293ET人胚肾细胞

293ET人胚肾细胞是293细胞家族中功能精准的衍生株系，通过在293E细胞基础上进一步优化筛选构建而成，核心特征为稳定表达EB病毒核抗原1（EBNA1）并保留高效贴壁生长能力。“ET"的命名融合了“EBNA1表达"与“强化贴壁（Enhanced Adhesion）"的双重属性，它既继承293E细胞的外源基因长效表达优势，又通过贴壁特性优化适配规模化培养，成为重组蛋白生产与病毒载体构建的优质工具。

293ET细胞的核心竞争力源于EBNA1功能与贴壁特性的协同优化。EBNA1蛋白可特异性结合含EBV复制起点（oriP）的质粒，介导外源基因以游离形式稳定复制，避免基因组整合导致的表达波动，使目的蛋白可连续表达数月；而定向筛选强化的贴壁能力，使其能在多层培养瓶、细胞工厂等规模化设备中形成均匀致密的细胞单层，单位培养空间的蛋白产量较普通293E细胞提升20%-30%，兼顾表达稳定性与生产效率。

在重组蛋白规模化生产中，293ET细胞表现突出。对于需复杂翻译后修饰的蛋白（如单克隆抗体、细胞因子受体），其完善的蛋白加工系统可保障产物活性；贴壁特性使其适配工业常用的多层培养体系，无需依赖昂贵的生物反应器即可实现中规模生产。例如在抗体制备中，转染含抗体基因的oriP质粒后，细胞可在细胞工厂中稳定表达抗体，后续通过常规纯化工艺即可获得高纯度产物，大幅降低生产成本。

病毒载体构建是293ET细胞的重要应用场景。其EBNA1介导的长效表达系统，可用于腺相关病毒（AAV）、腺病毒等载体的包装与滴度扩增——将病毒载体质粒转染后，游离复制的质粒持续提供病毒蛋白表达模板，配合贴壁细胞形成的稳定培养体系，可高效产出高滴度病毒颗粒。在基因治疗研究中，这些病毒载体可用于目的基因递送，为遗传病、肿瘤等疾病的治疗研究提供可靠工具。

293ET细胞的培养需兼顾贴壁维护与表达稳定。推荐使用含10%胎牛血清的DMEM/F12混合培养基，该配方可强化贴壁能力，培养环境为37℃、5% CO₂。细胞呈典型上皮细胞样，贴壁紧密，增殖周期约32-38小时，当细胞融合度达85%-90%时传代zuijia。传代时需用0.25%胰dan白酶-EDTA消化液处理2-3分钟，确保细胞wan全脱落，传代比例1:4-1:6，长期培养需添加低浓度潮霉素，维持EBNA1基因稳定表达。

在基础研究领域，293ET细胞的贴壁特性与稳定表达能力使其成为理想的实验模型。在蛋白相互作用研究中，可同时稳定表达两种荧光标记蛋白，通过共聚焦显微镜观察相互作用；在药物筛选中，均匀贴壁的细胞层可保障高通量实验的重复性，减少孔间误差。目前，293ET细胞已广泛应用于生物医药企业的中试生产与科研机构的功能研究，其“稳定表达+易培养"的特性，为基础研究向产业化转化提供了高效桥梁。