LLC小鼠肺癌细胞源自 C57BL/6 小鼠自发性肺癌，具高移植成功率与致瘤性，可模拟肺癌生长，常用于肺癌机制、抗肺癌药物筛选及肿瘤微环境研究。

LLC小鼠肺癌细胞

LLC小鼠肺癌细胞是 1951 年从 C57BL/6 小鼠自发性肺鳞癌中分离建立的经典肿瘤细胞系，核心特征为稳定的体外培养能力、高体内致瘤性及广谱的实验适用性，可在免疫健全小鼠体内高效构建原发灶模型，同时具备一定转移潜能，是肺癌基础研究、药物筛选及肿瘤微环境机制探索中应用zui广泛的体外 - 体内联动模型，在肺癌研究领域具有不可替代的 “通用性工具" 地位。

从细胞来源与历史背景来看，LLC 细胞的建立填bu了小鼠肺癌研究中 “稳定可传代细胞系" 的空白 ——20 世纪 50 年代初，科研人员在 C57BL/6 近交系小鼠中发现一例自发性肺部鳞癌，通过无菌操作剥离肿瘤组织，经机械研磨与酶解处理获得单细胞悬液，在含血清的基础培养基中成功实现体外贴壁培养，历经 20 余代传代纯化后，获得形态均一、增殖稳定的细胞群体，即 LLC 细胞系。该细胞系严格保留原发肺癌的病理特征：显微镜下呈典型上皮样 - 梭形混合形态，多数细胞为短梭形，胞质丰富，核大深染、核仁清晰，体外培养时呈致密贴壁生长，形成不规则细胞群落；HE 染色显示，其体内形成的肿瘤组织呈巢状排列，细胞异型性显著，与临床人类肺鳞癌的病理形态高度相似；免疫表型检测显示，细胞高表达肺癌广谱标志物（如细胞角蛋白 18 CK18、细胞角蛋白 19 CK19），同时表达鳞癌相关标志物（如细胞角蛋白 10 CK10），核型分析为稳定近二倍体（染色体数目 40-42 条，含特征性 8 号染色体三体），确保了细胞遗传背景的稳定性与肺癌表型的专一性，为后续近 70 年的肺癌研究提供了标准化工具。

在核心生物学特性方面，LLC 细胞凭借 “体外易培养、体内易成瘤" 的双重优势，成为肺癌研究的 “入门级" 与 “规模化" 模型shou选。其一，稳定的体外培养特性与高增殖活性：LLC 细胞在体外培养条件下适应性ji强，可在多种基础培养基（如 DMEM、RPMI 1640）中稳定生长，无需特殊生长因子添加；在含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基中，细胞倍增时间约为 22-26 小时，显著快于其他小鼠肺癌细胞系（如 3LL 细胞的 28-32 小时）；传代比例可灵活调整为 1:3-1:5，连续传代 50 次以上仍保持形态与增殖速率稳定，且无明显细胞衰老或恶性程度异常升高；同时，细胞对消化液敏感性适中，0.25% 细胞消化液处理 3-4 分钟即可实现单细胞悬液，不易出现消化过度或贴壁过牢的问题，非常适合大规模体外实验（如高通量药物筛选、基因编辑）。其二，高体内致瘤性与模型构建灵活性：LLC 细胞在同品系 C57BL/6 小鼠中的致瘤率达 100%，且模型构建方式多样 —— 皮下接种（右侧腋窝或背部）时，仅需接种 1×10⁶个细胞，7-10 天即可形成直径 0.5cm 可触及的原发灶，21 天左右原发灶直径可达 1.5-2cm，肿瘤生长曲线稳定，无批次差异；尾静脉注射接种（模拟血行转移）时，28 天肺转移率可达 60%-70%，双肺形成 30-60 个肉眼可见的转移结节（数量虽低于 LLT 高转移亚株的 80-120 个，但稳定性更优）；肺内原位接种（通过胸腔注射）时，可直接模拟肺癌原发灶生长微环境，肿瘤局限于肺部，无明显全身扩散，适用于肺原位癌机制研究；三种模型的构建成功率均达 95% 以上，可满足不同研究场景需求，是目前肺癌体内实验中 “性jia比zui高" 的模型之一。其三，适度转移潜能与免疫兼容特性：LLC 细胞的转移能力虽不及经筛选的 LLT 亚株，但具备 “可控的基础转移水平"—— 皮下接种后，肿瘤主要通过淋巴道转移至区域淋巴结（转移率约 50%），通过血行转移至肺部（转移率 60%-70%），极少转移至肝、肾等远处器官，这种 “中等转移活性" 使其既能模拟临床肺癌的转移特征，又避免了因转移过快导致的实验周期缩短；同时，因源于 C57BL/6 小鼠，LLC 细胞可在免疫健全小鼠体内生长，不引发急性免疫排斥，且能与宿主免疫系统形成 “动态互作"—— 瘤灶内可检测到肿瘤相关巨噬细胞（TAM）、调节性 T 细胞（Treg）浸润，其中 Treg 占 CD4⁺T 细胞的 15%-20%（低于 LLT 的 25%），免疫抑制程度适中，既适合肿瘤免疫相关药物评价，也可用于 “肿瘤 - 免疫互作" 机制研究，适用范围远广于免疫缺陷模型。

在体外培养与模型构建细节上，LLC 细胞的操作便捷性是其广泛应用的关键。体外培养时，常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基（或 RPMI 1640 培养基，效果无显著差异），添加 1% 非必需氨基酸（优化细胞增殖状态），无需额外添加生长因子，培养基 pH 值控制在 7.2-7.4，添加抗菌试剂预防污染；培养条件为 37℃、5% 二氧化碳、95% 湿度的恒温培养箱，细胞贴壁能力较强，建议使用普通培养瓶（无需包被），接种密度为 1×10⁴ cells/cm²（密度过低易导致细胞生长缓慢，过高则出现接触抑制）；传代时待细胞融合度达 85%-90%，用 0.25% 细胞消化液 37℃孵育 3-4 分钟，终止后轻柔吹打形成单细胞悬液，传代间隔 2-3 天，操作难度低，新手易掌握。体内模型构建时，需根据研究目的选择接种方式：皮下接种推荐细胞浓度 1×10⁶个 /mL，每只小鼠注射 0.2mL（右侧腋窝），适用于药物抑瘤率检测；尾静脉接种推荐浓度 5×10⁵个 /mL，每只注射 0.2mL，适用于抗转移药物评价；肺原位接种需在麻醉下进行，每只注射 1×10⁵个细胞（0.05mL），适用于原位癌研究；所有模型均需使用 6-8 周龄雌性 C57BL/6 小鼠（体重 18-22g），以确保肿瘤生长一致性。

在科研与应用领域，LLC 细胞的 “通用性" 使其覆盖肺癌研究的多个关键方向。其一，肺癌基础机制研究：LLC 细胞是探索肺癌增殖、凋亡及信号通路的理想模型 —— 例如，研究 MAPK/ERK 信号通路时，LLC 细胞在 EGF 刺激下 ERK 磷酸化水平显著升高，可通过抑制剂（如 U0126）精准阻断该通路，观察到细胞增殖抑制率达 40% 以上，凋亡率提升 2-3 倍；研究肿瘤代谢时，LLC 细胞表现出典型的 “瓦伯格效应"（糖酵解增强），葡萄糖摄取率是正常肺上皮细胞的 3-4 倍，为肺癌代谢重编程机制研究提供了可靠系统。其二，抗肺癌药物高通量筛选：因体外培养稳定、体内模型构建高效，LLC 细胞是药物筛选的 “主力模型"—— 体外筛选时，可在 96 孔板中构建细胞模型，通过 MTT 法或 CCK-8 法快速检测药物对细胞的抑制率，Z' 因子达 0.7 以上（筛选可靠性高）；体内验证时，将体外活性药物用于 LLC 皮下荷瘤小鼠，通过测量肿瘤体积计算抑瘤率，经典抗肺癌药物对 LLC 的抑瘤率可达 45%-55%，与临床响应趋势一致，为药物临床前评价提供标准化数据。其三，肿瘤微环境与肿瘤免疫研究：LLC 荷瘤小鼠的肿瘤微环境具有 “中等复杂度"，既包含 TAM、Treg 等免疫抑制细胞，也存在一定数量的 CD8⁺杀伤性 T 细胞（占瘤内 T 细胞的 10%-15%），是肿瘤免疫相关药物的 “初筛模型"—— 肿瘤免疫相关药物处理后，LLC 皮下瘤体积缩小 50% 左右，瘤内 CD8⁺T 细胞浸润增加至 25%-30%，虽效果不及 LLT 模型（肿瘤免疫相关药物对 LLT 抑瘤率 60% 以上），但因模型构建成本低、周期短，更适合大规模肿瘤免疫相关药物初筛。其四，基因编辑与联合疗法验证：LLC 细胞易被慢病毒、腺病毒等载体感染，基因编辑效率高 —— 通过 CRISPR/Cas9 技术敲除 LLC 细胞的 VEGF 基因后，其体内肿瘤血管密度下降 40%，肺转移率从 70% 降至 35%，为抗血管生成疗法的机制验证提供了基因工程模型；研究 “抗增殖药物 + 抗血管" 联合疗法时，两种药物联合使用对 LLC 的抑瘤率达 75% 以上，显著高于单一药物，为临床联合方案优化提供了实验依据。

综上，LLC 小鼠肺癌细胞凭借其稳定的体外培养特性、高体内致瘤性及广谱的实验适用性，成为肺癌研究领域的 “基石级" 工具细胞。其在基础机制、药物筛选、肿瘤免疫研究等领域的广泛应用，不仅推动了肺癌研究的标准化进程，更为新型疗法的临床转化提供了可靠的前期数据支持，尤其适合科研入门、规模化实验及多方向联动研究，至今仍是全球肺癌实验室使用频率最高的小鼠肿瘤细胞系之一，具有不可替代的科学价值与应用意义。