Daoy人髓母细胞瘤细胞

Daoy人髓母细胞瘤细胞是从一名4岁儿童髓母细胞瘤患者的肿瘤组织中分离建立的神经源性恶性细胞系，自1985年成功建株以来，因高度模拟临床肿瘤的生物学特征，已成为中枢神经系统肿瘤研究领域的核心实验模型。髓母细胞瘤作为儿童最常见的恶性脑肿瘤，具有恶性程度高、进展快、预后差的特点，而Daoy细胞的出现为该肿瘤的基础研究与临床转化提供了稳定可靠的实验载体，至今在发病机制探究、药物研发等方面发挥着不可替代的作用。

在生物学特性上，Daoy细胞展现出鲜明的神经外胚层起源特征。细胞形态以上皮样为主，呈多角形或梭形，胞质丰富，细胞核大而圆，核仁清晰，在体外培养中以贴壁生长为主，生长状态稳定时可形成均匀的细胞单层。免疫表型鉴定显示，该细胞高表达神经特异性烯醇化酶（NSE）、突触素（Syn）等神经源性标志物，同时表达CD56等神经细胞黏附分子，而不表达胶质纤维酸性蛋白（GFAP）等胶质细胞标志物，明确其神经元分化属性。遗传学方面，Daoy细胞存在17号染色体短臂缺失等髓母细胞瘤典型的遗传变异，与临床肿瘤样本的分子特征高度契合。增殖特性上，其倍增周期约为36-48小时，成瘤性ji强，在裸鼠颅内或皮下移植成瘤率均可达100%，模型重复性优异。

规范化的培养与保存流程是维持Daoy细胞活性及特性稳定的关键。体外培养推荐使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清、2mmol/L谷an酰胺及1%双抗（青mei素/链mei素），为细胞提供充足营养并抑制污染。培养环境需严格控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度条件下，当细胞融合度达到80%-90%时进行传代。传代时先用PBS缓冲液轻柔冲洗细胞2次，再加入0.25%yi酶-EDTA消化液，37℃孵育3-5分钟至细胞脱落，加入含血清的培养基终止消化，吹打均匀后按1:3比例接种至新培养瓶。冻存时采用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的冻存液，将细胞密度调整为5×10^6-1×10^7个/mL，梯度降温后存入液氮，复苏时快速解冻并离心去除DMSO，可有效保障细胞活力。

Daoy细胞的科研应用价值覆盖髓母细胞瘤研究的多个核心领域。在发病机制研究中，借助其典型的遗传变异特征，可深入探究MYC基因扩增、Wnt信号通路异常等分子事件在肿瘤发生发展中的调控作用，为揭示髓母细胞瘤的致病机理提供直接实验依据。在药物研发方面，该细胞系是抗脑肿瘤药物筛选的理想模型，可用于评估替mo唑胺等临床hua疗药物的疗效，同时为极光激酶抑制剂、Hedgehog信号通路抑制剂等新型靶向药物的活性验证提供支撑，部分药物已通过该模型证实对髓母细胞瘤的抑制效果。此外，其高成瘤性的特点使其成为肿瘤疫苗研发、血脑屏障药物递送系统研究的重要工具，在CAR-T细胞治疗等免疫疗法的临床前评估中也发挥着关键作用。同时，Daoy细胞在肿瘤侵袭转移机制、放疗敏感性研究等方面也具有独特优势，是中枢神经系统肿瘤研究领域不ke或缺的重要实验材料。