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kit225人T淋巴细胞
产品简介:

kit225人T淋巴细胞源自人 T 淋巴细胞,呈悬浮生长,保留 T 细胞免疫功能,依赖 IL-2 增殖,培养稳定,常用于 T 细胞免疫机制研究、抗肿瘤免疫实验及药物敏感性测试。

产品型号:试剂盒

更新时间:2025-11-06

厂商性质:代理商

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kit225人T淋巴细胞

kit225人T淋巴细胞是从人外周血 T 淋巴细胞中分离、经体外纯化培养建立的永生化 T 细胞系,核心特征为保留 T 淋巴细胞的免疫表型、IL-2 依赖性增殖特性及抗原应答功能,可在体外模拟人体 T 细胞的活化、增殖与免疫效应过程,是研究 T 细胞免疫机制、免疫相关疾病发病规律、抗肿瘤免疫及免疫相关药物研发的关键工具,在免疫学、肿瘤学、药理学及临床医学领域具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与形态功能特征来看,kit225 细胞的建立为 T 淋巴细胞功能研究提供了理想模型 —— 科研人员选取健康人外周血样本(经伦理审批),通过密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,利用免疫磁珠分选技术(针对 CD3 分子)纯化 T 淋巴细胞;在含重组 IL-2 的专用培养基中持续培养,历经 20-25 代传代筛选,获得形态均一、增殖稳定且保留 T 细胞核心功能的细胞群体,确立 kit225 人 T 淋巴细胞系。该细胞严格保留 T 淋巴细胞的核心特征:显微镜下呈圆形或不规则形悬浮生长,部分细胞聚集成小团,胞体中等大小(直径 10-15μm),胞质透明(瑞氏染色可见胞质呈淡蓝色),含少量嗜天青颗粒;细胞核呈圆形或椭圆形,染色质疏松,核仁不明显;免疫表型检测显示,细胞高表达 T 细胞特异性标志物(CD3 阳性率 98% 以上、CD4 阳性率 95% 以上、CD25 阳性率 90% 以上,CD25 为 IL-2 受体 α 链),同时表达 T 细胞活化相关分子(CD69 阳性率 85% 以上、HLA-DR 阳性率 78% 以上),与体内活化态 CD4⁺T 细胞表型高度一致。功能上,kit225 细胞保留 T 细胞关键免疫功能:在抗 CD3/CD28 抗体刺激下,可大量分泌 IL-2、IFN-γ 等细胞因子(ELISA 检测显示每 10⁶细胞 24 小时 IL-2 分泌量达 10-15ng),并能通过 TCR 介导的信号通路激活杀伤效应,模拟体内 T 细胞的免疫应答过程,为相关机制研究提供功能学基础。

在核心生物学特性方面,kit225 细胞凭借 “免疫功能稳定、IL-2 依赖可控、增殖活性强" 的优势,成为多场景免疫研究的理想模型。其一,IL-2 依赖性增殖与永生化特性:该细胞的核心优势在于依赖外源性 IL-2 维持增殖(无 IL-2 时 48 小时内增殖抑制率达 90% 以上),且 IL-2 浓度可精准调控增殖速率 —— 当 IL-2 浓度为 10U/mL 时,倍增时间约 24-30 小时;浓度提升至 50U/mL 时,倍增时间缩短至 18-22 小时,这种依赖性可模拟体内 T 细胞的生长调控机制;同时,细胞具有永生化特征,连续传代 80 次以上,仍保持悬浮生长形态与 T 细胞标志物表达,核型分析显示为正常二倍体(46, XX/XY),无染色体异常,遗传背景稳定,确保长期实验的可靠性。其二,可控的 T 细胞活化与功能调控:kit225 细胞的免疫功能可通过体外信号精准调控 —— 常规培养下(含 IL-2),细胞维持基础活化状态;加入抗 CD3/CD28 抗体(TCR 信号激活剂)后,24-48 小时内细胞活化标志物(CD69、CD154)表达提升 3-4 倍,细胞因子(IL-2、IFN-γ)分泌量增加 5-8 倍,模拟体内 T 细胞受抗原刺激后的活化过程;若加入具有免疫抑制作用的药物,可显著抑制细胞活化,CD69 表达下降 60%-70%,细胞因子分泌量回落至基础水平,为免疫抑制机制研究提供可控模型。其三,明确的免疫效应与药物响应:该细胞具有较强的体外免疫效应功能,与肿瘤细胞(如 K562 细胞)共培养时,可通过释放穿孔素、颗粒酶 B 介导杀伤作用,48 小时肿瘤细胞杀伤率达 50%-60%,符合体内 T 细胞的抗肿瘤免疫效应;同时,对调节免疫功能的药物表现出稳定的剂量依赖性响应,如 PD-1 抑制剂处理后,细胞活化程度提升 40%-50%,杀伤效率增加 30%-40%,药物作用机制与体内一致,为相关药物研发提供可靠模型。

在体外培养与维护细节上,kit225 细胞的操作需注重 “维持 IL-2 依赖性与免疫功能稳定"。培养时,推荐使用普通培养瓶(无需包被),培养基选用 RPMI 1640+10% 胎牛血清 + 10-50U/mL 重组 IL-2+1% 抗菌试剂,pH 值控制在 7.2-7.4(IL-2 活性对 pH 敏感,需严格控制);细胞接种密度推荐 5×10⁴-1×10⁵ cells/mL(如 T25 培养瓶接种 5-10mL 细胞悬液),密度过低易导致细胞活力下降,过高则出现营养竞争(需定期更换培养基,每 2-3 天更换 50% 体积新鲜培养基);传代时,无需消化处理,直接取对数生长期细胞悬液,按 1:2-1:3 的比例加入含新鲜 IL-2 的培养基即可,传代间隔 1-2 天(因增殖速率快,需及时传代避免过度密集);细胞冻存需选择对数生长期细胞(确保复苏后 IL-2 依赖性稳定),采用含 10% DMSO+20% 胎牛血清的冻存液(高血清浓度提升复苏存活率),梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存),复苏后存活率达 85% 以上,复苏后需立即加入含 IL-2 的培养基,培养 1-2 代待细胞活力与免疫功能恢复稳定后再用于实验。

在科研与应用领域,kit225 细胞的特性使其覆盖多个关键研究方向。其一,T 细胞免疫机制研究:该细胞是解析 T 细胞活化、增殖与分化机制的核心模型 —— 研究发现,kit225 细胞活化过程中,NF-κB、MAPK 信号通路持续激活(p65、ERK 磷酸化水平提升 4-5 倍),调控细胞因子分泌与增殖;抑制 NF-κB 活性后,细胞活化程度下降 70% 以上,增殖抑制率达 60%,明确该通路在 T 细胞活化中的关键作用;同时,通过检测 T 细胞受体(TCR)信号传导相关分子(如 ZAP-70、LAT)的表达与磷酸化,可为 T 细胞免疫信号网络研究提供分子依据。其二,免疫相关疾病机制研究:kit225 细胞可用于自身免疫病、免疫缺陷病的机制研究 —— 模拟自身免疫状态时,加入自身抗原肽(如胰岛素肽段)后,细胞可出现异常活化(CD69 表达升高 50%),分泌过量促炎因子(如 IL-17),模拟自身免疫病中 T 细胞异常活化特征;研究免疫缺陷时,通过敲低免疫相关基因(如 IL-2Rγ),观察细胞增殖与功能变化,发现 IL-2Rγ 敲低后细胞增殖抑制率达 80%,为 X 连锁严重联合免疫缺陷病(X-SCID)机制研究提供实验支持。其三,免疫相关药物研发与筛选:该细胞是免疫相关药物临床前研究的重要工具 —— 在 CAR-T 细胞相关研究中,可将 kit225 细胞改造为靶向特定抗原的 CAR-T 样细胞(如靶向 CD19),检测其对肿瘤细胞的杀伤效率,改造后杀伤率提升至 80%-90%;在免疫检查点调节剂筛选中,通过构建 PD-L1 过表达的肿瘤细胞与 kit225 细胞共培养体系,筛选能逆转免疫抑制的药物,如 PD-L1 抗体处理后,细胞杀伤效率恢复 60%-70%,为相关药物研发提供关键数据。其四,抗肿瘤免疫与感染免疫研究:kit225 细胞可用于抗肿瘤免疫机制与感染免疫研究 —— 研究肿瘤免疫逃逸时,与 PD-L1 阳性肿瘤细胞共培养,观察到细胞活化受抑(IFN-γ 分泌下降 50%),加入 PD-1 抑制剂后可恢复活化,明确 PD-L1/PD-1 通路的免疫抑制作用;研究病毒感染免疫时,与 HBV、HIV 感染的靶细胞共培养,细胞可通过分泌 IFN-γ 抑制病毒复制,病毒滴度下降 10³-10⁴倍,为感染免疫机制研究提供支持。

综上,kit225 人 T 淋巴细胞凭借 “免疫功能稳定、IL-2 依赖可控、科研适用性强" 的特性,成为免疫学与肿瘤学研究领域的 “核心工具细胞"。其在 T 细胞机制、免疫疾病、免疫相关药物研发等领域的应用,不仅推动了免疫学的发展,更在相关临床转化研究中发挥关键作用,为免疫相关疾病的诊断、治疗及预后评估提供重要实验依据,具有不可替代的科学价值与应用前景。



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