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NCI-H2087人非小细胞肺腺癌细胞
产品简介:

NCI-H2087人非小细胞肺腺癌细胞源自人非小细胞肺腺癌患者,贴壁生长,携带相关分子特征,生物学稳定,是肺腺癌机制研究与抗肿瘤药物筛选的常用实验模型。

产品型号:试剂盒

更新时间:2025-10-30

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产品介绍

NCI-H2087人非小细胞肺腺癌细胞

NCI-H2087人非小细胞肺腺癌细胞是由美国国家癌症研究所(NCI)分离建立的人非小细胞肺腺癌细胞系,源自一名非小细胞肺腺癌患者的肿瘤组织。因其生物学特性稳定,且高度契合临床非小细胞肺腺癌的病理特征与分子背景,成为全球肺腺癌基础研究、药物研发及耐药机制探索领域的重要实验模型,为破解肺腺癌治疗难题提供了关键支撑。

一、核心生物学特性

  1. 病理与形态特征

作为典型的非小细胞肺腺癌细胞系,NCI-H2087 具备肺腺癌标志性的病理表型,可表达肺腺癌相关抗原(如 CK7、TTF-1),与临床非小细胞肺腺癌患者肿瘤组织的病理特征高度吻合。在倒置显微镜下观察,细胞呈多边形或不规则梭形,细胞质丰富且边界清晰,细胞核大而饱满,核仁明显,核质比高于正常肺上皮细胞;生长方式为典型贴壁生长,细胞紧密附着于培养皿表面,呈 “铺路石" 样排列,传代时需通过消化处理使细胞脱离基质,分散成单细胞悬液。

  1. 分子遗传特征

NCI-H2087 携带非小细胞肺腺癌关键的分子遗传学改变,其中zui显著的KRAS 基因突变(常见于第 2 号外显子),这一分子特征与肺腺癌的发生发展、治疗敏感性密切相关,也是临床肺腺癌患者常见的驱动突变类型之一。同时,该细胞系还存在 TP53 基因突变,可导致细胞凋亡机制紊乱,促使细胞无限增殖。此外,NCI-H2087 不携带表皮生长因子受体(EGFR)敏感突变及间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合,进一步明确了其作为 KRAS 突变型肺腺癌特异性模型的价值,为针对性研究该亚型肺腺癌提供了可靠工具。

  1. 生长动力学特性

在标准培养条件下,NCI-H2087 的种群倍增时间约为 50-60 小时,增殖速率适中,细胞活力稳定(常规培养时活率可达 85%-90%)。当细胞融合度达到 80%-90% 时进入对数生长期,此时细胞形态均一、增殖活跃,是开展药物处理、基因编辑、信号通路分析等实验的最佳时期;若细胞融合度过高(超过 95%),易出现接触抑制,导致部分细胞凋亡或形态异常(如细胞体积增大、细胞质颗粒增多),因此需及时传代以维持细胞良好生长状态。

二、主要研究应用场景

  1. 肺腺癌发病机制研究

依托与临床肺腺癌的分子同源性,NCI-H2087 成为解析 KRAS 突变型肺腺癌恶性生物学行为机制的理想工具。例如,通过 RNA 干扰技术下调该细胞中突变 KRAS 基因的表达,可观察到细胞增殖速率显著减缓、迁移侵袭能力下降,进而明确 KRAS 突变在肺腺癌进展中的促癌作用;此外,利用该细胞系研究 TP53 基因突变对细胞周期的影响,可揭示肺腺癌细胞逃避细胞周期检查点、实现无限增殖的分子机制,为挖掘肺腺癌潜在治疗靶点(如细胞周期调控蛋白)提供实验依据。同时,NCI-H2087 也常用于肺腺癌上皮 - 间质转化(EMT)机制研究,通过检测不同处理条件下 EMT 标志物(如 E - 钙粘蛋白、N - 钙粘蛋白)的表达变化,探索调控肿瘤转移的关键信号通路。

  1. 抗肿瘤药物筛选与评价

作为体外药物活性检测的经典模型,NCI-H2087 广泛应用于肺腺癌抗肿瘤药物的筛选与活性验证,尤其适用于 KRAS 突变型肺腺癌靶向药物的研发。在药物筛选实验中,可通过 MTT 法、CCK-8 法检测候选药物对该细胞增殖的抑制效果,计算半数抑制浓度(IC50),初步评估药物活性;对于已进入临床前研究的药物,还可利用该细胞系检测药物对细胞凋亡的诱导作用(如流式细胞术检测 Annexin V/PI 双阳性细胞比例),为药物临床转化提供关键数据。此外,NCI-H2087 也可用于药物联合治疗方案优化,如将 KRAS 抑制剂与hua疗药物组合,观察协同抑制效果,为临床联合用药提供参考。

  1. 肺腺癌耐药机制与逆转研究

KRAS 突变型肺腺癌临床治疗中易出现耐药,NCI-H2087 是建立耐药细胞株、解析耐药机制的重要载体。通过逐步提高药物浓度诱导该细胞系建立耐药细胞株(如 NCI-H2087/DR),对比敏感株与耐药株的基因表达谱(如 RNA 测序)、蛋白水平变化(如 Western blot),可挖掘耐药相关分子。研究发现,耐药株中 ABC 转运蛋白(如 ABCB1)表达显著升高,该蛋白可将细胞内药物泵出体外,导致耐药;通过抑制 ABC 转运蛋白活性,可有效逆转耐药,为临床耐药患者治疗提供新策略。此外,耐药株中 MAPK 信号通路异常激活,也是耐药的重要原因,为开发通路抑制剂提供了方向。

三、细胞培养关键要点

  1. 培养基选择与配置

NCI-H2087 常规使用 RPMI-1640 培养基培养,需添加 10% 胎牛血清(FBS,经 56℃热灭活 30 分钟,去除补体成分),为细胞提供营养物质与生长因子;同时加入适量抗菌试剂预防细菌污染。培养基 pH 值需控制在 7.2-7.4,使用前在 37℃水浴锅中预热至室温,避免低温刺激细胞。

  1. 培养环境控制

细胞需置于 37℃、5% CO₂、湿度 95% 以上的恒温培养箱中:37℃维持细胞代谢与酶活性,5% CO₂稳定培养基 pH 值,95% 以上湿度防止培养基蒸发导致渗透压改变。培养过程中需定期检查培养箱参数,确保环境稳定。

  1. 传代与冻存操作

当细胞融合度达 80%-90% 时传代:用 PBS 缓冲液洗涤细胞 2 次,去除残留血清;加入适量消化液,37℃孵育 1-2 分钟,待细胞变圆后加含血清培养基终止消化;轻柔吹打制成单细胞悬液,按 1:3-1:5 比例接种到新培养皿。

冻存选用对数生长期细胞,冻存液为 90% FBS+10% DMSO;细胞悬液与冻存液混合后分装冻存管,梯度降温(4℃30 分钟→-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)。复苏时,冻存管快速放入 37℃水浴融化,加 5 倍预热培养基离心去 DMSO,重悬后接种,24 小时内不换液以提高存活率。

四、实验使用注意事项

  1. 操作需遵守生物安全二级(BSL-2)规范,佩戴无菌手套、口罩与实验服,避免细胞接触皮肤;实验后用 75% 乙醇消毒器材与台面,防范生物安全风险。

  1. 药物处理实验需设空白对照组、溶剂对照组,排除干扰;设 3 个以上复孔,减少实验误差。

  1. 长期培养每 10-15 代通过 STR 分型验证细胞身份,避免交叉污染;每 5-8 代检测支原体,污染细胞立即丢弃,不滥用药物挽救。

  1. 传代不超过 30 代,超过后复苏早期冻存细胞(如 5-10 代),防止细胞生物学特性改变,保证实验结果稳定可重复。


 

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