L6大鼠成肌细胞源自新生 SD 大鼠骨骼肌，呈梭形贴壁生长，可分化为多核肌管，培养稳定，常用于骨骼肌研究、代谢疾病机制探索及相关药物评价。

L6大鼠成肌细胞

L6大鼠成肌细胞是从新生 SD 大鼠肌肉组织中分离、经体外纯化培养建立的永生性成肌细胞系，核心特征为典型成肌细胞形态、稳定的增殖能力及可控的肌分化潜能，可在体外模拟肌细胞的增殖与分化过程，是研究肌肉发育、肌损伤修复、代谢疾病机制及相关药物评价的关键工具，在运动医学、细胞生物学及再生医学领域具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与表型特征来看，L6 大鼠成肌细胞的建立为肌肉研究提供了标准化体外模型 —— 科研人员选取新生 1-3 天的 SD 大鼠，无菌条件下分离下肢肌肉组织（如胫骨前肌、腓肠肌），剔除脂肪与结缔组织后，采用组织块贴壁法结合酶解法获取单细胞悬液；通过差速贴壁法去除成纤维细胞等杂细胞，接种于含血清的专用培养基中培养；历经 10-15 代传代后，筛选出形态均一、增殖稳定且保留肌分化能力的细胞群体，确立 L6 成肌细胞系。该细胞系严格保留成肌细胞核心表型：显微镜下呈梭形或纺锤形，胞体细长、边缘清晰，胞质透明含少量颗粒，细胞核呈椭圆形且位于细胞中央；体外培养时呈贴壁生长，增殖期细胞排列疏松，密度增加后逐渐平行排列；免疫组化检测显示，细胞高表达成肌细胞特异性标志物（α-actin、MyoD、Myogenin），阳性率达 95% 以上，几乎不表达成纤维细胞（Vimentin）与内皮细胞（CD31）标志物，确保细胞纯度；核型分析为稳定二倍体（42 条染色体，与 SD 大鼠正常核型一致），无染色体异常，遗传背景清晰，为肌肉相关研究提供高纯度标准化材料。

在核心生物学特性方面，L6 大鼠成肌细胞凭借 “增殖稳定、分化可控" 的优势，成为多场景研究的理想模型。其一，优异的体外增殖适应性：L6 成肌细胞对培养条件要求温和，可在 DMEM、MEM 等基础培养基中生长，添加 10%-15% 胎牛血清即可满足增殖需求，无需额外生长因子；在含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基中，倍增时间约 24-30 小时，不同传代批次（10-80 代）差异＜8%；连续传代 80 次以上，仍保持梭形形态，无衰老或恶性转化迹象；贴壁能力适中，0.25% 细胞消化液处理 3-5 分钟可获单细胞悬液，适合大规模培养与高通量实验，新手易操作。其二，可控的肌分化潜能：L6 成肌细胞分化能力明确，可通过培养条件精准调控 —— 细胞融合度达 80%-90% 时，更换为含 2% 马血清的分化培养基，2-3 天细胞开始变长、融合，5-7 天形成成熟多核肌管（每管含 5-20 个核）；分化过程中，肌分化标志物（Troponin T、MHC）表达量显著升高，7 天 MHC 阳性率达 90% 以上；肌管可在氯hua钾或电刺激下节律性收缩，与体内肌纤维功能高度一致，为肌分化机制研究提供可控系统。其三，代谢特征与疾病适配性：L6 成肌细胞代谢特征与体内肌肉相似，是代谢疾病研究的理想模型 —— 可高效利用葡萄糖与脂肪酸供能，胰岛素处理后葡萄糖摄取率提升 2-3 倍（2-NBDG 荧光检测可定量）；高糖高脂条件下，会出现胰岛素抵抗（胰岛素诱导的葡萄糖摄取率下降 40% 以上），与 2 型糖尿病患者肌组织代谢异常相符，为糖尿病机制研究与药物筛选提供支持。

在体外培养与维护细节上，L6 大鼠成肌细胞操作便捷性是其广泛应用的关键。增殖期使用含 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸的 DMEM 高糖培养基，分化期换为含 2% 马血清的 DMEM 高糖培养基，pH 控制在 7.2-7.4，添加抗菌试剂防污染；培养环境为 37℃、5% 二氧化碳、95% 湿度恒温箱；接种密度推荐 1×10⁴ cells/cm²（6 孔板每孔 2×10⁵个），密度过低易分化延迟，过高提前接触抑制；传代时待融合度 70%-80%，PBS 冲洗后加 0.25% 消化液，37℃孵育 3-5 分钟，血清培养基终止后吹打传代，比例 1:3-1:5；细胞常温运输 24 小时存活率＞90%，可冻存于 - 80℃或液氮，复苏存活率＞85%，方便共享与长期保存。

在科研与应用领域，L6 大鼠成肌细胞的特性使其覆盖多关键研究方向。其一，肌肉发育与分化研究：可解析肌分化信号通路 —— 干扰 MyoD、Myogenin 等转录因子，肌管形成率下降 50% 以上，明确其核心作用；激活 Wnt 通路可促进肌分化（MHC 阳性率升 30%），激活 Notch 通路则抑制，为肌肉发育机制提供直接证据。其二，肌损伤修复与再生研究：可模拟体内肌损伤修复 —— 过氧化氢处理模拟氧化损伤后，细胞会激活 IGF-1、MGF 等修复基因，且仍可正常分化；还可作为种子细胞与生物支架复合，在支架上形成肌管，为肌损伤细胞治疗提供基础。其三，代谢疾病与药物筛选：是糖尿病、肥胖研究的重要工具 —— 高糖高脂处理 7-10 天可构建胰岛素抵抗模型，检测 IRS-1、Akt 磷酸化水平解析抵抗机制；胰岛素增敏剂处理后，抵抗状态显著改善（葡萄糖摄取率升 40% 以上），为代谢药物研发提供数据。其四，运动生理与肌肉功能研究：可模拟运动对肌肉的影响 —— 机械拉伸或电刺激后，细胞线粒体相关基因（PGC-1α）表达上调，线粒体含量增 20%-30%，与运动诱导的肌线粒体生物合成一致，为运动生理机制研究提供体外模型。

综上，L6 大鼠成肌细胞凭借稳定增殖、可控分化及相似代谢特征，成为肌肉相关研究的 “基石级" 工具细胞。其在基础研究、疾病建模、药物筛选中的应用，推动了肌肉生物学发展，更在再生医学、代谢疾病治疗等临床转化中发挥关键作用，至今仍是全球实验室常用成肌细胞系，具有不可替代的科学价值与应用意义。