BT-474 [BT474]人乳腺导管瘤细胞

BT-474 [BT474]人乳腺导管瘤细胞是乳腺肿瘤基础研究与转化医学的重要体外模型，以激素受体阳性、HER2过表达的双重分子表型及稳定的恶性特征为核心，在激素依赖性乳腺癌发病机制、靶向治疗研发中地位关键，为女性乳腺恶性肿瘤研究提供可靠工具。

一、细胞来源与核心特征

该细胞系源自60岁女性乳腺导管瘤患者的原发肿瘤组织，经体外分离培养建立。原发灶来源使其保留了乳腺导管上皮恶变的典型特征，双重分子表型与临床中部分乳腺癌亚型高度契合，是研究复合型乳腺肿瘤的理想模型。

形态上，BT-474细胞呈典型上皮样，贴壁生长且排列紧密，部分形成细胞聚集体，细胞质丰富，细胞核大而饱满、核仁清晰可见，核质比高于正常乳腺上皮细胞，符合乳腺导管瘤细胞的形态特征。染色体为非整倍体（64-70条），存在片段缺失、易位及基因扩增等畸变，其中HER2基因扩增及激素受体相关基因异常zui为显著，为机制研究提供天然材料。

功能上，其zui显著特征是雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）阳性及人表皮生长因子受体2（HER2）过表达，双重信号通路异常激活。细胞增殖依赖激素信号调控，雌激素刺激可显著促进其生长，同时HER2过表达增强其恶性潜能。增殖能力较强，G1期细胞比例高、凋亡率低，侵袭迁移能力中等，体外可模拟乳腺导管瘤局部浸润过程。此外，高表达ERα、PR及HER2等标志物，PI3K/Akt、MAPK通路异常激活，为机制研究提供明确靶点。

二、培养条件与操作

培养需控制37℃、5% CO₂环境，维持培养基pH 7.2-7.4。常用RPMI-1640或DMEM培养基，添加10%-15%优质胎牛血清及广谱抗菌试剂，满足营养需求并预防污染，培养基中避免添加外源性雌激素以维持细胞天然表型。

传代时用PBS洗涤细胞2-3次，加细胞消化液37℃孵育3-5分钟，待细胞边缘变圆、间隙增大后用血清培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，按1:2-1:4比例接种。因细胞贴壁能力较强，消化时间需精准控制，避免过度消化损伤细胞。

长期培养需每2-3天换液，定期用台盼蓝检测活性（活细胞率≥90%），并验证ER、PR及HER2表达水平，确保细胞分子表型稳定与实验结果可靠。

三、核心研究应用

1. 发病机制研究：作为双重表型模型，可解析雌激素信号与HER2信号通路的交互作用，探索激素受体与HER2协同调控乳腺导管瘤发生的分子机制，为复合型乳腺癌发病规律提供依据。

2. 靶向治疗研究：用于激素调节剂（如他莫xi芬）与HER2抑制剂（如曲妥zhu单抗）的联合用药研究，分析药物协同作用机制及耐药产生原因，为临床联合治疗策略提供支持。

3. 药物研发：筛选针对ER、PR及HER2的新型靶向药物，评估药物对细胞增殖、信号通路活性的影响，为乳腺导管瘤精准治疗药物研发提供关键数据。

四、优势与局限

优势在于ER/PR阳性及HER2过表达的双重表型稳定，可同时开展激素调控与靶向治疗研究；贴壁生长状态良好，培养操作简便，适配高通量实验。局限是无法模拟三阴性或单一表型乳腺癌亚型，需结合MCF-7、SK-BR-3等细胞验证；缺乏体内乳腺微环境，部分结果需动物模型确认；长期培养可能出现HER2表达波动，需定期验证。

综上，BT-474细胞是乳腺导管瘤研究的核心工具，虽有局限，但通过多模型互补验证，在双重信号机制、联合靶向治疗研发中价值显著，为女性乳腺恶性肿瘤基础研究与临床转化提供重要支撑。