LLT小鼠Lewis肺癌瘤株源自 Lewis 肺癌，具稳定移植性与致瘤性，可模拟肺癌生长转移，常用于肺癌机制、抗肺癌药物筛选及肿瘤微环境研究。

LLT小鼠Lewis肺癌瘤株

LLT小鼠Lewis肺癌瘤株是从经典 Lewis 肺癌细胞系中经体内筛选、纯化获得的高转移性肺癌瘤株，核心特征为稳定的移植致瘤性、明确的肺部转移倾向及贴近临床肺癌的病理表型，可在免疫健全小鼠体内高效模拟肺癌原发灶生长与远端转移过程，成为研究肺癌发病机制、转移调控及抗肺癌药物（尤其抗转移药物）研发的核心体内模型，在肺癌基础研究与临床转化领域具有不可替代的应用价值。

从瘤株来源与筛选背景来看，LLT 瘤株的原始细胞追溯至 1951 年建立的 Lewis 肺癌细胞系 —— 该细胞系源自 C57BL/6 小鼠自发性肺癌，因易在同品系小鼠体内移植成活、致瘤率高，成为肺癌研究的经典模型。但野生型 Lewis 肺癌细胞的转移能力存在异质性，部分亚克隆仅能形成原发灶，难以模拟临床肺癌常见的远端转移。为获得高转移性亚株，科研人员通过 “体内筛选法" 逐步纯化：将野生型 Lewis 肺癌细胞接种于 C57BL/6 小鼠右侧腋窝皮下，待形成直径 1-1.5cm 原发灶后，解剖分离肺部转移结节，研磨成单细胞悬液后再次皮下接种；重复该 “原发灶 - 转移灶" 筛选过程 5-6 代，最终获得转移能力稳定的 LLT 瘤株。该瘤株严格保留 Lewis 肺癌的基础病理特征，同时具备高转移性：HE 染色显示，瘤细胞呈多边形或短梭形，核大深染、核仁明显，排列成巢状或条索状，与临床肺鳞癌病理形态高度相似；免疫组化检测显示，瘤细胞高表达肺癌标志物（如细胞角蛋白 18 CK18、癌胚抗原 CEA），同时高表达转移相关蛋白（如基质金属蛋白酶 MMP-9、血管内皮生长因子 VEGF），核型分析为稳定近二倍体（染色体数目 40-42 条），确保了瘤株遗传背景的稳定性与转移表型的专一性。

在核心生物学特性方面，LLT 瘤株因经体内筛选优化，展现出优于野生型 Lewis 肺癌的移植性与转移性。其一，高移植成功率与稳定致瘤性：LLT 瘤株在同品系 C57BL/6 小鼠中的皮下移植成功率达 100%，接种 1×10⁶个瘤细胞后，7-10 天即可形成直径 0.5cm 左右的可触及原发灶，21-28 天原发灶直径可达 1.5-2cm，致瘤率无批次差异；若采用尾静脉注射接种（模拟血行转移），肺转移率达 95% 以上，28 天后解剖可见双肺布满直径 0.1-0.3cm 的转移结节，且转移结节数量稳定（每只小鼠 80-120 个），显著高于野生型 Lewis 肺癌（肺转移率 60%-70%，转移结节 30-60 个），这一特性为肺癌原发灶与转移灶相关研究提供了稳定的体内模型。其二，明确的转移路径与器官倾向性：LLT 瘤株的转移过程高度模拟临床肺癌，皮下接种后主要通过淋巴道与血行转移，优先转移至肺部（转移率 95%），其次为纵隔淋巴结（70%）、肝脏（30%），极少转移至其他器官，形成与临床 “肺癌易肺内转移" 一致的器官倾向性；通过免疫荧光追踪瘤细胞发现，接种后 7 天即可在肺组织中检测到少量瘤细胞定植，14 天形成微转移灶，21 天发展为肉眼可见的转移结节，转移进程清晰可控，为研究肺癌转移的 “定植 - 增殖" 关键阶段提供了理想模型。其三，免疫兼容与微环境互作能力：LLT 瘤株源于 C57BL/6 小鼠，可在免疫健全小鼠体内生长，不引发强烈免疫排斥反应，且能与宿主肿瘤微环境（如肿瘤相关巨噬细胞 TAM、调节性 T 细胞 Treg）形成互作 —— 瘤细胞分泌的趋化因子 CCL2 可招募 TAM 聚集于原发灶，TAM 进一步分泌 TGF-β 促进瘤细胞上皮 - 间质转化（EMT），增强转移能力；同时，瘤灶内 Treg 比例显著升高（占 CD4⁺T 细胞的 25%，正常组织仅 5%），抑制抗肿瘤免疫，这一特性wan美复现临床肺癌的免疫抑制微环境，为免yi治疗药物（如 PD-1 抑制剂）的体内评价提供了生理相关模型。

在瘤株维护与模型构建细节上，LLT 瘤株需通过体内传代或体外培养维持，两种方式各有适用场景。体内传代时，选择生长旺盛、无坏死的 LLT 原发灶（接种后 21 天），无菌条件下剥离瘤组织，去除包膜与坏死部分，剪成 1mm³ 小块，采用皮下接种（每只小鼠右侧腋窝接种 1 块）或细胞悬液接种（研磨后调整浓度为 1×10⁶个 /mL，每只接种 0.2mL），传代间隔 21-28 天，确保瘤株转移能力稳定；体外培养时，将瘤组织块用细胞消化液处理获得单细胞，接种于含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基，37℃、5% 二氧化碳培养箱中培养，细胞呈贴壁生长，倍增时间约 24-30 小时，传代比例 1:3-1:4，体外培养不超过 10 代（避免转移能力衰退），需定期通过体内接种验证致瘤性与转移性。模型构建方面，根据研究需求可选择不同接种方式：皮下接种适用于抗原发灶药物评价，尾静脉接种适用于抗转移药物评价，肺内原位接种（通过qi管镜注射）适用于模拟肺癌原发灶生长微环境，三种模型的构建成功率均达 90% 以上，可满足不同研究场景需求。

在科研与应用领域，LLT 瘤株的价值集中在肺癌体内研究的关键场景。其一，肺癌转移机制研究：利用 LLT 瘤株的稳定转移特性，通过转录组测序对比原发灶与肺转移灶瘤细胞，发现转移灶中 EMT 相关基因（如 Snail、Twist）表达量是原发灶的 2-3 倍，敲降 Snail 后肺转移率从 95% 降至 40%，明确 EMT 在转移中的核心作用；同时，发现瘤细胞表面整合素 αvβ3 与肺内皮细胞表面纤连蛋白结合，是瘤细胞肺定植的关键分子互作，为开发抗转移靶向药物提供新靶点。其二，抗肺癌药物体内评价：LLT 瘤株是抗肺癌药物（尤其抗转移药物）体内筛选的核心模型 —— 评价hua疗药物（如shun铂）时，皮下接种后给药，可通过测量原发灶体积（每 3 天测量一次）计算抑瘤率，同时解剖观察肺转移结节数量，综合评估药物对原发灶与转移灶的抑制效果；评价免yi治疗药物（如 PD-1 抗体）时，原位接种模型更能反映药物疗效，PD-1 抗体可使 LLT 原位瘤体积缩小 50% 以上，同时降低肺转移率至 50%，并伴随瘤灶内 CD8⁺T 细胞浸润增加（从 10% 升至 30%），为药物临床前评价提供可靠数据。其三，肺癌诊断标志物验证：基于 LLT 瘤株的分泌蛋白谱，筛选出转移相关标志物（如 MMP-9、VEGF），检测发现其在荷瘤小鼠血清中的浓度与肺转移结节数量呈正相关（r=0.85），且在临床肺癌患者血清中也呈现相同变化趋势，为开发肺癌转移的无创诊断标志物提供了体内验证模型。其四，基因治疗与联合疗法研究：LLT 瘤株可用于肺癌基因治疗的体内验证 —— 将携带抑癌基因 p53 的腺病毒通过尾静脉注射给药，可使 LLT 肺转移灶数量减少 60%，p53 蛋白在转移灶中有效表达；研究 “hua疗 + 免疫" 联合疗法时，shun铂与 PD-1 抗体联合使用对 LLT 原发灶的抑瘤率达 80%，显著高于单一药物（shun铂 45%、PD-1 抗体 50%），且能逆转肿瘤免疫抑制微环境，为临床联合疗法的优化提供实验依据。

综上，LLT 小鼠 Lewis 肺癌瘤株凭借其稳定的高转移性、贴近临床的病理与免疫表型，成为肺癌体内研究的核心模型。其在转移机制解析、抗肺癌药物评价、联合疗法研发等领域的应用，不仅为肺癌基础研究提供了生理相关的体内系统，更推动了抗转移、免yi治疗等新型疗法的临床转化，具有重要的科学价值与应用意义。