2的培养基，复苏成活率可达90%以上。

CTLL-2细胞的科研应用价值贯穿免疫研究与肿liu治疗多个领域。在细胞因子研究中，其IL-2依赖性被广泛用于IL-2活性的定量检测，通过MTT法或CCK-8法检测细胞增殖率，可精准评估样本中IL-2的生物学活性，为免疫制剂质量控制提供依据。在免疫机制研究中，可用于探究IL-2/IL-2R信号通路对T细胞增殖、分化的调控作用，解析JAK3/STAT5等下游分子的激活机制。在肿瘤免疫研究中，该细胞系是评估免疫疗法效果的重要工具，可用于验证CAR-T细胞培养上清液中IL-2的分泌水平，或研究肿瘤微环境中IL-2耗竭对T细胞功能的影响。此外，其在免疫抑制剂筛选、自身免疫病发病机制研究中也具有独特优势，例如通过检测药物对CTLL-2细胞增殖的抑制作用，筛选靶向IL-2通路的免疫调节药物。作为兼具标准化与敏感性的T细胞模型，CTLL-2细胞已成为免疫相关研究中不ke或缺的核心实验材料。